改良Masson胶原纤维染色法在半薄切片中的应用

改良Ｍａｓｓｏｎ胶原纤维染色法在半薄切片中的应用胥维勇,杨红,李科,杨群（四川省人民医院病理科成都,６１００７２）在对２μｍ切片做Ｍａｓｓｏｎ胶原纤维染色时,发现该染色法对肌纤维、胞质、红细胞染色不够鲜艳,着色浅,对比度差,针对这一现象、我们将Ｍａｓ...     

植物组织中低聚糖乙酰化及毛细管气相色谱分析

建立一种用乙酰化衍生处理低聚糖并用毛细管气相色谱-FID进行分析的方法。以1-甲基咪唑为催化剂并以乙酸酐为乙酰化试剂,同时对植物样品中蔗糖、棉子糖和水苏糖等低聚糖乙酰化产物进行毛细管气相色谱分离和FID检测。确定了低聚糖乙酰化衍生物的毛细管气相色谱分析条件,并对低聚糖乙酰化反应条件及色谱分离条件进行了优化。结果表明,在80–1000ng·μL–1范围内线性关系良好,蔗糖、棉子糖和水苏糖的相关系数（R）分别为0.9952、0.9957和0.9877,并且精准度与回收率均较高。使用该方法对低聚糖进行乙酰化反应重现性好、所需样品材料及试剂量少且污染毒害小,能够得到理想的分离、检测和定量分析效果,适用于少量植物组织中低聚糖的定量分析。该方法在食品、医药检测和基础科学研究领域均具有广泛的适用性及参考价值。     

广西猫儿山发现云开脊蛇

云开脊蛇（Achalinus yunkaiensis）系2019年描述的新物种,目前仅知其分布于广东西南地区。2014年8月,本文作者在广西桂林猫儿山国家级自然保护区采集到1号脊蛇标本,因故未详细定种,2019年12月经形态学检视和线粒体COI基因序列重建分子系统关系,确定该标本为云开脊蛇,这是广西蛇类新分布记录种。     

四川省雷波县发现紫沙蛇

2020年7月,在四川省凉山彝族自治州雷波县采集到1号蛇类标本,基于形态比较和线粒体细胞色素b(Cyt b)基因序列重建的分子系统关系,确定该标本为屋蛇科(Lamprophiidae)紫沙蛇属(Psammodynastes)的紫沙蛇(P. pulverulentus),系四川省蛇类分布新记录种。基于Cyt b基因序列计算的遗传距离显示,来自四川、广西、广东、云南、海南、福建、纳米比亚的紫沙蛇个体之间遗传距离为3.6%～9.9%,差异较大,其种下关系亟待进一步研究和厘定。     

CUT&Tag产物回收和建库方法的优化

新兴的染色质靶向切割和标签化(clevage under target and tagment,CUT&Tag)技术利用转座酶在目标蛋白结合的DNA附近进行切割并对切割下的DNA片段进行标签化,通过后续的二代测序可以快速鉴定蛋白质-DNA相互作用,极大的简化了染色质免疫共沉淀测序(chromatin immunoprecipitation sequencing,ChIP-seq)的实验过程。CUT&Tag中转座酶完成标签化后需要DNA回收或其他后处理才能进行建库PCR,不同的回收方法对CUT&Tag结果有着显著的影响。通过建立生物素化转座体-链霉亲和素磁珠体系(streptavidin beads recovery CUT&Tag,srCUT&Tag),可以快速便捷地完成CUT&Tag的产物回收。本文在K562细胞中展开H3K4me3、RNA聚合酶Ⅱ(RNA polymeraseⅡ,RNAPⅡ)、转录因子CTCF和HMGA1的CUT&Tag实验,并利用现有的乙醇沉淀、片段分选(solid-phase reversible immobilization,SPRI)磁珠回收和直接PCR法,以及本研究建立的srCUT&Tag方法对产物进行回收。结果表明,从整体上看,SPRI磁珠回收和srCUT&Tag方法着较高的回收效率,而乙醇沉淀法则回收效率低下。在全部4种CUT&Tag产物回收过程中,SPRI磁珠回收均会损失大部分小于150 bp的产物片段。在CTCF和HMGA1 CUT&Tag产物的回收中,直接PCR法则损失了大部分大于300 bp的片段并与其他回收方法的结果有较大的差别。因此,srCUT&Tag能够比其他三种回收方法提供更多更完整的测序信息。综上所述,新建立srCUT&Tag回收方法相比现有的CUT&Tag产物回收方法能提高建库效率并得到更好的数据质量,为表观遗传学研究提供了更好的技术选择。     

不同条件下对改良PTAH染色效果的比较

不同条件下对改良ＰＴＡＨ染色效果的比较胥维勇，杨红，李科，杨群（四川省人民医院病理科成都６１００７２）我们采用ＰＴＡＨ染色改良法（胃蛋白酶消化处理代替酸性高锰酸钾氧化和草酸漂白还原作用），目的在于更加清晰地显示横纹肌纤维的细微结构，并在室温、加热、微...