花发育调控基因的研究进展

花发育调控基因的研究进展聂亭,马诚（中国科学院发育生物学研究所．北京１０００８０）白书农白书农所在单位为中国科学院植物研究所花的发育是植物生长过程的一个重要阶段。九十年代初,随着植物分子生物学研究方法的逐步发展和模式植物的建立,在花发育调控基因方面的研究已经取得了一些结果,它们主要集中在拟南芥菜,金鱼草及单子叶的玉米等材料。本文特对这些工作做如下简扼的介绍。     

用基因工程技术组建α淀粉酶高产菌株

α-淀粉酶是枯草芽孢杆菌主要胞外酶之一。酶的产量受多种调节基因如amyR,tmrA,pap9及其它基因的控制。通过DNA转化,使这些调节基因的几个基因引入到一个细胞中,由于这些调节基因被引入到同一个细胞中能起到协同作用,所以引起α-淀粉酶高产。     

癌基因发展的进展对多步骤致癌作用中若干观点的冲击(纲要)

肿瘤的发病机制研究是最为艰巨的课题,经二百多年的探讨,还未能彻底解决。 一般认为肿瘤的形成有两方面的因素,一是机体内细胞自身的变化,而发生恶性变,二是外界环境中的某些因素对机体细胞的刺激或侵害,引起了癌变。这两方面的因素是有一定联系的,内因要和外因起相互作用的。     

马纳维诺与西夫韦肽体外联合抗人类免疫缺陷病毒感染的效果评价

本文旨在探讨人类免疫缺陷病毒1型（HIV‐1）CC趋化因子受体5（CCR5）辅助受体拮抗剂马纳维诺（MRV）与膜融合抑制剂西夫韦肽（SFT）在抗 HIV感染中的协同作用。利用 TZM‐bl细胞系检测SFT和MRV单用或联用对3种CCR5噬性（SVPB16、SVPC12和CRF01＿AE）HIV假病毒的半数有效浓度（EC50）。采用CalcuSyn软件对2种药物的协同性进行预测,联合指数（CI ）＜1为有协同作用,CI＝1为有相加效应,CI＞1为有拮抗作用。同时,应用噻唑蓝（MTT）法对MRV和SFT的细胞毒性进行评价。结果显示,2种药物单用时对 SVPB16、SVPC12和 CRF01＿AE的 EC50：SFT为0．91、0．17、0．71 nmol／L ,MRV为4．84、0．47、0．45 nmol／L。针对这3种假病毒,联用比单用EC50均有所降低,SFT （0．45、0．09、0．15 nmol／L ）降低1～4倍,MRV（1．52、0．12、0．11 nmol／L）降低2～3倍。2种药物联用对3种假病毒抑制率达90％时的CI值分别为0．28、0．59和0．36。等效线法显示两者之间存在良好的协同作用。综上所述,联用MRV与SFT在不产生细胞毒性的情况下具有良好的协同抗HIV效果。     

丙酮酸和乙酰-CoA协同促进L-亮氨酸的合成

【目的】通过理性改造柠檬酸合酶(citrate synthase,CS)、丙酮酸脱氢酶系E1p (pyruvate dehydrogenase complex,PDHC,编码基因aceE)和ATP-柠檬酸裂解酶(ATP-Citrate lyase,ACL),有效供应胞内丙酮酸和乙酰-CoA,以提高L-亮氨酸产量。【方法】以谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)为底盘细胞,分析不同CS和PDHC酶活水平对L-亮氨酸合成的影响。随后,考查协同改造CS和PDHC或引入绿硫菌(Chlorobium tepidum)中ACL对L-亮氨酸合成的影响。【结果】低强度的CS酶活(即重组菌XL-3 P_(dapA-R2)gltA)有利于L-亮氨酸的合成,L-亮氨酸产量达到17.5±0.6 g/L。而改变PDHC酶活水平不利于L-亮氨酸的合成。此外,以启动子P_(dapA-R2)控制CS表达,而以启动子P_(gapA)控制PDHC表达时(即重组菌XL-4),可实现胞内丙酮酸和乙酰-CoA的有效供给,L-亮氨酸产量达到20.2±1.7 g/L,且显著降低副产物产量。若在重组菌XL-4中引入C.tepidum,ACL会显著抑制菌体生长而不利于L-亮氨酸合成,而引入到出发菌XL-3中因胞内丙酮酸和乙酰-CoA得到有效供给,目标重组菌XL-5L-亮氨酸产量达到18.5±1.2 g/L,比出发菌株XL-3增加了14.2%。【结论】重组菌XL-4中因协同控制CS和PDHC酶活,从而实现胞内丙酮酸和乙酰-CoA有效供给,促进L-亮氨酸的合成。该研究结果对后续利用代谢工程技术强化微生物合成L-亮氨酸等支链氨基酸具有重要的参考价值。     

