重组人过氧化物还原酶-5通过诱导巨噬细胞极化提高抗肿瘤免疫

肿瘤细胞能够采用不同的策略抑制人体免疫系统，使其不能正常杀伤肿瘤细胞。前期研究表明，重组人过氧化物还原酶-5 (human peroxiredoxin-5, hPRDX5)能够激活机体正常的抗肿瘤免疫反应，从而控制与清除肿瘤，然而，其确切的作用机制仍有待深入研究。本研究旨在探讨hPRDX5是否通过激活或者逆转小鼠巨噬细胞RAW264.7的极化状态，从而发挥其抗肿瘤活性。CCK8法检测结果显示，与对照组相比，不同剂量hPRDX5均能显著增强巨噬细胞活力(P<0.001);一氧化氮(nitric oxide, NO)检测试剂盒检测结果显示，hPRDX5显著增强RAW264.7细胞NO分泌水平(P<0.001);ELISA检测结果揭示，hPRDX5促进RAW264.7细胞TNF-α (P<0.01)和IL-6 (P<0.001)的分泌；流式细胞术结果揭示，hPRDX5能够升高RAW264.7细胞抗原分化簇(cluster of differentiation, CD) 80 (P<0.01)和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide sy...     

来源于Bacillus sp. AR9 D-海因酶半理性设计的研究

D-对羟基苯甘氨酸是一种重要的精细化工品，在制药行业具有广泛的应用前景。酶法是生产D-对羟基苯甘氨酸的主要手段，但由于缺乏高催化效率的酶而限制了D-对羟基苯甘氨酸的生产。为了提高来自Bacillus sp. AR9的D-海因酶（HYD）的催化效率，进而提高D-对羟基苯甘氨酸的产量，对HYD的底物结合通道进行分析，选取底物通道瓶颈处的氨基酸进行饱和突变和筛选，以提高HYD的催化效率。结果显示，突变体F159S、F159A和F65V的活性相较于野生型HYD分别提高了51%、40%和17%，通过对突变体F65V、F159S和双位点突变F65V/F159S的酶动力学研究发现，突变体的Km值基本与野生型HYD相似，而kcat是野生型HYD的1.3、1.9和2.0倍，最终双位点突变F65V/F159S的催化效率kcat/Km是野生型HYD的2.4倍。高催化效率突变体的获得，以及对突变体动力学的分析，对酶法制备D-对羟基苯甘氨酸具有重要的研究意义和应用价值。     

水稻OsGRF6的克隆及调控初生根发育功能的初步分析

OsGRF6隶属于GRF家族，参与调控植物的生长发育和调控植物对非生物胁迫的耐受性。为了研究OsGRF6调控水稻初生根发育的分子机制，该研究从水稻品种‘ZH11’中克隆得到转录因子基因OsGRF6，并对其进行了进化树构建，启动子分析，并对OsGRF6-OE和osgrf6进行了基因型分析和qRT-PCR鉴定及水稻表型观察，并通过酵母单杂交检测了OsGRF6的结合基序，进一步通过ChIP-seq和RNA-seq数据分析了OsGRF6下游的候选靶基因。结果显示：（1）OsGRF6含有一个QLQ和一个WRC保守的功能结构域，与拟南芥AtGRF1和AtGRF2以及水稻OsGRF7亲缘关系较近。OsGRF6启动子区域含有多个非生物胁迫和激素响应顺式作用元件。（2）OsGRF6在水稻种子、幼穗和根中表达量较高，而在叶中表达量较低。亚细胞定位显示，OsGRF6定位于细胞核，并且OsGRF6具有转录激活活性。（3）与野生型相比，过表达OsGRF6的转基因材料表现出初生根长度较长，而突变体材料则表现出初生根变短的表型。（4）OsGRF6能与CGGCA基序结合。（5）结合ChIP-seqs和RNA-seqs分析发现，OsGRF6靶基因中包含多个参与调控水稻根发育的基因，如OsARF7，OsARF4等。