甜菜夜蛾拓扑异构酶I氨基酸突变对其DNA解旋活性的影响

【目的】为了探究甜菜夜蛾 Spodoptera exigua 拓扑异构酶I（topoisomerase I, Top I）氨基酸突变对其DNA解旋活性的影响。【方法】通过克隆甜菜夜蛾 Top I 基因,构建原核表达载体,采用完全重叠PCR定点突变技术,向甜菜夜蛾Top I 的V420, L530, A653和S729（根据人Top I 氨基酸序列编号）4个位点引入突变,将改造成功的重组 Top I 基因转化至大肠杆菌BL21 (DE3)中,诱导重组蛋白表达、纯化,测定Top I突变对其解旋活性的影响。【结果】完全重叠PCR能实现甜菜夜蛾 Top I 定点突变。重组蛋白在体外得到稳定的表达,表达产物经SDS-PAGE电泳分析在96.0 kDa处出现特异性条带。通过对重组蛋白分离纯化并测定对质粒pBR322解旋酶活性,发现引入V420I, L530P和A653T突变后Top I的比活力显著降低,而引入S729T突变后比活力与野生型蛋白无显著差异。【结论】本研究证明在甜菜夜蛾Top I中引入V420I, L530P和A653T突变后,其对底物pBR322的解旋活性显著降低,为后期探索甜菜夜蛾Top I的定点突变与其对喜树碱及其衍生物敏感性的关系奠定了基础。     

一生耕耘硕果累累 热心传播科学知识——深切怀念原《生物学通报》主编郑光美院士

<正>2023年10月3日,《生物学通报》原主编、我国著名动物学家和鸟类生态学家、第八届全国人大代表、中国科学院院士、北京师范大学生命科学学院教授郑光美先生,因病医治无效在京逝世,享年91岁。噩耗传来,我们悲痛万分,为失去学术界的泰斗、一生致力于生物学科学知识传播并深受全国生物学师生爱戴的良师益友而深感痛惜。郑光美院士,1932年11月30日出生于黑龙江省哈尔滨市;1954年北京师范大学生物学系毕业后留校担任助教;1958年从东北师范大学研究生毕业后回到北京师范大学任教,先后担任讲师、副教授、教授;1991年被评为全国优秀教师;2003年当选为中国科学院院士;2007年获得第三届高等学校教学名师奖。     

三维标测环肺静脉前庭隔离术后肺静脉狭窄的相关因素

目的：探讨房颤射频消融术后肺静脉狭窄的相关因素,为其预防提供依据。方法：收集113例射频消融房颤患者的临床资料,记录射频术中消融时间、阻抗和温度;术后6个月64层CT左房-肺静脉重建随访,统计肺静脉狭窄的发生率;多元Logistic回归分析肺静脉狭窄的相关因素。结果：依据肺静脉数量计算的肺静脉狭窄率为3．4％,按照患者数量计算的肺静脉狭窄率为7．7％。多元Logistic回归分析,初始50例手术较其后病例的OR为2．167,95％CI=I．038-9．857,P=0．046,消融时间在总消融时间均数之上的患者比在均数之下者OR为2．856,95％CI=1．352-6．043,P=0．021。结论：初始50例手术和消融时间长是房颤射频消融术后肺静脉狭窄的相关因素。     

三维标测环肺静脉前庭隔离术后肺静脉狭窄的相关因素

目的:探讨房颤射频消融术后肺静脉狭窄的相关因素,为其预防提供依据。方法:收集113例射频消融房颤患者的临床资料,记录射频术中消融时间、阻抗和温度;术后6个月64层CT左房-肺静脉重建随访,统计肺静脉狭窄的发生率;多元Logistic回归分析肺静脉狭窄的相关因素。结果:依据肺静脉数量计算的肺静脉狭窄率为3.4%,按照患者数量计算的肺静脉狭窄率为7.7%。多元Logistic回归分析,初始50例手术较其后病例的OR为2.167,95%CI=1.038~9.857,P=0.046,消融时间在总消融时间均数之上的患者比在均数之下者OR为2.856,95%CI=1.352~6.043,P=0.021。结论:初始50例手术和消融时间长是房颤射频消融术后肺静脉狭窄的相关因素。     

