静水椎螺乙酰胆碱结合蛋白在Bac-to-Bac系统中的表达、纯化与结晶

表达、纯化静水椎螺(Lymnaea stagnalis)乙酰胆碱结合蛋白(Ls-AChBP)并得到晶体。将静水椎螺乙酰胆碱结合蛋白cDNA序列克隆到表达载体pFastBac1上,构建了重组表达质粒pFastBac1-Ls-AChBP-His,经重组子筛选,得到重组杆状病毒质粒Bacmid,采用CellfectinⅡ脂质体,把带有外源基因的杆状病毒质粒Bacmid转染到昆虫细胞中,经镍柱和凝胶色谱柱对重组蛋白进行纯化得到五聚体,并用机器人进行结晶筛选获得其蛋白晶体。重组蛋白Ls-AChBP在Bac-to-Bac表达系统中得到高效表达并被纯化,结晶筛选得到晶体。     

构建更好的结核疫苗

机体对结核的免疫反应通常被认为是“双刃剑”，因为它既保护宿主抵抗疾病，同时造成的组织损伤又有助于病菌的有效播散。双刃剑的概念在作为理性设计改良疫苗和免疫诊断试剂这个概念平台上，令人满意的程度远比其在文学上的浪漫要逊色得多。因此需要我们对结核的毒力和免疫保护力的关系做更准确的理解。Pym等开始在这方面填补空白。