诱导相温度对毕赤酵母表达重组人复合α干扰素聚合的影响

研究了Pichia pastoris表达重组人复合α干扰素(cIFN)时诱导期温度对cIFN形成聚合体的影响。在5L罐上考察毕赤酵母在不同温度(30、25、20℃)下诱导时菌体生长和cIFN表达的差异,发现毕赤酵母在20℃下菌体生长不受影响,总蛋白表达量有所降低,相当于30℃发酵时胞外总蛋白的67.8%。但是通过非还原性电泳、Native-PAGE及Western blotting分析发现较高温度(30℃)诱导表达时,分泌到胞外的cIFN容易形成聚合体,单体含量很少。诱导相控制温度为20℃时,明显降低了cIFN聚合体的形成,cIFN单体量为570mg/L,发酵上清液抗病毒活性为1.05×109IU/mL。与控制诱导相温度为30℃相比,cIFN单体量提高了7.2倍,发酵上清液中单位体积的cIFN抗病毒活性提高了38.7倍。     

红曲霉发酵生产Monacolin K的研究进展

红曲中的Monacolin K,作为一种抑制胆固醇合成的活性物质,是公认的降低胆固醇的理想药剂,具有高效、低毒、安全的特点.对红曲霉发酵生产Monacolin K的研究进展进行了综述,阐述了Monacolin K的理化性质,对Monacolin K抑制胆固醇合成的作用机理进行了论述,并综述了如何提高Monacolin K含量的途径和检测方法,叙述了毒性物质桔霉素的产生原因和解决方法.     

PICU患儿压力性损伤的临床特征、影响因素及预测模型的构建与评价

摘要 目的：分析儿科重症监护室（PICU）患儿压力性损伤（PI）的临床特征和影响因素,并构建和评价PICU患儿PI预测模型。方法：选取2020年1月～2022年5月我院PICU收治的387例患儿,收集所有PICU患儿临床资料并根据其是否发生PI分为PI组（63例）和非PI组（324）,分析PI患儿临床特征。采用单因素、多因素Logistic回归分析PICU患儿发生PI的影响因素并构建多指标联合应用预测模型,应用受试者工作特征（ROC）曲线分析多指标联合应用预测模型对PICU患儿发生PI的预测价值,采用H-L检验多指标联合应用预测模型的拟合优度。结果：387例PICU患儿PI发生率为16.28％（63/387）,共76处,美国国家压疮咨询委员会（NPUAP）分期以1期为主,其中58.73％（37/63）为黏膜PI,41.27％（26/63）为器械相关PI,64.47％（49/76）发生在头面部,18.42％（14/76）发生在下肢,10.53％（8/76）发生在骶尾部,3.95％（3/76）发生在上肢,2.63％（2/76）发生在躯干。单因素分析显示,PI组心血管疾病、神经系统疾病、昏迷/嗜睡比例和医疗设备数量高于非PI组,入住PICU时间长于非PI组,且Braden-Q量表评分低于非PI组（P＜0.05）。多因素Logistic回归分析显示,心血管疾病、神经系统疾病、昏迷/嗜睡、医疗设备数量增加为PICU患儿发生PI的独立危险因素,Braden-Q量表评分升高为其独立保护因素（P＜0.05）。Braden-Q量表评分与多指标联合应用预测模型的ROC-AUC分别为0.702、0.910,多指标联合应用预测模型的预测效能更高。经H-L检验,多指标联合应用预测模型拟合效果良好。结论：PICU患儿是PI高危人群,NPUAP分期以1期且PI损伤部位多集中于头面部。心血管疾病、神经系统疾病、昏迷/嗜睡、医疗设备数量、Braden-Q量表评分是PICU患儿PI的影响因素,根据以上影响因素构建的PICU患儿PI多指标联合应用预测模型,拟合效果良好、预测价值较高。     

中华鳖boule基因在生殖细胞中的表达分析

boule基因为DAZ基因家族成员之一,是动物生殖细胞特异表达基因。在哺乳动物中,boule基因的缺失会引起精子生成障碍而导致雄性不育。在无脊椎动物秀丽线虫(Caenorhabditis elegans)中,boule基因同源物的缺失会引起其卵子发生障碍而导致雌性不育。龟鳖动物是最古老的爬行类,是从无羊膜卵到羊膜卵动物飞跃的过渡物种。相比于哺乳类及一些无脊椎动物,目前关于龟鳖动物生殖细胞发育模式的研究还非常有限。因此,本文以中华鳖(Pelodiscus sinensis)为研究对象,以期揭示boule基因对龟鳖动物生殖细胞发育分化的调控作用。首先,利用特异引物克隆获得中华鳖boule基因的cDNA序列,共1 005 bp,其中,3′端非编码区57 bp,开放阅读框948 bp,共编码315个氨基酸。氨基酸序列多重比对分析显示,中华鳖与绿海龟(Chelonia mydas)同源性最高,达92%,与小鼠(Mus musculus)的同源性达83%,与果蝇(Drosophila melanogaster)的同源性达53%,与青鳉(Oryzias latipes)的同源性达42%。反转录实时定量PCR(RT-qPCR)分析结果显示,中华鳖boulem RNA主要在性腺组织精巢和卵巢中表达,而在其他体细胞组织中几乎检测不到表达。原位杂交结果显示,中华鳖boule m RNA在两性生殖细胞中特异表达,且在不同分化时期的生殖细胞中呈动态表达。在精巢中,boule m RNA在初级精母细胞中表达最强,在精原细胞和次级精母细胞中表达较弱,在精子细胞和精子中难以检测到表达信号;在卵巢中,boule mRNA在初级卵母细胞中表达信号最强且信号在初级卵母细胞胞质中均匀分布,生殖细胞发育进入卵母细胞生长期后,信号开始聚集在核周胞质,随着卵母细胞的成熟,信号逐渐变弱。本研究结果表明,boule基因可能在中华鳖两性生殖细胞的减数分裂过程中均具有重要的调控作用。     

应用于二维电泳细胞蛋白质样品提取的复合蛋白酶抑制剂的优化

阿维链霉菌在复合培养基中生长时合成大量蛋白酶以满足菌体分解有机氮源进行生长代谢的需要。而大量蛋白酶的存在对二维电泳的蛋白质组分析细胞蛋白质样品的提取带来了很大的困难。根据阿维链霉菌胞内蛋白酶的组成,以EDTA、PMSF、Bestatin、Pepstatin和E-64等5种蛋白酶抑制剂为基础,通过单因子实验和正交实验优化得到了高效的蛋白酶抑制剂复合配方。验证实验表明,该复合蛋白酶抑制剂在阿维链霉菌细胞蛋白质样品提取中,具有良好的蛋白酶活性抑制效果。     

食蚜蝇科卵壳超微形态初探

本文应用扫描电镜研究了24种食蚜蝇(双翅目,食蚜蝇科)卵壳的超微形态.描述了所研究种类卵的形态并编列了检索表.研究结果表明卵的受精孔形态是和卵壳花纹同等重要的分类特征.文中讨论了受精孔形态和卵表花纹在食蚜蝇卵分类中的重要性以及造成卵壳背、腹面花纹差异的原因.