沉默DEPDC1基因表达对鼻咽癌细胞系HNE-1生长和细胞周期的影响

为探讨沉默DEPDC,基因表达对鼻咽癌细胞系HNE．1生长和细胞周期的影响,该实验设计合成靶向DEPDCl的小分子干扰RNA（smallinterferingRNA,siRNA）转染人鼻咽癌HNE-1细胞。转染后,采用荧光定量PCR、免疫印迹、MTT及流式细胞术方法检测细胞内DEPDCl的表达量以及细胞周期、生长增殖、凋亡的变化及其可能机制。结果显示,转染DEPDClsiRNA后,DEPDC1基因在mRNA及蛋白水平的表达量明显降低;大量细胞被阻滞于G2／M期,生长增殖减慢,凋亡增加。荧光定量PCR结果表明,抑制NF—KB激活的A20基因表达量明显上调,受NF-κB调控的肿瘤相关靶基因的表达量下降,包括C-MYC、MMP9、ICAM-1、BCL-2基因。由此说日月,沉默DEPDC1基因可以影响HNE-1细胞的周期,抑制其生长增殖,促进凋亡,其机制可能与抑制NF-κB通路有关。     

鄂西南地区种子植物多样性与区系特征

根据《恩施植物志》内容,结合近年来野外实地调查记录,统计鄂西南地区种子植物信息,并对其物种多样性、科属组成及区系地理特征进行了分析。结果表明:(1)鄂西南地区种子植物共3 053种,占湖北省74.79%,全国的11.20%,隶属于164科1 008属,其中裸子植物9科28属45种,被子植物155科980属3 008种,且草本植物达1 576种;研究区内植物生活型多样化,多年生和落叶物种占优势,珍稀濒危物种多,生物多样性高。(2)鄂西南地区物种较多的科为蔷薇科(210种)、菊科(198种)、百合科(131种)、禾本科(126种)和豆科(111种),表征科中桦木科的重要值最大(22.00);大科、大属的优势性明显,少种科和少种属较多,体现出科属水平上的多样性。(3)研究区内种子植物科的区系划分为11个分布区类型,14个亚型,其中热带成分77科(65.25%),温带成分38科(32.20%),中国特有2科(1.69%),以热带成分为主;属级水平上共15个分布区类型、23个亚型,热带成分388属(41.06%),温带成分485属(51.32%),中国特有57属(6.03%);种级水平上划分为15个分布区类型,温带成分1 572种(59.70%)、热带成分934种(35.47%),中国特有分布型110种(4.18%),属、种水平上温带成分更占优势。研究认为,鄂西南地区种子植物区系具有温带和热带双重性质和过渡性特征,区系起源有一定的古老性,地理成分复杂。     

木林子保护区优势种翅柃种群结构与空间分布格局

该研究以湖北木林子保护区优势种翅柃(Eurya alata)为研究对象,编制静态生命表,绘制存活曲线、死亡率和消失率曲线;采用成对相关函数分析各龄级的空间分布特征,双变量成对相关函数分析不同生活史阶段间的空间关系,为阐明木林子保护区常绿落叶阔叶混交林不同构建规律在物种多样性维持机制中的作用提供理论参考。结果显示:(1)翅柃属增长型种群,存活曲线趋于Deevey-Ⅱ型,死亡率和消失率曲线呈单峰型。(2)翅柃Ⅰ～Ⅴ龄级呈现聚集分布且随径级增加而减弱,Ⅵ、Ⅶ龄级在较大尺度上随机分布。(3)在完全随机零模型下,各生活史阶段均呈空间正关联;在先决条件零模型下,成年树与幼树、小树小尺度上呈无关联和负关联,其余生活史阶段间呈正关联,较大尺度上无关联。研究表明,翅柃种群幼树个体丰富,更新状态良好,在自然演替过程中,生境过滤、扩散限制和密度制约均可能驱动种群的构建过程。     

