建立卫生高级专业技术职称量化评价体系初探

目的 建立卫生高级专业技术职称评审量化评价体系。方法 采用专家咨询法、文献法及键指标法等筛选出有效、可行的评价指标,并计算出每项指标的加权总分值,确定指标权重。结果 应用评审量化评价体系,将2009年度申报高级职称的人员进行量化评分后,推荐通过的情况与申报人量化评分较高的情况呈正相关。结论 初步构建了我院高级专业技术职称评审的量化评价体系,且该体系切实可行、客观公正,有利于发挥职称聘任的积极杠杆作用。

     

维吾尔族不同龋敏感儿童变形链球菌临床分离株表面蛋白V区遗传多态性研究

目的比较维吾尔族高龋和无龋儿童变链菌临床分离株表面蛋白V区遗传多态性与其合成水不溶性葡聚糖的关系。方法选取课题组前期实验所得的维吾尔族高龋儿童合成水不溶性葡聚糖能力较强的变形链球菌临床株18株和无龋儿童合成水不溶性葡聚糖能力较弱临床株12株。提取全菌DNA,经PCR扩增其表面蛋白可变区V区编码基因SrV~+后,利用限制性内切酶DdeⅠ进行限制性片段长度多态性分析。结果经DdeⅠ酶切后,高产糖组变链菌出现了4种基因型,低产糖组出现了3种基因型。这几种基因型在不同产糖组中的分布不同(P0.05)。结论维吾尔族不同龋敏感儿童变形链球菌临床分离株SrV~+基因的遗传多态性可能是其合成水不溶性葡聚糖能力出现差异的因素之一。     

不同水淹下狗牙根-牛鞭草混作对植株生物量的影响

了解狗牙根(Cynodon dactylon)和牛鞭草(Hemarthria altissima)在不同水淹地区较优的种植方式对退化湿地的植被修复具有重要意义。设置4种不同水分条件,即对照组(CK)、水淹与干旱交替组(FD)、土壤表面水淹组(FL)和全淹组(SM),4种不同的植株密度(每盆分别种植1,2,4株或12株)和2种不同的种植方式(单作和混作),研究两物种在不同水淹条件下以不同方式和密度种植时的生物量变化。结果表明,水分、种植密度和种植方式均显著影响两物种的地上生物量和总生物量(P0.05)。CK和FD条件下,以中、高密度混作的狗牙根地上生物量和总生物量与单作相比显著下降(P0.05),牛鞭草在混作方式下的生物量与单作相比有了一定提高,其中在高密度混作情况下其生物量得到显著提高(P0.05)。在FL条件下,与单作相比,中、低密度混作的狗牙根和牛鞭草生物量均具有一定的上升。全淹条件下以中、低密度混作对狗牙根地上生物量和总生物量具有显著的促进作用(P0.05),对牛鞭草无显著差异(P0.05),高密度混作方式则对两物种生物量均无显著影响(P0.05)。随着水淹程度的增加,混作对狗牙根产生的生长抑制影响逐渐减弱。在长期浅水淹的地区,采取中、低密度混作将更有利于牛鞭草和狗牙根的长期共存。在较低海拔的全淹地区,采取高密度的牛鞭草-狗牙根混作方式将是更为理想的选择。     

水位变化对三峡库区消落带落羽杉营养特征的影响

三峡大坝建成蓄水后,其独特的水位调度节律对水库消落带植物的生境造成巨大干扰。为了解落羽杉在消落带特殊生境下的生理生态过程,探究其水淹耐受机制,在三峡库区消落带植被修复忠县示范基地建立3 a后,对试验样地内种植于消落带海拔175—165 m范围的落羽杉进行叶片、根系样品采集,并调查其生长情况,测定分析落羽杉营养元素含量及其与植株生长和土壤养分间的关系。结果表明:(1)水位变化对适生树种落羽杉营养元素吸收造成了明显影响。随着淹水深度和淹水时间的延长,落羽杉根系能量代谢受阻,根系功能紊乱,营养元素吸收与运输受到抑制,落羽杉N、P、K、Ca、Zn吸收减少;水淹导致土壤中Fe~(2+)、Mn~(2+)含量升高,落羽杉Fe、Mn吸收增加。(2)相关性分析表明,落羽杉株高与N、K、Mg含量呈极显著正相关关系,与P含量呈显著正相关关系,而与Fe、Cu含量呈极显著负相关关系,与Mn含量呈显著负相关关系;落羽杉冠幅与植株N、P、K、Mg含量呈极显著正相关关系,而与Fe、Cu含量呈极显著负相关关系;落羽杉营养元素含量与土壤元素含量无显著相关性。(3)消落带不同海拔落羽杉营养元素的积累量均不低于植物正常生长水平,未见严重的缺素状况。研究结果表明,落羽杉对三峡库区消落带水位变化具有很好的适应能力,能够对水位变化做出积极的响应,平衡各元素的积累量,维持植株正常生长。     

