菊花转抗虫基因植株的PCR快速鉴定

华中农业大学园艺与林学学院蒋细旺和包满球教授用PCR法快速鉴定了菊花转抗虫基因植株。他们对经过卡那霉素抗性筛选所得的菊花转苏云金芽孢杆菌蛋白Bt基因和转雪花莲外源凝集素GNA基因所得的抗性植株,利用改良SDS法提取菊花DNA,然后利用NPTII引物对6个菊花品种的抗性植株所得出的DNA进行PCR扩增,发现了符合NPTII基因片段大小的亮带,初步证实获得了转Bt基因和转GNA基因的菊花植株。     

伪狂犬病基因缺失疫苗研制成功

我国是世界上养猪大国之一,年总存栏8亿多头,其中出栏数近1/2.但由于伪狂犬病的世界性流行,给我国养猪生产造成很大的经济损失.据近年来华中农业大学科研人员在全国26个大型猪场取血清样品调查分析,发现生猪感染此病比较普遍,阳性率为39.2%(207/528),全国受感染猪场为84.62%(22/26).     

猪乙型脑炎的快速诊断方法的建立与应用

西北农林科技大学动物科技学院唐青海，安立国与湖北省农科院牧医研究所乔宪凤，周荆荣等根据乙脑病毒基因组3’末端保守压设计了一对特异性引物，建立了乙脑病毒不同株的RT-PCR诊断技术。     

香蕉果实expansin cDNA克隆及序列分析

华南农业大学广东省果蔬保鲜重点实验室陆旺金博士对香蕉果实expansin cDNA做了研究,他提取成熟香蕉果肉的RNA并分离mRNA,以mRNA反转录合成cDNA,以该cDNA为模板,设计expansin的简并引物,进行RT-PCR圹增,利用退火温度为50℃得到扩增产物纯化后与pGEM-T-Ea-Sy载体连接转化大肠杆菌,任意桃选2个阳性克隆,进行序列分析,结果得到2个序列相同的expansin的cDNA基因片段,命名为MA-EXP3,以示与登录的香蕉MA—EXP1和MA—EXP2相区别。MA—EXP3中存在expansin基因的保守区域即8个半胱氨酸残基和3个色氨酸残基,它编码为177个氨基酸与MA—EXP1的核苷酸同源性为74．2％,与氨基酸的同源性为86．4％。     

石岐杂鸡r-干扰素基因的克隆与序列分析研究

华南农业大学动物科学学院吕英姿、毕英佐和曹永长三位先生对广东石歧杂鸡r-干扰素基因的克隆与序列作了分析,他们根据现有鸡r-干扰素基因序列设计引物,应用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术,从ConA诱导培养的鸡脾淋巴细胞中扩增得到石歧杂鸡r-干扰素（SqzChIFN-r）基因,将其克隆到PGEM-T载体中,进行序列测定,结果表明,经克隆得到的那种ChIFN—r基因的开放阅读框由492个核苷酸组成,它与其他ChIFN—r基因的同源性达到99％,与火鸡r-干扰素基因的同源性为96％,与鸭r-干扰素基因的同源性为81％。由此,他们推导石歧杂鸡IFN-氨基酸序列与其他已知的ChIFN—r氨基酸序列完全相近或一致,同时与火鸡和鸭IFN—r氨基酸同源性分别为97％和67％。此说明石岐杂鸡r-干扰素基因的同源性与鸡类的较近,与其他不同种类的则较远。     

基因干预治疗的新星-RNAi

第四军医大学王立峰、李莹、刘新平、药立波科研工作者快速发展了RNAi（RNA in terference）技术,为选择性抑制特异性基因的表达提供了有利的工具。RNAi是外源的ds RNA（double strand RNA,〉19bp）进入细胞后,激活细胞内的自然存在的加工活性,引起对侵入的外源dsRNA及具有同源序列的单链RNA降解（包括内源性的mRNA）的现象。RNAi技术目的多作为基因功能研究的有利工具,随着RNAi分子机制研究的不断深入,它将成为最有潜力的基因干预治疗方法。     

肌肉活体基因电冲转载IL-12基因于犬只的表达状况

台湾大学农学院畜产学系科研人员已成功建立利用肌肉活体基因电冲转载人类重组IL-12质体进入犬体的条件,载入的IL-12基因并能在犬体内进行功能性表达,结果显示肌肉约在进行电冲后第10天IL-12的表达量达到高峰(550pg／m1),在第15天后逐渐下降,血液中则约在第8天达到最高(257pg／m1)。     

山羊黄体细胞株细胞的凋亡

台湾大学农学院畜产学系(所)的研究人员对温度敏感的SV4 0山羊黄体细胞株(GLC D) ,在34℃时,可持续分裂,而不具类固醇生成能力,当温度升高至4 0℃时,细胞不再分裂生长,且具有合成孕酮(Proges terone)的能力,然而细胞随培养时间的增加,在洋菜胶电泳中呈现低分子量之DNA片段,显示     

GHcDNA克隆在大肠杆菌中表达将有望应用于水生鱼类动物

猪生长激素 (ＧＨ)为单一的多肽 ,无亚基 ,不要糖基化修饰 ,只含 2个硫键 ,有重复的特性 ,并能在大肠杆菌体内进行表达 ,其表达量为 2 0 .5 %。但在构建鲑鱼ＧＨ、鲤鱼ＧＨ的表达载体分别为 ｐＢＶｓＧＨＩ8和ｐＢ ＶｃＧＨ8时 ,其表达量分别是 10 %和 2 9.2 %。当猪ＧＨ基因同用大肠杆菌、鲑、鲤进行表达 ,其表达载体均为ｐＢＶ2 0 0时 ,各个表达量仍有很大差异。这主要是外源基因在同一表达载体中所表达的水平不同有关 ,亦即外源基因 5′端ＡＵＧ附近的ＲＮＡ二级能量的大小、ＡＵＧ与ＳＤ序列之间的距离大小 ,外源基因 3′测翼稳定性的强…     

五种基因克隆技术

经华中农业大学周国岭先生对国内外 6 4篇有关基因克隆技术的论文概括和分析 ,当前基因克隆技术主要有 5个类别 ,即体位克隆或状态克隆、转位或转ＤＮＡ标记法、同系位候选基因法、快捷顺序标记法、差接式快捷基因克隆法等。1　体位克隆或状态克隆首先将目的基因精确定位于分子标记连锁图上 ,用连锁标记筛选大片段ＹＡＣ ,ＢＡＣ ,ＴＡＣ ,ＰＡＣ或Ｃｏｓ ｍｉｄ等文库 ,构建含目的基因区的精细物理图谱 ,采用染色体操作法逐步接近目的基因 ,如拟南芥的ＷＩＧ ＧＵＭ基因克隆 ,人的ＮＰＣ1基因克隆。若侧翼标记与目的基因连锁非常紧密 ,就可…