CRISPR/Cas9:基因编辑的新时代

基因编辑技术是通过核酸内切酶对基因组DNA进行定向改造的技术,可以实现对特定DNA碱基的缺失、替换等,常用的四种基因编辑工具分别是:巨型核酸酶、锌指核酸酶、转录激活因子样效应物核酸酶以及CRISPR/Cas9系统.其中CRISPR/Cas9系统作为一种新型的基因组编辑技术具有组成简单、特异性好、切割效率高的优点.该文对...     

高危儿随访情况分析及其父母生命质量调查研究

目的:了解高危儿随访情况并对其父母生命质量进行调查。方法:选取2017年5月~2019年5月于西安交通大学医学院附属三二〇一医院儿童保健科就诊的400例高危儿作为研究对象,分析400例高危儿的高危因素,统计随访次数,分析随访次数1~2次的高危儿的失访原因,同时采用SF-36量表评估高危儿父母与正常儿父母的生命质量。结果:按照占比从高到低的顺序,400例高危儿的高危因素分别为早产、低出生体重、高胆红素血症、窒息和(或)缺氧缺血性脑病、颅内出血、母亲高危因素、吸入性肺炎及其他,占比分别为74.00%、18.50%、13.25%、6.75%、2.75%、2.50%、1.25%、2.00%。400例高危儿中随访次数1~2次183例,占比45.75%,3~5次57例,占比14.25%,≥6次人数160例,占比40.00%。183例随访次数1~2次高危儿失访原因主要是有问题再来医院、孩子正常、不了解随访重要性、自己有育儿经验、孩子小,不方便等。高危儿父母生理机能、生理职能、躯体疼痛、一般健康状况、精力、社会功能、情感职能、精神健康评分均低于正常儿父母(均P<0.05)。结论:高危儿的随访失访率相对较高,其主要原因可能与父母的主观意识有关,此外,高危儿父母生命质量降低,临床工作中可通过加强高危儿系统管理以及对高危儿父母的宣教力度,从而降低失访率,提高高危儿父母的生命质量。     

庚型肝炎病毒基因组RNA转录体恒河猴肝内注射感染的初步研究

庚型肝炎病毒(GBV-C/HGV)属黄病毒科,为单股正链RNA病毒,是新近发现的疑似引起人类肝炎的病原体[1,2],但对其致病性目前尚存在争议.GBV-C/HGV体外培养困难,不感染常规实验动物,但可感染人类和灵长类动物如黑猩猩、猴等[3-5].随着分子生物学技术的进展,一些正链RNA病毒如甲肝病毒、脊髓灰质炎病毒、登革病毒、丙型肝炎病毒等的全长cDNA克隆构建成功[6-12],这些全长cDNA克隆及其转录体被证明在细胞及动物模型中具有感染性,为我们研究GBV-C/HGV提供了一条新的可行的途径.为此我们在构建GBV-C/HGV基因组全长cDNA克隆的基础上[13],体外转录制备了RNA并直接注射到恒河猴肝脏内,进行了感染实验研究.现将结果报告如下.     

美国大学的动物实验的准入制管理

在美国,动物实验管理早就进入法制化轨道。任何大学、科研院所等部门进行动物实验都必须遵守美国实验动物一系列法规和规定。比如经美国国会授权,农业部（USDA）首先制定的《动物福利法》（Animal Welfare Act）、     

炭疽芽胞杆菌染色体特异序列的筛选及实时定量检测

筛选117条炭疽芽胞杆菌(Bacillusanthracis)特异序列,经双重特异性验证后得到19条理想的特异序列(genomicsignatures),其中6条符合设计TaqMan探针建立实时定量PCR的要求,根据常规PCR检测结果选择其中C04片段与炭疽芽胞杆菌毒性质粒pX01、pX02上的pagA、capB基因建立实时定量PCR检测体系。经试验证实这一体系检测灵敏度达到每PCR反应10~100个拷贝。利用12种相关菌株评价后获得100%特异性,对10份模拟污染标本和20份对照标本检测,所有污染标本均被检出,所有对照标本均为阴性。此方法特异、灵敏、高效,在炭疽芽胞杆菌感染的诊断和环境污染的检测等领域有潜在的应用前景。     