促性腺激素释放激素激动剂治疗子宫内膜异位症的临床疗效观察

目的:探讨促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)治疗子宫内膜异位症的临床疗效.方法:将2007年8月～2012年1月本医务室收治的102例教师子宫内膜异位症患者随机分为三组,其中50例行GnRH-a加反向添加法治疗(Ⅰ组),28例行GnRH-a退缩疗法(Ⅱ组),24例作为对照组(Ⅲ组),对比三组治疗的临床疗效、垂体-卵巢轴内分泌变化及副反应.结果:Ⅰ组和Ⅱ组的治疗总有效率分别为96.0％和85.7％,均明显高于Ⅲ组(75.0％,P＜0.05).Ⅰ组和Ⅱ组治疗后患者的血清E2、FSH、LH、P的水平较治疗前均明显下降(P均＜0.05),Ⅰ组和Ⅱ组之间治疗有效率及治疗后血清E2、FSH、LH、P的水平均无明显差异(P均＞0.05),且三组治疗前后骨密度均无显著变化,治疗后三组之间骨密度亦无明显差异(P均＞0.05).结论:运用GnRH-a加反向添加法或退缩疗法治疗子宫内膜异位症,可显著改善患者的内分泌功能,临床效果明显优于常规处理,且副作用较小,值得临床推广应用.     

TaDEP1基因在普通六倍体小麦及其供体种中的保守与分化

根据已知小麦正源基因TaDEP1 cDNA序列设计引物,成功克隆了小麦TaDEP1基因组序列,发现该基因包含5个外显子,4个内含子.通过比较该基因在六倍体普通小麦A、B、D基因组中的差异,筛选出可以区分A、B、D基因组的分子标记Ta956.以中国春缺体-四体系为材料,利用该标记将TaDEP1基因定位于小麦5A、5B和5...     

合欢核型的分析

应用根尖压片法对含羞草科合欢属合欢的染色体数目和核型进行了研究,结果表明:合欢体细胞染色体数目为2n=26,核型为:2n=26=18m+6sm+2st,属于“2B”类型。染色体相对长度组成为2n=26=4L+8M2+12M1+2S。从染色体水平证明合欢在系统演化上属于较进化的种类。     

蛋白磷酸酯酶抑制剂冈田酸对人神经母细胞瘤 SK-N-SH细胞系tau蛋白磷酸化水平的影响

观察蛋白磷酸酯酶-1和蛋白磷酸酯酶-2A的抑制剂冈田酸(okadaicacid,OA)对人神经母细胞瘤系SK-N-SH细胞tau蛋白磷酸化水平的变化,确定tau蛋白过度磷酸化细胞模型的合适剂量和时间。用不同剂量OA与SK-N-SH细胞共温育不同时间,用显微镜观察细胞形态变化,用Western印迹法检测磷酸化tau蛋白和非磷酸化tau蛋白在Ser202位点和Ser404位点磷酸化水平的变化。10～160nmol/LOA与SK-N-SH神经细胞温育3～24h,可引起细胞形态损伤呈剂量依赖性和时间依赖性的变化,起效剂量和时间为10nmol/L和3h。10nmol/LOA与SK-N-SH细胞温育6～24h,磷酸化tau蛋白Ser199/Ser202位点和Ser404位点的表达明显增高,非磷酸化tau蛋白Ser202位点和Ser404位点的表达明显降低,总tau蛋白含量无明显变化。OA可以作为很好的研究tau蛋白过度磷酸化的工具药,10nmol/LOA与SK-N-SH神经细胞共温育6h可以作为制备细胞模型的适宜条件。     

大鼠海马神经元突触超微结构的增龄变化

目的为研究脑老化过程中学习、记忆功能减退的神经结构基础提供实验依据。方法应用透射电子显微镜,观察比较从出生1 d至24月龄（1 d、1月龄、3月龄、6月龄、18月龄、24月龄）的Sprague Dawley大鼠海马神经元突触超微结构的随增龄变化,同时观察与脑老化密切相关的指标脂褐素沉积。结果在大鼠6月龄之前,随着月龄的增加,海马神经元突触超微结构的发育逐渐完善,至6月龄大鼠突触数量明显增多;此后突触数量逐渐减少,至24月龄大鼠神经元突触数量最少。从1月龄开始海马神经元内即可见少量脂褐素颗粒沉积,随着月龄的逐渐增加,至24月龄时脂褐素颗粒沉积显著。结论青年期大鼠的海马神经元突触发育最好,进入老年期后,突触结构受损,老年期损伤最为严重,同时伴有大量的脂褐素颗粒沉积。     

独花兰菌根真菌的分离及rDNA ITS序列在其分类鉴定中的应用

独花兰(Changnienia amoena Chien)为我国特有的独属独种兰科植物,仅生长于长江中下游及陕西南部的山地林下及沟谷中,是中国特有兰科物种之一,被列为国家二级保护植物.以浙江天目山自然保护区的野生独花兰中分离获得的菌根真菌为对象,应用传统的形态结构鉴别与rDNA ITS分子生物学手段相结合的研究方法,进行了菌株的分类鉴定研究,确定该菌株为兰科菌根真菌之一的胶膜菌属(Tulasnella)真菌.研究结果对于全面了解兰科植物菌根真菌的特征和有效保护独花兰植物资源均具较大意义和参考价值.