焦性没食子酸联合唑类药物对念珠菌的抑菌作用

目的了解光滑念珠菌临床菌株的药敏情况以及中药单体焦性没食子酸联合唑类药物对念珠菌的抑菌作用。方法收集临床分离的光滑念珠菌116株、白念珠菌49株、热带念珠菌42株、克柔念珠菌4株和近平滑念珠菌13株,采用ATB FUNGUS3药敏试条检测光滑念珠菌的药敏情况;同时采用棋盘肉汤稀释法检测焦性没食子酸联合唑类药物对念珠菌的抑菌情况。结果116株光滑念珠菌中,14.66%(17株)的菌株对氟康唑耐药,22.41%(26株)对伊曲康唑表现为非野生型和81.03%(94株)对伏立康唑表现为非野生型。焦性没食子酸对5种念珠菌的抑菌情况,46.55%光滑念珠菌的MIC值为64μg/mL;34.69%白念珠菌的MIC值为64μg/mL;59.52%热带念珠菌的MIC值为64μg/mL;25%克柔念珠菌的MIC值为128μg/mL;46.15%近平滑念珠菌的MIC值为128μg/mL。唑类药物与焦性没食子酸联合用药时,100%、99.14%、99.14%的光滑念珠菌分别对氟康唑、伊曲康唑和伏立康唑表现为协同作用或相加作用,差异无统计学意义(P>0.05);而白念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌和近平滑念珠菌均表现为无关作用和拮抗作用。与单独用药相比,联合用药时81.03%、68.1%、77.59%的光滑念珠菌分别对氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑的MIC值降低2~3个浓度梯度,且耐药组与非耐药组之间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论光滑念珠菌对唑类药物具有耐药性,伏立康唑非野生型菌株所占比例最高。焦性没食子酸单独用药时,5组念珠菌中对光滑念珠菌的抑菌效果最好,且敏感组比耐药组的抑菌效果更加显著。焦性没食子酸联合唑类药物显著降低了光滑念珠菌唑类药物的MIC值,且耐药组比非耐药组的效果更加显著,为中西医结合治疗临床光滑念珠菌感染提供实验依据。     

光合细菌与产气肠杆菌协同产氢特性分析

对光合细菌(Rhodopseudomonas sp. DT)与产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)进行了发酵产氢试验, 考察了不同起始接种比例、培养温度及碳源条件下混合菌协同产氢特性。结果表明: 光合细菌与产气肠杆菌初始接种比例对协同产氢影响较大, 初始接种比例为1:1最有利于协同产氢, 产氢效率和产氢周期达到了3.1 mol H2/mol葡萄糖及81 h。进一步培养液pH动力学变化研究发现初始接种比例为1:1的混合菌培养液pH变化较小, 为pH 6~7, 利于混合菌协同产氢。28°     

咖啡因对大鼠杏仁核点燃模型的作用研究

目的:观察兴奋药咖啡因对点燃癫痫模型的作用.方法:建立大鼠杏仁核点燃模型,观察不同剂量的咖啡因及与抗癫痫药物联用对杏仁核点燃大鼠的后放电时程(ADD)和Racine's分级的影响.结果:咖啡因提高点燃大鼠的ADD,但联用抗苯妥英钠和苯巴比妥可降低ADD(P＜0.01)及Racine's分级(P＜0.01).结论:小剂量的咖啡因与抗癫痫药物能产生协同作用.     

阿魏酸酯酶基因工程菌研究进展

阿魏酸酯酶能水解阿魏酸、多聚阿魏酸与木聚糖以及木质素之间形成的酯键,有利于植物细胞壁的降解。介绍阿魏酸酯酶的微生物来源、阿魏酸酯酶基因工程菌构建和阿魏酸酯酶与其他酶相互协同作用等的研究进展。     

国内简讯

徐虹教授主持的"生物防腐剂ε-聚赖氨酸制备关键技术及其应用研究"项目通过鉴定和验收2012年2月18日,江苏省教育厅在南京工业大学对徐虹教授主持完成的省农业支撑项目"生物防腐剂ε-聚赖氨酸制备关键技术及其应用研究"进行了鉴定和验收。项目组自主选育获得1株ε-聚赖氨酸高产菌