苹果酸-乳酸发酵相关基因克隆及其在酵母中的表达

苹果酸乳酸发酵是不同葡萄酒酿造过程中至关重要的降酸步骤。近20年来,围绕苹果酸乳酸发酵相关基因的克隆以及在酿酒酵母中表达的研究取得了一些进展,就该研究进展和存在的问题进行了综述。此外,也论及了苹果酸-乙醇发酵相关基因的研究,这对于一些不适合苹果酸-乳酸发酵的葡萄酒具有重要意义 。     

桑蚕金属硫蛋白基因在大肠杆菌中的克隆和表达

用\%Bam\%HⅠ和\%Sac\%Ⅰ双酶切质粒pCM1\|1,获得酵母的MTI基因片段,用非放射性地高辛标记作为探针。提取桑蚕肥苏蚕卵的总DNA,分别用\%Eco\%RⅠ、\%Bam\%HⅠ和\%Hin\%dⅢ酶切,与MTI探针进行Southern杂交,出现较强的杂交信号。然后用\%Eco\%RⅠ完全酶切桑吞的总DNA,电洗脱法回收1～6kb的染色体片断,与\%Eco\%RⅠ酶切的M13-载体以3∶1比例连接,转化受体菌DH5α。筛选到4 000多个白色转化子,与探针MTI进行Southern杂交筛选阳性转化子,选择到有强杂交信号的三个转化子［编号为T1(pZHC\|1)\,T5(pZHC\|5)\,T7(pZHC\|7)\]。用12种限制性内切酶对pZHC\|5重组质粒进行酶切分析表明插入片段约12kb,在基因内有一个\%Hin\%dⅢ位点。抗性测定表明受体菌DH5α在含有50mmol/L CuSO\-4的培养基上生长,在含有52mmol/L CuSO\-4的培养基上不生长,而转化子确能在含有52mmol/L CuSO\-4以上的培养基上生长。上述研究结果表明12kb左右的插入片段含有桑吞的金属硫蛋白基因。     

修饰SOD及未修饰SOD的稳定性比较研究

测定了分子修饰ＳＯＤ的酶活力及其在不同温度下的稳定性,与未修饰的ＳＯＤ进行了比较,对在不同温度下测定的结果进行数据处理,经推算得出分子修饰ＳＯＤ在２５℃条件下,保存９５％的酶活力达３．５年,保存９０％的酶活力达７．２年,未修饰ＳＯＤ在２５℃条件下,保存９５％的酶活力为１０３ｄ,保存９０％的酶活力为２１３ｄ。     

金属硫蛋白的研究进展及应用前景

金属硫蛋白（Ｍｃｔａｌｌｏｔｈｅｏｎｅｉｎ,简称ＭＴ）是一类广泛存在于生物体内的低分子量、富含ＣｙＳ、能被金属诱导的金属结合蛋白．自从１９５７年ｈｏｏｓｈｅｓ等人ｔ‘］在马肾脏中首次发现ＭＴ以来,人们对不同来源的ＭＴ进行了较系统的研究．鉴于ＭＴ具有广泛的应用前景,现将有关ＭＴ的研究进展作简要综述．！ＭＴ的分类和命名１．ＩＭＴ的分类根据ＭＴ的结构差异,一般将其分成３类Ｉ’］第１类：ＭＴ的氨基酸序列中的半就氨酸位置与最先从马肾中分离的ＭＴ的氨基酸序列中的半脱氨酸位置紧密相关的多肽．所有哺乳动物的ＭＴ…     

苹果渣发酵生产饲料蛋白的菌种筛选

通过对初选的１００株菌种进行筛选,选到了适合苹果渣发酵的菌种,在此基础上进行双菌种混生发酵,获得了优良的菌种组合。采用所选菌种组合在通过试验所确定的配方和试验条件下进行了发酵,所得产物的粗蛋白含量达到２９.３０％,提高４５.７７％,蛋白质含量达到２７．５６％,提高８２．８８％,粗纤维降低幅度为２３．２７％。试验结果还表明,所选菌种组合有降低棉籽饼中棉酚含量的作用,降低幅度超过９０％。     

