六种致病性白蛉病毒原核表达核蛋白抗原性初步研究

初步研究六种致病性白蛉病毒原核表达核蛋白(Nucleocapsid protein,NP)抗原的抗原性,为开发相应的血清学诊断试剂提供理论依据。利用原核表达系统表达纯化六种致病性白蛉病毒核蛋白,并分别免疫新西兰白兔。通过间接ELISA方法及Western-blotting方法对所获得的兔免疫血清进行交叉反应检测,确定其抗体ELISA滴度。此外,分别用上述六种致病性白蛉病毒NP抗原包被ELISA反应板并对发热伴血小板减少综合征病毒(Severe fever with thrombocytopenia syndrome virus,SFTSV)病人血清进行间接ELISA检测,确定其血清学交叉反应及IgG抗体滴度。通过原核表达系统表达并纯化的六种白蛉病毒NP抗原浓度及纯度均达到免疫和检测要求。ELISA及Western-blotting检测结果显示六种病毒NP抗原兔免疫血清中的每种血清与其余五种病毒NP抗原可能存在血清学交叉反应。SFTSV病人血清与除SFTSV-NP以外的五种NP抗原亦可能存在部分交叉反应。本研究初步评价了原核表达的六种致病性白蛉病毒核蛋白的抗原性和免疫反应性,为相应诊断试剂的研制奠定了基础。     

扇叶铁线蕨叶片对岩溶环境的生态适应

地理环境的不同造就了植物不同的适生机制。本研究对岩溶区和非岩溶区的扇叶铁线蕨(Adiantum flabellulatum)的叶片进行了比较, 结果表明, 二者在显微结构和亚显微结构方面都存在明显区别。在显微结构方面: 岩溶区生长的扇叶铁线蕨的叶片具有旱生植物叶片特点, 即叶片为等面叶, 叶肉细胞排列较 为紧密以及叶片维管组织发达等; 而非岩溶区生长的扇叶铁线蕨的叶片为异面叶, 特点为叶肉细胞排列相对疏松, 维管组织不发达。扫描电镜分析显示: 非岩溶区扇叶铁线蕨叶片表面具有很多明显的凹槽状结构, 而岩溶区扇叶铁线蕨的叶片与之有明显不同, 其叶片表面特别是叶脉位置具有明显的刺状结构, 超 薄切片发现这些刺状膨大部分细胞内存在液泡结构, 并且这些刺状结构在叶片抽真空的过程中变瘪, 说明这些刺状结构可能具有储存水分的功能。岩溶区扇叶铁线蕨特有的显微和亚显微结构保证了该种植物在岩溶干旱环境中可以正常生长。     

结直肠癌细胞CES2表达对CPT-11化疗敏感性的影响

目的:研究异常甲基化在调控结直肠癌细胞中CES2基因表达中的作用,并观察结直肠癌细胞内CES2表达与化疗敏感性的关系.方法:采用MSP检测八种结直肠癌细胞系中CES2基因启动子甲基化;荧光定量PCR和westemblot方法检测DAC去甲基化后CES2 mRNA及蛋白表达变化;采用MTT法,检测各型结肠癌细胞株对伊利替康的细胞毒性.计算IC50并分析其与CES2mRNA表达的相关性.结果:CES2基因启动子在八种结直肠细胞株中均呈未甲基化状态,使用DAC处理后,CES2在其低表达的细胞株无明显增加,不同结直肠癌细胞株对CPT-11敏感性存在差异(P<0.05),其中LoVo细胞对CPT-11敏感性最低.RKO细胞对CPT-11的敏感性最高.结直肠细胞株内CES2表达与It50呈负相关性(r=0.58651,P<0.01).结论:甲基化不参与调控CES2基因的表达,CES2表达与CPT-11细胞毒性呈正相关.