CYP79F1基因对西兰花的遗传转化的研究

建立有效的遗传转化体系是基因工程手段改良植物性状的重要前提。本研究对西兰花遗传转化体系进行了初步研究,成功地建立了农杆菌介导的西兰花遗传转化体系。以7日龄无菌苗的下胚轴为外植体,预培养2~3 d后进行农杆菌的侵染,共培养后将外植体转移至无筛选压力的脱菌培养基中,暗培养7 d后置于含有10mg·L-1卡那霉素的筛选培养基中继续培养,待不定芽生长至2~3 cm时转入0.1 mg·L-1IBA的生根培养基中诱导不定根,最后进行驯化和移栽,PCR分子鉴定及外源基因表达水平检测结果证明,我们已经成功地将芥子油苷合成关键酶基因CYP79F1基因转入西兰花商业品种"青秀"中,利用HPLC检测转基因植株中短链脂肪族芥子油苷的含量显著增加。     

角蟾亚科3物种皮肤的组织学观察

应用石蜡切片和H.E染色技术,对角蟾亚科3个属的代表物种:短肢异角蟾(Xenophrys brachykolos)、宽头短腿蟾(Brachytarsophrys carinense)和小口拟角蟾(Ophryophryne microstoma)的皮肤进行了组织学观察及参数测量比较。分别取头背、体背和体腹3个部位的皮肤进行观察。结果表明,3物种的皮肤基本结构相似,均由表皮和真皮组成,真皮包括疏松层和致密层,疏松层中有大量腺体分布,包括黏液腺和颗粒腺2种。皮肤厚度、各组织层相对厚度以及腺体密度之间存在种间差异和部位差异。在宽头短腿蟾背部皮肤中,发现了与尖吻山角蟾(Megophrys nasuta)皮肤中一种片层状、H.E染色呈蓝色的皮肤真皮骨化结构(osteoderms)很相似的结构;短肢异角蟾皮肤中有明显的钙化层结构,小口拟角蟾皮肤钙化程度较弱。皮肤的骨化和钙化可能具有防止水分流失,抵御干燥的功能。2种内骨骼在角蟾亚科中同时存在,为探讨两栖动物皮肤内骨骼的进化提供了重要的研究基础。     

四川省喇叭河自然保护区的两栖爬行动物初步调查

喇叭河自然保护区共有两栖动物2月7科22种,区系组成以东洋界西南区为主;爬行动物1目7科17种,区系组成以东洋界广布种为主。两栖爬行动物是保护区内的重要资源。喇叭河自然保护区是保护横断山东缘物种多样性的关键地区之一。     

美国红栌的组织培养和快速繁殖

1植物名称美国红栌(Cotinus coggygria‘Royal purple'). 2材料类别嫩茎段、茎尖. 3培养条件(1)启动培养基:MS 6-BA 0.2 mg·L-1(单位下同) NAA 0.05 3%蔗糖;(2)增殖培养基:MS 6-BA 0.5 NAA 0.1 3%蔗糖;(3)壮苗培养基:MS NAA 0.1 3%蔗糖;(4)生根培养基:1/2MS IBA 1.0 NAA 0.1 PP3332.0 2%蔗糖.以上培养基均加0.7%琼脂,pH 5.8～6.0.培养温度为(25±2)℃,光照12 h·d-1,光照度为2 000lx.     

小鼠3T3-L1前脂肪细胞系的增强绿色荧光蛋白标记

细胞模型是研究细胞分化原理以及进行高通量筛选的有效工具。为了建立特异性标记的脂肪细胞分化模型,构建了包括脂肪细胞分化特异性表达基因PPARγ2的启动子在内的载体（pPPARγ2-promoter-EGFP）,用电穿孔方法转染小鼠3T3L1 前脂肪细胞,用显微荧光观察和RT-PCR确认PPARγ2基因的内源表达。结果显示,EGFP基因成功转入3T3-L1前脂肪细胞,观察到细胞分化过程中EGFP表达和脂肪积累,RTPCR分析表明EGFP代表了稳定而真实的PPARγ2基因的内源性表达。建立了由脂肪组织特异表达基因PPARγ2的表达控制的EGFP标记的小鼠3T3-L1前脂肪细胞系,目前国内外尚未见用同样方法对前脂肪细胞进行特异性标记。该细胞系将为脂肪细胞分化机理研究以及为抗肥胖症和抗糖尿病药物筛选提供有力工具。     

