用一种新型的PCR方法快速制备人TNF-α缺失突变体

人肿瘤坏死因子 α(hTNF α)的 2个Loop区 2 9～ 36、141～ 146是受体的主要结合部位 .应用一种新型的PCR方法 ,快速制备了这 2个Loop区的缺失突变体 ,并对其活性进行了研究 .结果表明 :这种新型的PCR方法在制备缺失突变体中具有快速、简便、经济等优点 ,值得推广 ;缺失蛋白对L92 9细胞的毒性作用明显降低 ,表明这 2个区域为hTNF α发挥其生物作用所必需     

Burkholderia sp. IDO3中靛蓝合成基因的克隆表达及其合成特性

【目的】克隆和表达靛蓝合成基因,并将其用于靛蓝合成研究。【方法】对菌株Burkholderia sp.IDO3中靛蓝合成基因进行克隆和大肠杆菌异源表达,构建能合成蓝色色素的基因工程菌。利用液相色谱和质谱对产物进行分析,采用单因素法对培养温度、转速、培养基成分等进行优化,并考察优化条件下的靛蓝合成曲线。【结果】构建了一株重组大肠杆菌E.coli IND_AB,该菌株能够在LB培养基生长的过程中合成蓝色色素,产物分析表明该色素为靛蓝;菌株IND_AB在30°C和150 r/min条件下能在LB培养基中合成22.9 mg/L靛蓝,优化培养条件后产量达到25.4 mg/L;优化LB培养基各组分浓度后产量可提高到35.1 mg/L;外加50.0 mg/L吲哚或0.1 g/L色氨酸后靛蓝产量可分别提高到57.7 mg/L和64.4 mg/L,相比初始产量提高了152.0%和181.2%;靛蓝合成曲线表明在添加吲哚或色氨酸的培养基中,菌株IND_AB前6 h没有靛蓝生成,6-15 h为靛蓝合成加速期,18 h达到产量平衡。【结论】重组大肠杆菌IND_AB可用于生物合成高纯度靛蓝,为靛蓝的微生物合成提供了有效的基因资源。     

小鼠粪便中短链脂肪酸提取与检测方法的建立及应用

目的:建立小鼠粪便中三种短链脂肪酸(乙酸、丙酸、丁酸)的检测方法及其应用。方法:使用水提法和乙醚萃取法提取小鼠粪便中的短链脂肪酸(SCFA)通过高效液相色谱(HPLC)评价两种方法的提取效果,并建立短链脂肪酸的HPLC定量检测方法并进行方法学考察,利用上述建立的体系评价新琼寡糖对小鼠短链脂肪酸合成的影响。结果:确定了SCFA的乙醚萃取方法和基于HPLC的定量检测方法,被测组分浓度与其峰面积呈良好线性关系,各组分测定的相对标准偏差在1.31%~2.61%之间,平均加标回收率为86.6%~105.8%之间;对喂饲新琼寡糖小鼠粪便中的SCFA检测显示,较对照组乙酸和丙酸含量提高了1倍,丁酸含量提高了0.45倍。结论:建立了小鼠粪便中SCFA的提取和定量检测方法,并利用该方法证明了新琼寡糖能促进小鼠短链脂肪酸的合成。     

光周期和有效积温对水稻分蘖角度动态变化的影响

通过田间播期试验、植物培养箱人工光周期和温度试验研究了水稻DI508分蘖角度动态变化特性与光周期和温度的关系.结果表明：不同播期(4月4日、5月5日、6月4日)条件下,大田DI508分蘖角度从半散生到渐趋直立的变化均发生在自然光周期变短(6月21日,夏至)后的10～15 d;在光周期条件下,DI508的分蘖角度同样具有动态变化特性,10 h光照处理可使分蘖角度提前从半散生向直立转变,14 h光照处理则延缓转变.温度处理对水稻分蘖角度的变化特性没有显著影响.     

