利用大肠埃希菌生产N-糖基化重组蛋白研究进展

利用大肠埃希菌生产N-糖基化重组蛋白已经成为糖工程研究热点之一。由于真核生物系统生产N-糖基化蛋白普遍存在培养周期长、过程复杂及所需成本高的问题,因此遗传背景清晰、培养周期短、所需成本低的大肠埃希菌作为生产蛋白质药物的工具越来越受到关注,在生产治疗性N-糖基化蛋白方面具有很大的潜力。本文介绍了大肠埃希菌生产N-糖基化重组蛋白的机制,综述了利用大肠埃希菌生产N-糖基化重组蛋白及糖疫苗的研究进展,对值得进一步深入研究的问题进行总结和展望,以期为后续构建稳定高效的大肠埃希菌生产N-糖基化重组蛋白系统提供参考。     

CRISPR/Cas9技术在非模式植物中的应用进展

基因组编辑技术的出现对植物遗传育种及作物性状的改良产生了深远意义。CRISPR/Cas(clustered regularly interspaced short palindromic repeat)是由成簇规律间隔短回文重复序列及其关联蛋白组成的免疫系统,其作用是原核生物(40%细菌和90%古细菌)用来抵抗外源遗传物质(噬菌体和病毒)的入侵。该技术实现了对基因组中多个靶基因同时进行编辑,与前两代基因编辑技术:锌指核酶(ZFNs)和转录激活因子样效应物核酶(TALENs)相比更加简单、廉价、高效。目前CRISPR/Cas9基因编辑技术已在拟南芥(Arabidopsis thaliana)、烟草(Nicotiana benthamiana)、水稻(Oryza sativa)、小麦(Triticum aestivum)、玉米(Zea mays)、番茄(tomato)等模式植物和多数大作物中实现了定点基因组编辑,其应用范围不断地向各类植物扩展。但与模式植物和一些大作物相比,CRISPR/Cas9基因编辑技术在非模式植物,尤其在一些小作物的应用中存在如载体构建、靶点设计、脱靶检测、同源重组等问题有待进一步完善。该文对CRISPR/Cas9技术在非模式植物与小作物研究的最新研究进展进行了总结,讨论了该技术目前在非模式植物、小作物应用的局限性,在此基础上提出了相关改进策略,并对CRISPR/Cas9系统在非模式植物中的研究前景进行了展望。     

低温处理对异育银鲫腹部脂肪组织能量代谢相关基因表达的影响

本文以异育银鲫为研究对象,将其在4 ℃水温条件下暂养12 h,研究其脂肪组织在低温环境下的基因表达变化。HE染色切片和透射电镜拍照结果显示,并未观察到由低温处理导致的组织学显著变化,如明显的线粒体结构增多现象。利用Western blot分析手段,检测了常温和低温处理异育银鲫腹部脂肪组织中的线粒体蛋白分子COX IV的表达水平,发现经过低温处理,异育银鲫脂肪组织中的线粒体蛋白COXIV略有增加。荧光定量PCR的结果显示,在低温环境下,异育银鲫腹部脂肪组织中的Cell Death Inducing DFFA Like Effector A（cidea）, Peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator-1 alpha（pgc1）, Peroxisome Proliferator Activated Receptor Gamma（pparg）, Peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1-beta（ppargca1）, uncoupling protein 1（ucp1）, uncoupling protein 2（ucp2）和uncoupling protein 3（ucp3）等基因的转录表达均出现了显著上调。这是首次证实鱼类腹部脂肪组织中的UCP分子均可以被低温诱导上调表达。     

甲状腺功能亢进性心脏病患者血清BNP及CRP水平及其与心功能的关系

目的:研究甲亢性心脏病患者血清BNP(B-type natriuretic peptide)与CRP(C-reaction protein)水平及其与心功能的关系。方法:选择2015年10月至2017年3月在我院进行治疗的甲亢性心脏病患者68例作为观察组,同期选择在我院进行常规体检的健康者35例作为对照组。采用免疫放射法检测血清BNP水平,免疫比浊法检测血清CRP水平。比较两组血清BNP、CRP水平的差异及不同心功能甲亢性心脏病患者血清BNP、CRP水平,分析血清BNP、CRP水平与甲亢性心脏病患者心功能的相关性。结果:观察组血清BNP、CRP水平明显高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);观察组心功能Ⅱ级患者血清BNP、CRP水平明显高于心功能Ⅰ级患者(P0.05);心功能Ⅲ级患者血清BNP、CRP水平明显高于心功能Ⅱ级患者(P0.05);心功能Ⅳ级患者血清BNP、CRP水平明显高于心功能Ⅲ级患者(P0.05);观察组治疗后血清BNP、CRP水平较治疗前显著降低,差异具有统计学意义(P0.05)。甲状性功能亢进性心脏病患者血清BNP、CRP水平均与其心功能等级呈显著正相关(r=0.742,P=0.037;r=0.857,P=0.011)。结论:甲亢性心脏病患者血清BNP与CRP水平均显著升高,可能用于甲亢并发甲亢性心脏病的早期诊断及心功能评估的重要参考指标。