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为研究重组阴道毛滴虫蛋氨酸裂解酶的活性,从阴道毛滴虫提取RNA,经过RT-PCR克隆蛋氨酸γ-裂解酶基因,与pET-15b质粒连接构建原核表达载体pET-15b-mgl1,并测序。转化宿主菌BL21后进行诱导表达,分离纯化目的蛋白并研究其酶学性质。以L-蛋氨酸、DL-同型半胱氨酸、L-半胱氨酸为底物测定重组酶Km值为0.318、2.14、1.62mmol/L,比活性分别为20.17、318.69、56.96μmol/min/mg protein。MGL最适pH在5.0到6.0之间,在50℃可稳定30min无活性损失。实验结果显示重组酶具有较高的活性和较好的热稳定性,为临床应用研究奠定基础。 相似文献
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工业催化用酶已经成为现代生物制造技术的核心"芯片"。不断设计和研发新型高效的酶催化剂是发展工业生物技术的关键。工业催化剂创新设计的科学基础是对酶与底物的相互作用、结构与功能关系及其调控机制的深入剖析。随着生物信息学和智能计算技术的发展,可以通过计算的方法解析酶的催化反应机理,进而对其结构的特定区域进行理性重构,实现酶催化性能的定向设计与改造,促进其工业应用。聚焦工业酶结构-功能关系解析的计算模拟和理性设计,已成为工业酶高效创制改造不可或缺的关键技术。本文就各种计算方法和设计策略以及未来发展趋势进行简要介绍和讨论。 相似文献
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103份亚洲棉表型多样性分析 总被引:5,自引:0,他引:5
对103份分别来源于印度、越南、贵州、广西和云南等不同地域的亚洲棉进行了表型遗传多样性分析。结果发现亚洲棉在质量性状和数量性状上均存在不同程度的遗传多样性;质量性状遗传多样性指数在主茎、叶、花、铃等不同部位表现不同;21个质量性状的多样性指数为0.04~1.01,平均0.57,3个数量性状的多样性指数为1.65~1.96,平均1.82,表明数量性状的遗传多样性大于质量性状。研究发现不同地域的亚洲棉遗传多样性不同,并将这103份亚洲棉聚类到8个组群。 相似文献
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土壤水分交替变化对湿地松幼苗光合特性的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
以盆栽湿地松幼苗为材料,通过实验室模拟三峡库区从水淹到干旱的过程,设置常规供水(CK)、常规供水-轻度干旱-复水(DR),水淹(FL),水淹-轻度干旱-复水(FD)4个实验组,研究土壤水分交替变化对湿地松幼苗光合参数及叶绿素含量的影响.结果表明:(1)不同土壤水分处理条件对湿地松幼苗的净光合速率、气孔导度、蒸腾速率、胞间CO2浓度、气孔限制值、水分利用效率和光合色素含量都有一定影响.(2)在实验的前中期,DR、FL和FD组湿地松幼苗的光合速率、气孔导度、蒸腾速率都显著下降,DR和FD在实验后期回升到较高水平.(3)在整个实验期间各处理组的水分利用效率较对照都有不同程度上升,并以DR组的最大(4.95μmol·mmol-1).(4)随着处理时间延长,各处理组湿地松幼苗的总叶绿素含量及叶绿素a/b值均呈先降后升的趋势,其中叶绿素/类胡萝卜素的比值在4.379~6.019间波动,而叶绿素a/b值则在2.207~2.850间波动.研究发现,湿地松幼苗在水分代谢、光合生理等方面等能够很好地适应水淹以及"淹-干"的水分交替变化环境,并且在解除胁迫后能够迅速恢复生长,可以考虑用于三峡库区消落带的植被修复和重建. 相似文献
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目的:探索叶绿体分裂蛋白PLASTID DIVISION1(PDV1)胞质侧结构域的高效可溶性表达条件,并得到高纯度目的蛋白。方法:通过改变表达载体种类、基因片段大小、诱导剂浓度、诱导温度的方法,以及运用分子伴侣的协助,实现目的蛋白高效可溶性表达。通过镍柱亲和层析和分子筛层析纯化目的蛋白。结果:(1)带His标签的目的蛋白大部分以包涵体形式存在于沉淀中;(2)截掉疏水区域并与增溶标签GST或NusA融合表达,再通过改变诱导表达条件,可以实现PDV1胞质侧结构域的可溶性表达;(3)比较目的蛋白可溶性表达量,选择高效可溶性表达体系,并在该条件下纯化得到高纯度目的蛋白。结论:PDV1胞质侧结构域的高效可溶性表达及纯化,为进一步研究该蛋白的结构及其在叶绿体分裂过程中的作用奠定了一定基础。 相似文献