油菜裂外壁小孢子胚在分子水平上具有胚体/胚柄分化

早期合子胚取材困难, 难以开展相关研究。前人的工作表明, 油菜(Brassica napus)裂外壁小孢子胚胎发生系统能够较好地模拟合子胚的分化模式, 因而可替代早期合子胚胎作为研究材料。但目前尚缺乏该胚胎发生系统中胚胎具有胚体/胚柄分化的分子水平的证据。该文首次证明了油菜WOX家族基因能够用于标记胚体/胚柄的分化过程, 利用胚柄标记基因BnWOX8的表达模式, 从分子水平上证明了带胚柄的裂外壁小孢子胚的确存在胚体/胚柄的分化。研究结果为充分利用油菜裂外壁小孢子胚胎发生系统, 解决早期胚胎取材困难的问题奠定了坚实的基础。同时, 建立了活体激光切割分离特定细胞的技术, 结合用于少量细胞RNA提取的活体特异细胞RNA提取技术, 为鉴定少量特异分化细胞的基因表达模式提供了一个可行且明确的解决方案。     

油菜愈伤组织中烯丙基硫苷的积累和某些外源碳氮化合物对其含量的影响

油菜愈伤组织在培养中生长34d的增殖量最大,增殖倍数为7．08倍,烯丙基硫苷的含量在第6天最高;外源L-缬氨酸明显促进烯丙基硫苷的积累,其浓度为2和4mmol·L^-1时烯丙基硫苷含量分别达到98．5和97．40mg·g^-1（DW）;蔗糖最有利于油菜愈伤组织的生长和其中烯丙基硫苷的积累,浓度以30g·L^-1。的蔗糖为最佳。     

成都某三甲医院多重耐药菌的临床分布特点及耐药性分析

摘要 目的：探讨我院分离多重耐药菌（MDRO）的临床分布及耐药变化,为临床抗菌药物的合理使用提供依据。方法：回顾性分析我院2019年1月～2019年12月住院患者送检标本分离的病原菌,对MDRO分布及其耐药性进行统计分析。结果：我院住院患者共分离出病原菌4399株,MDRO 459株,MDRO检出率为10.43%。MDRO前5位分别是碳青霉烯类耐药铜绿假单胞菌（CR-PAE,125株,占27.23%）、碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌（CR-ABA,123株,占26.80%）、碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌（CR-KPN,118株,占25.71%）、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA,74株,占16.12%）和碳青霉烯类耐药肠杆科细菌（CRE,13株,占2.83%）。在标本类型上,痰液中MDRO占所有MDRO分离株的60.57%,其次为尿液、肺泡灌洗液、分泌物和血液标本。MDRO分离株占前4位的科室分别为重症医学科、神经外科、康复医学科和干部病房。在耐药性方面,CR-ABA和CR-KPN是我院耐药最严重的菌株。CR-ABA对头孢他啶、头孢曲松和头孢吡肟、氟喹诺酮类药物（环丙沙星）、氨基糖苷类（庆大霉素和妥布霉素）均显示出较高的耐药性,为85.00%以上;对碳青霉烯类药物（亚胺培南）的耐药率在99.00%以上,替加环素对该耐药菌的敏感性较高。CR-KPN对复方新诺明、氨曲南、庆大霉素、喹诺酮类（环丙沙星和左氧氟沙星）、头孢烯类（头孢唑啉、头孢曲松、头孢西丁、头孢吡肟、头孢他啶）、β-内酰胺类与酶抑制剂复合物（氨苄西林/舒巴坦、阿莫西林/克拉维酸和哌拉西林/他唑巴坦）及碳青霉烯类抗菌药物（厄他培南和亚胺培南）的耐药率均在90.00%以上。结论：我院MDRO检出率较高,应加强MDRO耐药性监测,及时向临床医师反馈,建立沟通协作机制,促进合理选用抗菌药物,防止MDRO的感染和蔓延。     