野生巴马拟缨鱼肌肉营养成分研究

巴马油鱼, 曾用名巴马穗唇鲃(Crossocheilus bamaensis,Fang),学名为巴马拟缨鱼(Pseudocrossocheilusbamaensis (Fang)),鲤形目(Cyprinformes),鲤科(Cyprinidae),野鲮亚科(Labeoninae),拟缨鱼属(Pseudocrossocheilus)。巴马穗唇鲃主要分布于西江水系的广西巴马、天鹅、都安、来宾,贵州平塘、罗甸、望谟等地,于每年5、6月的洪水期繁殖,以固着藻类为食。       

饵料中不同脂肪水平诱导红姑鱼脂肪肝病的研究

1260尾初始重约为273g的红姑鱼(Sciaenopsocellatus)分为9组,每组3个平行,用9种不同水平蛋白质与脂肪日粮饲养于循环水系统的水泥池网箱内,在水温为232±20℃条件下养殖56d。本实验为饵料中不同脂肪水平诱导红姑鱼脂肪肝病的研究。9种日粮中蛋白质含量分别为:36%,40%,44%;脂肪含量分别为:4%,8%,12%。红姑鱼的各期生长率和存活率随着日粮脂肪含量增加而显著下降,红姑鱼肝胰脏脂肪含量与日粮脂肪水平成正比,各组红姑鱼均发生程度不同的营养性脂肪肝病,其病变程度与日粮脂肪水平成正相关。饲喂脂肪含量分别为8%,12%日粮的红姑鱼从实验3周起开始大量发病死亡,死亡率在5周达到高峰。主要表现为厌食,不游动,皮肤发黑,消瘦直至死亡。解剖见肝胰脏肿大,苍白发黄,柔软易碎。组织学检查发现,各组红姑鱼肝胰脏均见肝细胞不同程度的脂肪变性,溶解坏死,胰腺细胞亦萎缩。电子显微镜观察,在肝细胞线粒体、内质网与细胞浆内有大量微细至大颗粒状的脂滴出现。实验结果表明,饲喂9种不同水平的蛋白质和脂肪日粮的红姑鱼均引起营养性脂肪肝病,其病变程度与日粮脂肪水平成正相关,日粮中脂肪是红姑鱼发病与死亡的直接原因。       

“课程思政”理念下《生物技术概论》教学改革与实践

“课程思政”是高校人才培养和思想政治教育同向同行协同育人的新理念，为高等院校专业课教育教学改革指明了新方向和新路径。《生物技术概论》在生命科学类专业人才培养的课程体系中占有重要地位。如何系统深入发掘专业课思政元素并有效地传递给学生，践行“课程承载思政，思政寓于课程”育人理念和方法，是新时期《生物技术概论》课程面临的重要课题。本研究聚焦生命科学类专业基础课程《生物技术概论》,对开展课程的思政改革的意义、思路和方法等方面进行了思考和探索，并以该课程的第1章基因工程的第7节“基因编辑技术及其应用”为例，阐述了挖掘教学案例、融入思政元素和实现德育目标的具体教学实践过程，以期为实现寓思想政治教育于专业课的教学之中，进而实现“三全育人”提供工作思路和具体教学案例。课后采用问卷调查的方式对教学效果进行分析。结果显示：综合运用案例教学和课堂讨论等教学方法，将思想政治教育有机融入专业课教育的教学实践中是切实可行的。87%的学生对采用课堂讨论的互动教学模式表示非常满意，81.5%的学生表示思政元素的导入自然流畅，与专业课锲合度高，内容充实感染力强。此外，调查结果也反映出，教学案例的讲解、多媒体运用、师生沟...     

闽楠(Phoebe bournei, Lauraceae)地理分布及随气候变化的分布格局模拟

掌握气候变化对珍稀濒危物种的分布和适应性变化趋势的影响，是开展保护生物学研究的基础。闽楠（Phoebe bournei）是我国东部亚热带森林的优势树种，也是金丝楠木的主要来源树种。它具有重要的经济、园林与生态价值，目前已被列为国家II级保护植物。预测不同气候背景下该物种的地理分布格局可为这一珍贵树种的资源保护、合理利用与开发提供指导依据，同时也为闽楠的起源与地理分化研究奠定基础。本研究基于闽楠的123个分布点信息与19个气候因子，采用最大熵模型（MaxEnt）与ArcGIS空间分析，构建闽楠于末次冰期（距今22000年）、当前（1950-2000年）以及未来（2050年与2070年）相应地潜在分布区格局，并确定未来受威胁的适生区、面积与影响分布的气候因子。结果表明：闽楠的适生区覆盖浙江、福建、江西、广东、广西、湖南、湖北、贵州及重庆，制约闽楠地理分布的气候因子主要是温度季节性变化标准差（Bio4）、最暖月最高温（Bio5）与最干季降水量（Bio17）；在末次盛冰期闽楠退缩到我国东部的许多山区，诸如武夷山、浙闽丘陵、武陵山、雪峰山、湘黔桂毗邻的山区；随着全球气候变暖，到2050年与2070年闽楠的适生区有着破碎化甚至丧失的风险。