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目的:探讨急性髓细胞白血病(AML)染色体异常核型的分布情况、特点及其与预后的关系。方法:选择2009年1月-2012年12月在本院门诊和住院治疗的AML患者277例,采取新鲜骨髓,采用直接法和短期培养制备标本,以R显带技术进行染色体核型分析。结果:除47例无分裂相共检出异常核型122例,异常率为53.04%。结构异常(75例)以t(15;17)(56例)和t(8;21)(19例)常见,1.78%的M2、90.77%的M3、26.79%的M2和1.85%的M5分别有t(7;11)、t(15;17)、t(8;21)和t(11q23)异常,而100%的t(7;11)、100%的t(15;17)、55.56%的t(8;21)、100%的t(8;15)和66.7%的t(11q23)分别见于M2、M3、M2、M5和M4亚型。数I/1异常(28例)以+8(12例)为常见,100%的+22见于M4E0。结构和数目同时异常(19例)以t(8;21)伴性染色体丢失(8例)为最常见,100%为M2。核型异常与临床缓解率高度相关,伴t(15;17)易位组、伴t(8;21)易位组预后佳,正常核型组次之,其它异常核型预后较差,复杂核型预后最差。结论:特定的染色体异常与亚型及预后密切相关,染色体核型分析在急性髓细胞白血病诊断、分型、治疗及预后判断中具有十分重要的地位和作用。 相似文献
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目的:研究IQGAP1基因干扰对人食管癌细胞同质粘附能力的影响。方法:体外培养人食管癌KYSE150和EC9706细胞,利用Western blot方法检测两株细胞。IQGAP1蛋白的表达,利用缓慢聚集和细胞分离实验比较两株细胞同质粘附能力的差异;进一步在KYSE150和EC9706细胞中构建IQGAP1基因干扰的稳定细胞系,观察IQGAP1基因干扰后细胞同质粘附能力的改变。结果:KYSE150细胞IQGAP1蛋白表达量低于EC9706细胞,而同质粘附能力高于EC9706细胞;IQGAP1基因干扰后,其蛋白表达量明显降低,而细胞同质粘附能力明显增强。结论:IQGAP1基因干扰能够显著增强食管癌细胞的同质粘附能力,从而降低肿瘤细胞的恶性表型。 相似文献
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围术期最常用,最重要的药物是全身麻醉药(包括吸入麻醉药和静脉麻醉药),麻醉药是适应手术的需要而出现的,经过长时间的发展,它的药理作用也越来越完善。在过去几年里很多研究报道的麻醉药的药理作用与介导的细胞凋亡之间的关系主要集中在神经系统。然而,麻醉实践中大部分麻醉药物都在肝脏代谢,已有证据表明麻醉药对肝细胞也有影响。麻醉药介导的细胞凋亡作用可能与caspase通路,Bcl-2家族,TRADD,FADD等多种因素有关。但不是所有麻醉药都对肝细胞有凋亡作用,部分还具有保护作用。因此本文就现有的麻醉药对肝细胞凋亡中的作用进行了综述。 相似文献
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摘要目的:总结腹腔镜胆囊切除术(laparoscopic cholecystectomy,LC 术)中胆管损伤的诊治体会。方法:回顾19 例LC 术致胆管
损伤病例的临床资料,分析其发生的类型及原因,并总结其诊断和治疗要点。结果:19 例患者中,1 例发生在左右肝管汇合以上处
损伤,2 例发生胆总管缺损伤,3 例发生胆总管横断伤,5 例发生胆总管侧面伤,3 例发生胆总管钳夹但未切断,1 例发生右肝管损
伤,4例发生胆囊管残端漏。治疗方法应视胆管损伤类型的不同而不同。采用断端处胆管端端吻合,同时放置T 管引流、单纯胆总
管T 管引流、开腹去除误夹夹子、ERCP检查放置鼻胆管引流及胆肠Rouxeny 吻合术。胆肠Rouxeny吻合术是临床上最常用的修
补胆道损伤的手术方法。随访6 个月~18 年,恢复好,无1 例死亡。结论:胆管损伤是LC 术最常见的并发症之一,规范的操作及
手术适应症的掌握能减少其发生。一旦出现胆管损伤,及时诊断及正确处理能减少其不良后果。 相似文献
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通过尼罗红荧光染色对一株富油微藻金藻Isochrysis sp.CCMM5001建立和完善了一种方便快捷且能准确定量金藻油脂含量的方法,利用该方法探索了不同培养条件对金藻生长和总脂积累的影响。结果表明:经尼罗红染色后,金藻的单细胞荧光强度与其总脂含量呈良好的线性关系;金藻最适生长的氮浓度、光照强度和温度分别为1323μmol/L、148.0μmol/(m2·s)、25℃;最适总脂积累的氮浓度、光照强度和温度分别为441μmol/L、92.5μmol/(m2·s)、15℃;优化培养条件并采用两阶段培养法后总脂含量和油脂产率都有大幅提高,可分别高达63.3%和22 mg/(L·d)。 相似文献