右美托咪啶联合布托啡诺对老年腹腔镜胃肠肿瘤根治术术后认知功能障碍的影响

目的:探究右美托咪啶联合布托啡诺对老年腹腔镜胃肠肿瘤根治术术后认知功能障碍的影响。方法:选取2015年8月～2018年9月在我院行腹腔镜胃肠肿瘤根治术的老年患者80例进行回顾性分析,根据术前用药情况不同分为两组,观察组术前给予右美托咪啶联合布托啡诺,对照组术前给予等量生理盐水。比较两组患者的Ramsay镇静评分、术前和术后不同时间点认知功能评分、血清S-100β蛋白(S-100βprotein,S-100β)、神经元特异性烯醇酶(Neuron-specific enolase,NSE)和白介素-6(Interleukin-6,IL-6)水平的变化及不良反应的发生情况。结果:观察组患者拔管时、拔管后4 h、拔管后8 h和拔管后12 h的Ramsay镇静评分显著优于对照组(P0.05)。两组患者手术前1d(T0)时简易智能精神状态检查量表(mini-mental state examination,MMSE)各项评分及总分相比均无统计学差异(P0.05),观察组手术后1d(T1)和手术后2d(T2)时MMSE各项评分及总分均显著高于对照组(P0.05)。观察组患者T1时血清S-100β和IL-6水平显著低于对照组,T1和T2时血清NSE水平均显著低于对照组(P0.05)。两组患者恶心、呕吐、嗜睡和头晕的发生率相比均无统计学差异(P0.05)。结论:老年腹腔镜胃肠肿瘤根治术术前应用右美托咪啶联合布托啡诺可显著改善患者的术后认知功能,提高麻醉效果,且不增加并发症的发生率。     

TP-PCR法构建抗人CD28嵌合抗体双启动子昆虫杆状病毒重组转移载体

为构建能同时表达抗人CD28嵌合重链和嵌合轻链基因的双启动子杆状病毒转移载体,利用PCR法扩增出抗人CD28鼠源性单抗的可变区基因和人IgG1的恒定区基因,再采用一种不需要限制性核酸内切酶和连接酶的新方法——三引物PCR（TP-PCR）法将两者拼接后分别插入杆状病毒转移载体pAcUW3的ph和p10启动子后,并通过酶切、电泳、PCR扩增和测序对重组体进行了鉴定。研究结果表明,TP-PCR法快速、方便、准确,无需设计外源的DNA序列,就能构建完好的融合表达基因。该转移载体的构建成功为嵌合抗体基因在昆虫细胞中的表达奠定了基础。     

表达蝎毒素的重组斜纹夜蛾核型多角体病毒(SpltMNPV)的构建及毒力

【目的】开发高毒力的重组斜纹夜蛾核型多角体病毒(Spodoptera litura multicapsid nucleopolyhedroviruse,SpltMNPV)杀虫剂。【方法】构建编码蜕皮激素UDP-葡萄糖基转移酶(ecdysterioid UDP-glucosyl transferase gene,egt)基因缺失并插入东亚钳蝎神经毒素(B.martensi Karsch,BmK ITa1)基因的重组转移载体,重组转移载体与SpltMNPVⅡ基因组DNA共转染斜纹夜蛾细胞,通过荧光斑法与有限稀释法相结合筛选重组病毒。【结果】成功筛选出缺失egt基因的、早期启动子(ie-1)启动的、表达BmK ITa1成熟肽的重组病毒SpltMNPV-Δegt-Pph-egfp-ie-1-BmK ITa1。生物测定结果显示,重组病毒的杀虫速度(LT50)较野生病毒提前0.7-0.8 d。【结论】通过在SpltMNPV病毒基因组中插入外源毒素基因可明显增强病毒的杀虫效果,结果说明开发高毒力SpltMNPV生物杀虫剂具有可行性。     

