海洋寡糖工程药物——壳寡糖制备分离新工艺及其抗癌活性研究

以海洋甲壳多糖为原料,研究了酶法解制备壳寡糖的方法,通过对专一性和非专一性除解用酶的筛选,确定以壳聚糖酶或6036要降为降解酶;考察了底物浓度、酶量、温度、pH、溶解介质等因素对降解反应的影响;提出了反应与分离相耦合制备壳寡糖的新构思,在此基础上进行了扩大试验,确认了过程实现工业化生产的可行性,对所生产壳寡糖的抑瘤活性研究证明一定铁壳寡糖具有很好的生物活性,具有抗肿瘤药物前景。     

人干扰素INF-ω在植物乳杆菌中的表达与鉴定

目的以植物乳杆菌为载体,将干扰素IFN-ω基因导入植物乳杆菌内,作为先期探索和尝试,构建重组阴道微生态菌株。方法采用抗菌肽诱导双组分调节表达系统,以细菌素SakacinA为诱导物、sapK和sapR为双组分调节基因的穿梭质粒pSIP300,将干扰素ω基因置于pstP300上,构成重组质粒psIP300-ω,在大肠埃希菌DI-ISet中进行扩增,分别电转化3株植物乳杆菌。Lacbacillus plantarum1．3,Lacbacillus plantarum 1．11,Lacbacillus plantarum 14917。结果与结论经SDS-PAGE与ELISA检测证实,成功构建了能够表达IFN-ω重组植物乳杆菌Lacbacillus plantarum 1．11／pSIIB00-ω。     

灰葡萄孢犬尿氨酸途径关键酶基因的鉴定

【背景】灰葡萄孢是一种重要的植物病原真菌,实验室前期明确了灰葡萄孢犬尿氨酸单加氧酶(kynurenine3-monooxygenase,KMO)基因BcKMO参与调控病菌的生长发育和致病力。犬尿氨酸单加氧酶(KMO)是犬尿氨酸途径的关键酶,但灰葡萄孢是否存在犬尿氨酸途径及其在病菌生长、发育和致病过程中的功能尚未见相关报道。【目的】鉴定灰葡萄孢犬尿氨酸途径中的关键酶基因,确定灰葡萄孢犬尿氨酸途径的存在,为阐明灰葡萄孢生长发育和致病力的分子机理奠定基础。【方法】利用生物信息学方法,对灰葡萄孢犬尿氨酸途径中犬尿氨酸酶(kynureninase,KYN)、吲哚-2,3-双加氧酶(indoleamine-2,3-dioxygenase,IDO)、犬尿氨酸氨基转移酶(kynurenine amino transferase,KAT)的编码基因进行分析;利用Real-time PCR技术,检测灰葡萄孢野生型BC22、BcKMO基因T-DNA插入突变体BCG183、恢复菌株BCG183/BcKMO中犬尿氨酸途径关键酶基因的表达水平;利用真菌犬尿氨酸酶KYN检测试剂盒,测定BcKMO突变体中犬尿氨酸酶(KYN)的含量。【结果】灰葡萄孢中含有2个犬尿氨酸氨基转移酶(KAT)的编码基因、3个吲哚-2,3-双加氧酶(IDO)的编码基因、10个犬尿氨酸氨基转移酶(KAT)的编码基因。灰葡萄孢KYN编码基因、IDO编码基因、KAT编码基因在突变体BCG183中的表达水平显著高于或低于在野生型和恢复菌株。突变体BCG183中犬尿氨酸酶(KYN)的含量显著低于野生型BC22和恢复菌株。【结论】灰葡萄孢中存在犬尿氨酸途径,灰葡萄孢BcKMO基因突变影响KYN、IDO和KAT编码基因的表达以及犬尿氨酸酶(KYN)的含量。     

大孔吸附树脂AB-8和十八烷基硅胶色谱分离纯化蛹虫草发酵液中虫草素工艺研究

主要研究了从蛹虫草发酵液中提取虫草素的工艺,确定了大孔吸附树脂AB-8及十八烷基键合硅胶反相层析柱对蛹虫草发酵液中虫草素的分离条件;吸附最佳工艺条件为上样液p H6,上样浓度0.4mg/m L,上样量5BV,吸附流速1.0BV/h;解吸最佳工艺条件包括解吸液20%乙醇,解吸体积15BV,解吸流速4BV/h。得到的解吸液进一步以十八烷基键合硅胶分离,条件为上样液p H6,梯度洗脱,流动相为p H6的水和p H6的乙醇。洗脱液通过结晶和重结晶得到精制虫草素。三步得到的虫草素纯度分别达到40%、90%和99%以上。     

