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目的:探讨体外分离和培养小鼠表皮干细胞和分析表皮干细胞克隆形成能力的方法。方法:采用中性蛋白酶和胰酶消化新生小鼠表皮基底层细胞,将细胞直接接种在细胞瓶中,在无滋养层条件下培育;利用表皮干细胞标记物K15和α6整联蛋白进行免疫荧光鉴定;以小鼠胚胎成纤维细胞作为滋养层与成年小鼠角质细胞共培养,进而分析表皮干细胞的克隆形成能力。结果:新生小鼠表皮干细胞克隆在培养2~3 d后开始形成,细胞核质较小,细胞呈小而圆的形态特征;传代后的细胞可以被K15和α6整联蛋白特异性标记。结论:利用该方法能够实现对小鼠表皮干细胞的体外培养和传代。 相似文献
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玉米抗镰刀菌穗腐病接种方法及抗病资源筛选研究 总被引:7,自引:0,他引:7
对玉米抗穗腐病性鉴定中采用的牙签法与花丝通道注射法进行比较研究表明,牙签法接种果穗的发病程度重于花丝通道注射法接种。牙签法接种病菌于果穗子粒与穗轴之间,有利于病原菌的发育扩展,是一种比较理想的、容易操作的接种方法。采用牙签法接种串珠镰刀菌,对178份玉米自交系和15份杂交种进行抗穗腐病鉴定,筛选出高抗(HR)自交系1份、抗病(R)玉米自交系34份、抗病(R)玉米杂交种12份。 相似文献
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间隙连接分子Cx43相关蛋白及其功能研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
间隙连接是细胞间直接进行信息交流的唯一膜通道结构。Cx43是构成间隙连接中分布最广、研究最多的间隙连接分子,目前运用免疫共沉淀、免疫荧光共定位、pull-down以及酵母双杂交等多种方法研究发现了众多的Cx43相关蛋白。这些蛋白通过与Cx43相互作用在间隙连接蛋白的组装、运输、膜定位,间隙连接通道的形成以及对间隙连接通讯的调控等一系列过程中均发挥十分重要的作用。本文就目前已经研究发现的Cx43相关蛋白及其最新的功能研究进展进行综述。 相似文献
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利用RT-PCR及RACE技术,从药用植物枸杞中克隆了1个编码蔗糖磷酸合成酶(SPS)基因的全长cDNA,命名为LbSPS(GenBank登录号KC834608)。序列分析表明:LbSPS基因长3 677bp,开放阅读框为3 165bp,编码1 033个氨基酸,分子量为118.457 5kD,理论等电点6.05。系统进化分析显示,LbSPS编码的氨基酸序列与甜瓜、马铃薯、番茄等蔗糖磷酸合成酶基因编码氨基酸序列一致性为66%~98%。qRT-PCR分析显示,LbSPS基因在枸杞花中表达量最高,叶中表达水平较低。该研究为进一步了解LbSPS在枸杞生长发育、逆境胁迫等过程中的生物学功能奠定了基础。 相似文献
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目的:探讨脑胶质瘤中心体扩增情况及其与疾病分期的相关性。方法:对40例胶质瘤标本和10例正常脑组织标本进行HE染色的检测;免疫组织化学检测Ki67和γ-微管蛋白的表达;使用免疫荧光染色技术检测中心体扩增情况。结果:不同标本中,HE染色呈现不同的细胞形态特征;Ki67在正常脑组织中没有表达,但在Ⅰ/Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ级胶质瘤中的阳性表达率分别为65%、80%和100%,各组间差异具有统计学意义(P<0.01),说明Ki67的表达与胶质瘤级别相关。γ-微管蛋白在正常脑组织和Ⅰ/Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤中的表达率分别为30%、50%、80%和100%,各组间差异具有统计学意义(P<0.01),说明胶质瘤级别升高,中心体扩增率增加;免疫荧光检测显示,中心体扩增率和脑胶质瘤的级别呈正相关。结论:中心体扩增是脑胶质瘤的恶性程度的特征之一,并且与胶质瘤发病阶段有关,提示中心体扩增和脑胶质瘤的发展具有密切的相关性。 相似文献