蜕皮激素对家蚕后部丝腺谷氨酸-丙酮酸转氨酶活力的影响

本文报道了β-蜕皮激素(简称MH)对家蚕后丝腺谷氨酸-丙酮酸转氨酶(简称GPT)活力以及产丝量的影响。对五龄不同时期一次添食MH和每日连续添食MH以及MH剂量变化的研究结果表明:无论何种处理,MH都能促进GPT的活力;但不同的处理,其效果不一样。其中以五龄前期添食MH和五龄每日低剂量(夏蚕每头0.5微克和春蚕每头2微克)连续添食的处理,效果最佳;不但能促进GPT的活力,而且能提高丝蛋白合成能力。此外,还发现添食MH的浓度与GPT活力并不相关;MH对GPT活力的影响,因蚕品种而有差异,春蚕多丝量品种较夏蚕少丝量品种效果显著;MH低剂量多次添食比高剂量一次添食可避免产生不良后果。     

斜纹夜蛾核型多角体病毒ⅡORF146基因的克隆、表达与启动子活性分析

【目的】研究斜纹夜蛾核型多角体病毒II ORF146基因的结构与功能。【方法】根据SpltMNPV IIORF146基因序列设计引物,经PCR扩增克隆ORF146基因。在生物信息学分析基础上进行启动子活性分析和转录时相分析。构建ORF146片段的原核表达载体,表达并纯化融合蛋白后制备多克隆抗体。【结果】核苷酸序列分析表明,读码框含1383 bp,编码460个氨基酸的蛋白质,推定分子量为50.4 kDa。启动子活性分析和转录时相分析都表明该基因是个早、晚期都表达的基因,在病毒感染8 h和18 h有两个转录峰,24 h以后转录水平略有下降,但趋于稳定。pET-28a-ORF13原核表达的融合蛋白经纯化后制备的多克隆抗体特异性高,效价可达1∶3200以上。【结论】SpltMNPV II ORF146基因是一个早期和晚期都表达的病毒组成型结构蛋白基因。推测ORF146基因可能与SpltMNPV II病毒感染宿主细胞后病毒DNA复制有关。制备的多克隆抗体可用于深入研究该蛋白的生物学特性与功能。     

重组人血管内皮抑制素注射液联合洛铂对恶性胸腔积液患者生活质量及免疫功能的影响

目的:探讨重组人血管内皮抑制素注射液联合洛铂对恶性胸腔积液患者生活质量及免疫功能的影响。方法:选择2015年3月至2017年3月期间我院收治的恶性胸腔积液患者56例为研究对象,按照不同的治疗方式分为研究组(n=28)和对照组(n=28)。对照组给予洛铂治疗,研究组给予重组人血管内皮抑制素注射液联合洛铂治疗。比较两组患者治疗前后生活质量变化、免疫功能变化、临床疗效和不良反应发生情况。结果:研究组患者生活质量改善率高于对照组(P0.05)。治疗前,两组免疫功能指标含量经统计分析差异无统计学意义(P0.05),与治疗前比较,两组治疗后4周CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+、NK含量均升高,CD8+含量降低,且研究组CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+、NK含量较对照组升高,CD8~+含量较对照组降低(P0.05)。研究组总有效率为78.57%,与对照组的46.43%比较差异有统计学意义(P0.05)。两组患者心脏反应、呕吐、恶心、血小板减少、白细胞减少、贫血、乏力发生率比较差异均无统计学意义(P0.05)。结论:重组人血管内皮抑制素注射液联合洛铂治疗恶性胸腔积液具有较好的疗效,其可以改善患者生活质量,提高免疫功能,且不会增加患者不良反应,值得临床推广。     

地震与动物行为异常

人类面前量危险的灾害全世界每年发生地震达500多万次,其中有破坏性的地震约有1000多次。我国是一个多地震的国家,历史上最惨重的是1556年,我国陕西发生的那次大地震,死亡人数达83万人。七十年代,死亡人数在千人以上的大地震全球共有15次,其中发生在我国的就有三次。一次是1974年5月10日发生在我国云南、四川一带的6.8级地震,据有关资料,死亡人数约2000人左右。第二次是1975年2月在我国辽宁省海城营