可调控表达人博卡病毒1型非结构蛋白NS1稳定细胞系的建立及其反式转录激活作用初探

人博卡病毒1型(Human bocavirus 1,HBoV1)非结构蛋白NS1是多功能蛋白,对病毒复制有重要作用,同时可诱导宿主细胞凋亡。在研究NS1蛋白功能时,降低NS1蛋白对宿主细胞的毒性作用是急需解决的问题。基于此,文中建立了可调控表达HBoV1非结构蛋白NS1的稳定细胞系。构建NS1重组慢病毒质粒(含可调控启动子),应用转染试剂将NS1重组慢病毒质粒转染至HEK293T细胞。通过嘌呤霉素筛选抗性细胞、多西环素诱导NS1表达,建立可稳定表达NS1-100、NS1-70蛋白的HEK 293T细胞系,利用荧光标记蛋白和Western blotting检测,确定NS1蛋白的表达。并在稳定表达NS1细胞系中转染HBoV1启动子-荧光素酶基因的质粒,分析NS1的反式转录激活活性。结果表明NS1蛋白可在建立的细胞系中稳定表达,且稳定表达NS1蛋白对HBoV1启动子有较强的激活活性,为进一步研究非结构蛋白NS1的功能及人博卡病毒致病机理奠定了良好的基础。     

骨髓脂肪组织调控癌细胞骨转移作用机制研究进展

70%～80%晚期乳腺癌、前列腺癌患者会发生癌细胞骨转移,继而导致骨质疏松等溶骨性或成骨性病症。癌细胞骨转移需要经历四个阶段——定植、休眠、再活化、增殖与侵袭,但骨转移的发生机制尚不完全清楚,相关研究集中在癌细胞与骨微环境的相互作用机制。骨髓脂肪组织(bone marrow adipose tissue,BMAT)是近来的一个研究热点,对循环癌细胞有着高吸引力。BMAT通过旁分泌形式调控癌细胞骨转移,促进其定植、能量代谢等病理生理进程,并通过调控骨吸收与微血管生成间接影响休眠癌细胞的再活化与增殖,促进骨转移"恶性循环"。乳腺癌与前列腺癌在骨转移进程前期具有相似机制,因此该综述以乳腺癌、前列腺癌骨转移为切入点,梳理癌细胞骨转移发生机制,整理归纳BMAT对骨转移的调控机制,旨在为癌细胞骨转移发生机制及临床治疗提供新的思路。     

钩端螺旋体聚Beta羟基丁酸(PHB)生物合成途径分析

【目的】致病型问号钩端螺旋体(问号钩体, Leptospira interrogans)和腐生型双曲钩体(L. biflexa)能够大量合成菌体内贮藏物, 这可能是钩体在营养贫瘠环境中长时间存活的主要原因之一。本研究对钩体聚Beta羟基丁酸(PHB)贮藏物进行定性定量测定, 通过基因组分析补充定义PHB合成主要功能基因, 并采用分子生物学方法初步证明PHB合成途径的完整性, 为进一步研究PHB合成与钩体抗逆能力的关系奠定基础。【方法】采用脂类特异性尼罗红染色法和浓硫酸氧化-紫外分光光度计测定法, 对问号钩体和双曲钩体的PHB贮藏物进行定性定量测定; 采用生物信息学方法(BLAST和InterProscan/InterPro2Go), 通过同源性分析和功能结构域搜索寻找钩体基因组中的PHB合成相关基因; 最后采用克隆测序和定量RT-PCR技术检测相关基因表达情况, 初步验证生物信息学预测结果。【结果】尼罗红染色和氧化后比色定量实验证明钩体合成细菌常见贮藏物PHB, 问号钩体合成量为菌体干重的42%?45%, 双曲钩体合成量为64%?68%。尽管已公布的多个钩体基因组中均没有定义完整的PHB合成途径, 但本研究通过综合生物信息学分析, 在问号钩体和双曲钩体中鉴定了PHB合成途径的主要功能基因(phbC)。克隆测序和定量RT-PCR证实钩体转录表达大部分PHB合成相关基因(phbA/B/C), 说明钩体内该生物途径基本完整, 且部分高水平表达基因可能是钩体主要的PHB合成相关基因。【结论】问号钩体和双曲钩体均可合成PHB贮藏物, 且具有基本完整的PHB合成生物途径。