竹叶臭蛙的分类学研究Ⅰ.各地理居群的分类探讨(两栖纲:蛙科)

采用形态特征比较 ,对 7省 13个居群的竹叶臭蛙Odorranaversabilis的标本进行了研究 ,结果表明 :它们的形态特征差异明显 ,可以分为 3个形态型 ;同时经数值性状标准判别分析和DNA指纹分析印证其结果与形态学研究结果相吻合。据此将 3个形态型标本确定为 3个种 ,其中包括2新种。本文重新界定了 3个种的分布范围。     

中国臭蛙属两新种记述(无尾目：蛙科)

对云南臭蛙Odorrana andersonii各地居群的形态特征进行了深入研究,将原定名为云南臭蛙的9个地区标本分为3个形态型。这3个形态型被确定为3个不同的种,即云南臭蛙和2个新种：景东臭蛙O.jingdongensis sp.nov.和海南臭蛙O.hainanensis sp.nov.。海南臭蛙Odorrana hainanensis sp.nov.,正模CIB64Ⅲ3916,雄性成体59.5mm;采自海南白沙县鹦歌岭,海拔520;1964年8月25日。景东臭蛙Odorrana jingdongensis sp.nov.,正模CIB581505,雌性成体体长90.4mm;采自云南景东县新民乡,海拔1480m,1958年5月29日。模式标本保存在中国科学院成者生物研究所。     

云南臭蛙的分类学研究 (无尾目：蛙科)

作者采用形态特征比较、标准判别分析方法和DNA批纹技术对云南臭蛙Odorrana andersonii9个居群进行了综合研究,结果表明：9个居群可以分为以云南龙陵、景东、海南标本为代表的3个形态型,它们的形态特征差异明显;3者的标准判别分析和DNA指纹图谱结果均有明显不同,印证了形态性状研究结果。据此上述3个形态型标本被确定为3个种,其中包括2新种,本文对原隶属于云南臭蛙的各地标本的分类地位作了讨论。     

马传染性贫血病病毒结构模型的建立

通过电子显微镜多种技术的观察和研究,明确了马传染性贫血病病毒的典型形态结构,即呈球形,表面附有顶端带钮状物的纤突,病毒膜为三层(单位膜),病毒基质充填于病毒膜和核芯亮之间,核芯壳呈园锥形,核芯为螺旋结构。在此基础上建立了马传染性贫血病病毒的结构模型。这是国内外首次报道,为深入研究该病毒和其有关病毒的特性奠定了基础,并为该病毒的分类提供了形态学依据。     

海参i-型溶菌酶在毕赤酵母基因工程菌中优化表达及纯化

将实验室已构建的毕赤酵母基因工程茵(pPIC9K-SjLys/GS115)作为海参i-型溶茵酶生产菌株,本研究分别从甲醇浓度、培养基pH、温度和诱导时间对其产酶发酵条件进行优化.实验得出甲醇诱导浓度为1.0％,发酵培养基初始pH 6.0,温度30℃,培养96 h为最佳目的蛋白表达条件,其发酵液中海参i-型溶菌酶含量达10.63 mg/L.将发酵液经离心和超滤浓缩后得到上清液,再经离子交换和凝胶过滤层析纯化获得海参i-型溶菌酶产品,其酶活力达826.44 U/mg.经测定该酶对革兰氏阳性菌溶壁微球菌和革兰氏阴性菌副溶血弧菌均具有明显的抑菌作用.