麦角固醇高产菌株的构建及其培养优化条件的研究

通过初筛、单倍体分离、诱变及酵母菌种间原生质体融合技术构建了2株麦角固醇产量明显提高的优良菌株YEF-21和YEF-29。并对YEF-21的培养优化条件进行了研究。结果表明在优化的实验条件下YEF-21的生物量及麦角固醇含量的综合值分别为原始亲株YE227和YE180的1.54和1.55倍。经遗传稳定性分析,没有发现标记基因的分离现象,从而证明获得的融合菌株是遗传稳定的,是具有一定实际应用价值的麦角固醇高产菌株。     

酵线菌絮凝的分型及其生理生化特性的研究

通过对４１０余株酵母菌进行絮凝测定,从中筛选到５株强絮凝菌。依据不同糖对其絮凝水平的抑制,将５株强絮凝菌分为Ｆｌｏ１型和ＮｅｗＦｌｏ型。对这两种絮凝型菌株的相关生理生化特性进行了研究。结果表明,Ｆｌｏ１型菌絮凝只受甘露糖抑制,它对高温（７０℃）、蛋白酶Ｅ、胰蛋白酶敏感,而对蛋白酶Ｋ、糜蛋白酶、Ｃａ＾２＋、ｐＨ有一定受性。ＮｅｗＦｌｏ型菌絮凝受甘露糖等多种糖抑制,它对高温（７０℃）、各种蛋白酶、Ｃａ     

两种化学诱变剂对酵母菌的诱变效应

在基因克隆和原生质体融合等新技术的立 用中,首先必须有带不同遗传标记的实验菌株, 因此诱变研究在基础理论研究和生产实践中都 具有重要作用。 国内对酵母菌的诱变研究,主要应用UV, 亚硝酸等物化因子‘2131。关于硫酸二乙醋和N- 甲基一N‘一硝基一N一亚硝基孤对酵母菌的诱变研 究,尚未见报道。本文报道硫酸二乙醋和N一甲 基一N’一硝基一N-亚硝基狐对酵母菌的诱变效应。     

利用枯草杆菌α-淀粉酶分泌载体合成和分泌具有生物活性的鼠β干扰素

经BAL31酶消化除去信号序列的鼠β-干扰素(IFN-β)cDNA,引入到用枯草杆菌α-淀粉酶基因的启动子和信号序列所构造的一个枯草杆菌分泌载体中。把得到的嵌合质粒转移进枯草杆菌207-25中。采用菌落杂交和一种新的、用于分泌蛋白质的免疫印迹方法选出四株卡那霉素抗性转化株。这些转化株把与羊抗-IFN-β血清起交叉 反应的蛋白分泌到培养基中去。用L细胞和水泡性口膜炎病毒系统检测,其中一株表达一种高IFN-β活性,而其它三株表现弱的或没有IFN-β活性。基于我们先前的研究[Ohmura等人,Nucl.Acids Res.12(1984)5307-5319],认为这种分泌的IFN分子是杂种蛋白,在这分子中,NH_2-末端区域由一部分α-淀粉酶信号肽组成。核苷酸序列分析指出:表达高IFN活性的pTUB502质粒是与来自鼠的成熟蛋白质的密码子位置6的IFN-β基因连接。其它三个质粒,pTUB506、pTUB509和pTUB519分别含有来自密码子位置3,1和5的鼠IFN-β基因。鼠IFN-β的NH_2-未端区域似乎与它的生物活性紧密相关。     

免疫反应有限公司拍卖——自倒霉的星期一以来首家生物技术公司公开拍卖

免疫反应有限公司(芝加哥,IL)已注册公开拍卖,这使得它可能是自1987年10月股票下跌以来首家拍卖的生物技术公司。免疫反应有限公司准备拍卖900,000美元,包括一种普通股份和两种认股证书,每种认股证书值1.00美元,由资本股份有限公司(Englewood,Co)发放。本公司与免疫反应殴份有限公司(La.Jola.CA)没有联系。而这家公司正在力图开发一种由Jonas Salk研究出的获得性免疫缺陷综合症疫苗(即艾滋病疫苗)。