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摘要 目的:探讨川续断提取皂甙(ASA)促进骨质疏松模型中骨髓基质细胞(rBMSCs)成骨分化的作用机制。方法:选取3月龄的雌性SD大鼠60只,随机分为卵巢切除组和假手术组,每组30只。采取卵巢切除法构建骨质疏松模型。建模成功后采用微型计算机断层扫描获得其松质骨微观结构的三维图像并进行分析。采用CCK-8法测定ASA对卵巢切除组rBMSCs增殖的影响。分析碱性磷酸酶(ALP)活性;荧光定量PCR检测成骨基因ALP、骨桥蛋白(OPN)、Runt相关转录因子2(RUNX2)的表达情况;蛋白免疫印迹试验检测磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)蛋白表达情况。结果:与假手术组比较,卵巢切除组骨小梁数量、骨小梁厚度和骨体积分数下降,但骨小梁分离度升高,差异有统计学意义(P<0.05)。第4天和第7天,ASA(10-5 mol/L)组、ASA(10-6 mol/L) 组、ASA(10-7 mol/L) 组和ASA(10-8 mol/L) 组rBMSC增殖均显著高于ASA(0学艺术mol/L)组,以ASA(10-5 mol/L)最为显著;而ASA(10-1 mol/L) 组、ASA(10-2 mol/L) 组、ASA(10-3 mol/L) 组和ASA(10-4 mol/L) 组rBMSC增殖显著低于ASA(0 mol/L)组,以ASA(10-4 mol/L)最为显著,差异均有统计学意义(P<0.05)。第7天和第14天,ASA(10-5 mol/L)组、ASA(10-6 mol/L) 组、ASA(10 -7 mol/L) 组和ASA(10-8 mol/L) 组ALP活性均显著高于ASA(0 mol/L)组,且第14天ALP活性高于第7天,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,ASA组成骨相关基因ALP、OPN和RUNX2相对mRNA表达水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与ASA组比较,wortmannin组成骨相关基因ALP、OPN和RUNX2相对mRNA表达水平均显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,ASA组PI3K、p-AKT蛋白表达水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与ASA组比较,wortmannin组PI3K、p-AKT蛋白表达水平显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:ASA能促进骨质疏松模型rBMSCs增殖,增强ALP活性,增强ALP、OPN和RUNX2的表达,而PI3K通路抑制剂wortmannin降低了这些成骨作用,并降低了ASA诱导的PI3K、p-AKT水平,表明ASA通过PI3K/AKT信号通路促进骨质疏松模型rBMSCs成骨分化。 相似文献
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西瓜种质资源遗传亲缘关系的RAPD分析 总被引:4,自引:0,他引:4
利用 RAPD 技术对国内外32份西瓜主栽品种与其骨干亲本及野生类型的遗传亲缘关系进行了研究。从720个随机引物(10bp)中筛选出15个能产生稳定多态性的引物用于 RAPD 反应,共扩增出104条 DNA 带,其中多态性 DNA 条带43条,占41.35%,平均每个引物扩增的 DNA 条带的数目为7.0条。聚类分析将供试材料分为6个类群:1个东亚生态型类群、1个美国生态型类群、2个中间生态型类群和2个非洲野生型类群,与传统的西瓜生态型分类基本吻合。每个生态型类群都有其特有的扩增(缺失)条带,同时分析了同一生态型中各个品种之间的亲缘关系及其品种的特异条带。本实验结果不仅从分子水平验证了西瓜是遗传基础狭窄的作物,而且在分子水平对西瓜传统分类与地理生态型分类进行了分析。 相似文献
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西瓜果实特异性基因wml1的5''端上游调控序列的分离 总被引:1,自引:0,他引:1
西瓜(Citrullus vulgris Schrad.)ADP-葡萄糖焦磷酸化酶大亚基基因wml1的表达具有果实特异性。本文利用Uneven PCR技术成功地从西瓜基因组DNA中分离出一段长1864bp、位于wml1基因5’端上游的新序列。该序列含有TATA盒和CAAT盒,具典型的启动子特征。克隆序列中180bp-1752bp和958bp-1752bp两个片段分别与GUS基因融合进行瞬间表达试验,结果初步表明180bp-1752bp片段具有果实特异性启动子活性,转录调控元件位于序列的180bp-958bp。 相似文献
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西瓜种质资源抗旱性苗期筛选与评价 总被引:1,自引:1,他引:0
采用苗期持续干旱法,对1066份西瓜种质资源开展大规模抗旱性筛选评价。结果表明,不同基因型种质资源抗旱性差异明显。采用快速聚类方法将供试材料分为抗旱、耐旱、敏感和抗性分离等4种类型,共获得25份强抗旱性西瓜材料,多为来源于非洲的野生西瓜种质资源,适用于西瓜嫁接砧木的选育;获得30份中等抗旱性材料,多为栽培种西瓜种质资源,具有农艺性状优良、抗病性强等优点,可直接用于抗旱节水西瓜新品种选育。 相似文献
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