红光、远红光、钙及IAA对绿豆下胚轴切段伸长的影响

红光明显抑制黄化绿豆下胚轴切段的伸长,远红光则有部分逆转红光的作用。黑暗条件下加钙对切段具有与红光处理相同的抑制伸长效果。IAA可完全逆转红光的作用。     

钙调素在IAA和6—BA诱导绿豆下胚轴原生质体膨大过程中的 …

含钙培养液和含激素培养液中的绿豆下胚轴原生质体在培养３０ｍｉｎ时分别检测到钙调素峰,在含钙培养液中加入ＩＡＡ和６－ＢＡ,ＣａＭ含量急剧降低,这与先前的试验结果即＾４５Ｃａ＾２＋积累增多和体积膨大正好对应。异搏定,ＬａＣｌ３,ＥＧＴＡ或Ｗ７可使激素＋ＣａＣｌ２处理的ＣａＭ含量不同程度地回升,甚至接近或超过对照的水平。     

钙调素在IAA和6-BA诱导绿豆下胚轴原生质体膨大过程中的含量变化

含钙培养液和含激素培养液中的绿豆下胚轴原生质体在培养30min时分别检测到钙调素（CaM）峰,在含钙培养液中加入IAA或6-8ACaM含量急剧降低,这与先前的试验结果即45Ca2 积累增多和体积膨大正好对应。异博定（verapamil）、LaCl3、EGTA或W7可使激素 CaCl2处理的CaM含量不同程度地回升,甚至接近或超过对照的水平。而A23187处理或K 、Zn2 等代替Ca2 则使CaM含量保持在与激素处理相似的低水平。这也与先前观察到的45Ca2 积累和体积的变化相对应。表明钙调素在IAA和6-8A诱导绿豆下胚轴原生质体膨大过程中的境与Ca2 共同起着调节作用。     

蓝光对绿豆下胚轴愈伤组织形成和生长过程中蛋白质代谢的影响

蓝光、白光和黑暗对绿豆下胚轴愈伤组织形成和生长过程中蛋白质代谢的影响不同。培养后３～１８ ｄ ,蓝光处理材料的可溶性蛋白质含量明显高于白光处理,更高于黑暗培养的材料。蓝光和白光明显促进３Ｈ亮氨酸掺入蛋白质,而蓝光和白光处理后游离氨基酸含量与黑暗对照相比,下降时间早,幅度大。在培养过程中,蛋白酶活性的变化与游离氨基酸相似。蛋白质合成抑制剂环己酰亚胺（ＣＨＭ） 抑制愈伤组织生长,其中以蓝光最大,白光次之,黑暗最小。在培养基中加入ＣＨＭ 愈早,抑制程度愈大。实验表明,ＣＨＭ 抑制愈伤组织蛋白质合成,也是以蓝光最甚。由此可见,蓝光促进绿豆下胚轴愈伤组织的形成、生长和蛋白质合成。     

酶的分子设计、改造与工程应用

酶工程的研究已经发展到分子水平 ,在体外通过基因工程、化学、物理等手段改造酶分子结构与功能 ,大幅提高了酶分子的进化效率和催化效率 ,生产有价值的非天然酶。对酶工程学若干“热点”和前沿课题的研究、应用进行了概述 ,分析了国际上酶工程研究及应用技术、手段、方法 ,包括体外分子进化、核酶和抗体酶的设计、酶分子的定向固定化技术、酶蛋白分子的化学修饰、融合酶、人工合成及模拟酶等技术 ,并展望了酶工程的技术进步和应用的新进展。     

非洲菊耐热变异离体筛选体系的研究

以非洲菊(Gerbera hybrida)6个品种为材料,通过未生根组培苗的耐高温实验,结合细胞膜相对电解质渗透率测定与增殖率统计,确定了45℃20h、35℃10~25d处理是各品种合适的热胁迫条件。高温处理后的组培苗细胞膜相对电解质渗透率与存活率之间存在良好的相关性,不同品种间的耐热能力有差异,同一品种在35℃与45℃下的耐热性表现不同。     

植物的光受体及其调控机制的研究

近年来,通过对植物的分子遗传学研究,在植物光受体及其在光形态建成中对植物生长发育的调控机制方面取得了显著进展。从光受体及基因家族的概况,包括光敏色素、隐花色素、向光素的基本结构、分子特征、基因和信号转导等,介绍了光受体在光控发育调节机制方面的研究进展情况。     

高粱CRY2基因的克隆及其表达分析

从高粱(Sorghum bicolor L．var．R111)幼苗中提取总RNA,利用RT-PCR和cDNA的3′末端的快速扩增方法(3′RACE),第一次克隆了高粱隐花色素2基因(CRY2)的cDNA序列。该序列包括了一个完整的开放阅读框,编码大小为690个氨基酸残基的蛋白质,与水稻、番茄和拟南芥CRY2蛋白质的同源性分别为87％、57％和45．5％。高粱CRY2基因组DNA含有3个内含子和4个外显子。RT-PCR检测结果表明,高粱CRY2基因在根、茎和叶中都有转录。Western blotting结果显示CRY2蛋白在根、茎和叶中表达,并在黑暗中积累,蓝光下降解。高粱CRY2可能在蓝光诱导的幼苗去黄化反应中起作用。     

茉莉酸甲酯和脱落酸对绿豆下胚轴质膜H+-ATPase水解活性的影响

茉莉酸甲酯(MeJA)促进绿豆下胚轴质膜H+-ATPase水解活性.活体条件下,50μmol·L-1 MeJA处理7 h的酶活性提高30%;离体条件下,10 μmol·L-1 MeJA处理2 h的酶活性最大,即提高30%.壳梭孢素(FC)和MeJA在离体条件下对H+-ATPase活性的促进效应相同,均提高30%左右,无协同效应;活体条件下,FC促进质膜H+-ATPase水解活性可达70%,而MeJA仅为30%.离体条件下,脱落酸(ABA)对H+-ATPase水解活性无明显促进;而活体条件下则有一定的抑制.     

胞外钙离子以及细胞膜组分参与蓝光诱导拟南芥叶片花色素苷的积累

以野生型和hy4突变体拟南芥为材料,运用药物学方法研究可能参与蓝光诱导叶片花色素苷积累和CHS基因表达的信号组分。培养基中外施Ca2 、钙离子通道剂A23187、螯合剂EGTA、钙通道阻断剂尼群地平(nifedipine,Nif)以及异博定(verapermil)的实验证实,蓝光诱导13d龄叶片花色素苷积累和CHS基因表达需要胞外Ca2 的参与,而蓝光作用是由cry1(cryptochrome1)介导的。此外,质膜黄素蛋白抑制剂DPI(diphenylene iodonium)抑制蓝光诱导的花色素苷积累,质膜H -ATPase激活剂壳梭胞素(fusicoccin,FC)抑制蓝光反应,而抑制剂钒酸钠则起促进作用。CaM拮抗剂W7、Ca2 -ATPase抑制剂EB(erythrosine B)、G蛋白激活剂霍乱霉素(cholera toxin,CTX)以及抑制剂百日咳毒素(pertussis toxin,PTX)对蓝光下野生型与hy4的花色素苷积累都有影响。对药物实验的分析表明,质膜氧化还原系统、H -ATPase可能参与依赖于外源Ca2 的蓝光反应。