植物激素与马铃薯块茎形成

综述了近年来马铃薯块茎形成与植物激素关系的研究进展以及不同激素在块茎形成中的作用,提出块茎形成是多种激素共同调节的,对今后的研究方向进行了讨论。     

基于荧光原位杂交技术的紫薇属植物核型分析

以紫薇(Lagerstroemia indica)、尾叶紫薇(L.caudata)、屋久岛紫薇(L.fauriei)和福建紫薇(L.limii)4种紫薇属植物为材料,利用染色体荧光原位杂交技术(FISH)获得了4种紫薇属植物的有丝分裂中期染色体FISH图及核型参数,分析了45SrDNA在紫薇属植物染色体上的数量和分布特点。结果表明,4种紫薇属植物染色体上均具有1对45SrDNA杂交位点,位于较长染色体短臂的近端部,紫薇、尾叶紫薇、屋久岛紫薇和福建紫薇的核型公式分别为2n=48=2M+24m+22sm、2n=48=30m+18sm、2n=48=2M+20m+26sm和2n=48=2M+32m+14sm,均为2A型。该研究首次获得了紫薇属植物45SrDNA荧光原位杂交核型,为紫薇属植物亲缘关系研究和细胞生物学研究提供了分子细胞学依据。     

人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)mRNA5′端非翻译区(UTR)对其表达的调控

运用反转录-PCR技术,从黑色素瘤细胞中扩增出t—PA cDNA 5′末端460bp的片段,再经重组获得含完整5′-UTR的t—PA cDNA克隆,在兔网织红细胞裂解物中翻译和COS-7细胞中表达发现,t—PA mRNA 5′—UTR对其表达有明显的抑制作用。将t—PA mRNA 5′—UTR用苜蓿病毒RNA 5′—UTR替换,使t—PA的表达水平提高3-7倍,mRNA翻译起始区二级结构分析结果表明,翻译起始区的二级结构与t-PA的表达水平有关。     

音乐在黑猩猩采血训练中的应用初探

为探究外源促性腺激素对伊拉兔(Oryctolagus cuniculu)生殖器官中表皮生长因子(EGF)表达水平及其作用特点的影响,本实验以伊拉兔为研究对象,随机选取30只(雄兔6只,雌兔24只),将雌兔随机分为超排处理组(n = 12),即肌肉注射70 U 孕马血清促性腺激素(PMSG)和100 U人绒毛膜促性腺激素(hCG)和对照组(不注射任何激素,n = 12)。并运用实时定量PCR(qRT-PCR)、蛋白免疫印迹(Western-blot)及免疫组化方法,研究经超排处理的伊拉兔卵巢、输卵管和子宫中表皮生长因子的表达与定位情况。结果显示,在超排处理后的伊拉兔卵巢、输卵管和子宫中,表皮生长因子mRNA与蛋白的表达量极显著高于对照组的卵巢、输卵管和子宫(P < 0.01),其阳性信号分别定位于卵巢的初级卵母细胞、颗粒细胞、内膜细胞、间质细胞和血管内皮细胞,输卵管的纤毛细胞、基细胞、黏膜上皮和肌层中,以及子宫的上皮细胞和内膜细胞中。研究表明,超排使用的外源促性腺激素可促进卵巢、输卵管和子宫中表皮生长因子表达量升高,提示其可能参与伊拉兔的生殖过程并调节卵巢、输卵管和子宫的功能。     

再论医院整体医疗管理的理论基础与组织运作

整体医疗管理是在整体论和医学整体观启发下产生的医院医疗管理新理论。医院整体医疗管理弥补了传统医院医疗管理模式的不足,对促进医院服务由医疗救治模式向院前、院内、院后全程化,预防、医疗、保健、康复一体化的健康服务模式转化具有重要意义。文章论述了实行医院整体医疗管理的必要性,讨论了其思想基础、变革目标以及基本运作模式。