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脂肪酰基还原酶基因广泛参与植物的脂类代谢过程,影响植物雄配子体花药发育以及表皮蜡酯合成等。本研究利用RACE方法从宁夏枸杞(宁杞1号)花药中克隆脂肪酰基还原酶LbMS2-2基因,开放阅读框全长1800bp,编码599个氨基酸,等电点为9.00。生物信息学分析表明,LbMS2-2蛋白定位于叶绿体中,该蛋白序列与茄科植物甜辣椒、烟草和马铃薯中的脂肪酰基还原酶表现出较高的序列相似性;实时荧光定量PCR显示,LbMS2-2基因在枸杞花器官中表达,且在枸杞花药发育的四分体时期、单核花粉时期和双核花粉时期表达量较高。原位杂交结果证实该基因只在花药绒毡层和小孢子中表达。亚细胞定位结果进一步验证LbMS2-2基因的叶绿体定位。以上结果表明,枸杞脂肪酰基还原酶基因是枸杞花器官发育过程中的重要基因。 相似文献
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摘要 目的:探究血清sPLA2-X、8-羟基-2''-脱氧鸟苷及hs-CRP水平诊断慢性阻塞性肺疾病急性加重的价值。方法:随机选取2021年3月~2023年11月在我院进行治疗的COPD患者128例,以患者是否出现急性加重分为稳定组和AECOPD组,其中稳定组29例,AECOPD组99例。比较两组研究对象外周血sPLA2-X、8-OHdG及hs-CRP水平水平差异;COX比例风险因素回归模型分析AECOPD的影响因素,采用ROC曲线分析相关指标单独及联合检测诊断AECOPD的价值。结果:AECOPD组FEV1指标显著低于稳定组,差异具有统计学意义(P<0.05)。与稳定组组相比,AECOPD组患者外周血sPLA2-X、8-OHdG及hs-CRP水平均明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。外周血sPLA2-X、8-OhdG、hs-CRP水平与GOLD分级成正相关(P<0.05),外周血sPLA2-X、8-OhdG、hs-CRP水平与FEV1/FVC(%)、FEV1%pred成负相关(P<0.05)。采用COX比例风险因素回归模型分析,外周血sPLA2-X、8-OhdG、hs-CRP均为影响AECOPD的独立危险因素。ROC曲线分析外周血sPLA2-X、8-OhdG、hs-CRP诊断AECOPD的曲线下面积(AUC)分别为0.689、0.708、0.642、0.875,联合各指标预测价值明显高于单独检测。结论:AECOPD 患者外周血sPLA2-X、8-OhdG、hs-CRP水平高表达。外周血sPLA2-X、8-OhdG、hs-CRP水平与肺功能严重程度、肺功能指标相关,同时三者可用作诊断COPD患者急性加重的潜在预测指标。三者联合具有更高的诊断价值。 相似文献
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王丽娟 《氨基酸和生物资源》1993,(3):29-30
应用日立835—50型氨基酸自动分析仪,对黄芪3种干样品进行了氨基酸成分的分析,结果表明:①必须氨基酸含量由高至低依次为3年、1年、2年。②总氨基酸含量由高至低依次为3年1年、2年。 相似文献
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微卫星DNA及其PCR技术的进展 总被引:11,自引:0,他引:11
王丽娟 《国外医学:分子生物学分册》1996,18(4):169-173
微卫星DNA是一种最常见的重复序列之一,具丰富的多态性,高度杂合性、重组率低等优点,是一种较好的DNA多态标记。本着重介绍了微卫星DNA的特点,其PCR技术新进展及出现的问题。 相似文献