青海湖湿地鸭科鸟类群落结构

2007 ～2010年每年4～10月,采用直接计数法对青海湖周边6种典型生境包括河口湿地、湖泊、淡水沼泽、淡水泉、岩石湖岸、沙滩中的鸭科鸟类群落进行了调查.共记录到鸭科鸟类9属21种,采用频率指数法确定的优势种有斑头雁( Anser indicus)、赤麻鸭(Tadorna ferruginea)、针尾鸭(Anas a...     

海州湾人工鱼礁海域春、夏季浮游植物群落结构及其与环境因子的关系

根据2009年5月和8月海州湾人工鱼礁建设海域水化学和浮游生物调查资料,对浮游植物群落结构进行了研究,并运用灰色关联分析方法对浮游植物丰度与环境因子的关系进行相关性分析。结果表明,海州湾浮游植物群落组成以硅藻为主;浮游植物丰度的时间分布以夏季平均丰度为3.06×106 cells／m^3,高于春季的3.12×104 cells／m^3;空间分布表现为鱼礁区高于对照区,以夏季鱼礁区站点R5的7.97×106cells／m^3最高,其次为夏季R3的7.53×106cells／m^3;对群落多样性的研究表明,春、夏两季鱼礁区香农一威纳指数（H＇）均值均高于对照区;春季影响浮游植物丰度的主要环境因子依次为：可溶性无机氮（DIP）、BOD5和悬浮物（SS）,而活性硅酸盐（SiO3-Si）、活性磷酸盐（PO4-P）和BOD5对夏季浮游植物丰度影响较大。     

论遗传咨询科技服务平台对医学遗传学课程建设的促进作用

遗传咨询工作是临床遗传学的重要组成部分。开放式的遗传咨询科技服务平台,构建了课外学习与课堂教学有机结合,师生互动的立体化教学体系,实践证明有利于提高学生综合素质,并有助于全面提升教师的教学素养,达到教学相长的目的。对医学遗传学课程建设起到了促进作用。     

临床常见革兰阴性菌的分布动向及耐药趋势

监测革兰阴性菌的分布动向及耐药趋势,为临床合理使用抗菌药物提供依据。3年间临床分离致病菌以革兰阴性杆菌为主,革兰阴性杆菌检出率逐年下降,非发酵革兰阴性杆菌的比例逐年上升;加酶抑制剂的抗菌药物较不加酶抑制剂的抗菌药物对非发酵革兰阴性杆菌显示了不同程度的抑菌优势,肠杆菌科革兰阴性杆菌ESBLS检出率逐年增加。     

重组蛋白G基因工程菌高密度发酵及其分离纯化

蛋白G是链球菌细胞壁蛋白,能和哺乳免疫球蛋白结合,在分离抗体研究方面具有重要的作用。重组蛋白G(SPG)基因重组工程菌高密度发酵工艺和SPG分离纯化研究工艺直接影响了蛋白G的应用。通过一级、二级种子培养,转接到发酵罐及控制补料浓度、加入IPTG等条件,考察了接种量、氧气、pH、培养方式等发酵工艺,以及超声破碎菌体、镍柱亲和层析、Sephadex G-25凝胶过滤层析和DEAE-FF离子交换层析分离提取SPG工艺,并用SDS-PAGE检测分离提取效果。高密度发酵能得到至少80g/L的菌体,最高达到150g/L的菌体,每升发酵液可得到1g的SPG。本生产工艺可得到高浓度和高产量的SPG。     

食品级乳酸菌表达系统研究进展

乳酸菌表达系统是近几年发展起来的食品级高效表达系统。乳酸菌具有益生菌特征,因此该表达系统与其他细菌表达系统相比有很多优点。介绍了糖诱导表达系统、噬菌体Φ31爆发式诱导的表达系统、乳链球菌素调控表达系统、温控表达系统等的研究进展,以及这些系统的应用前景。