稳定表达非洲猪瘟病毒P54蛋白的Vero细胞系的建立

旨为建立稳定表达非洲猪瘟病毒(ASFV)P54蛋白的Vero细胞系,将ASFV-P54基因与绿色荧光基因Azami Green的融合基因片段,将其克隆至慢病毒载体pLV-puro中构建重组慢病毒质粒pLV-ASFV-P54-AG,将该质粒与慢病毒包装质粒pH1和pH2共转染HEK-293V细胞,包装表达ASFV-P54蛋白的慢病毒。将重组慢病毒在聚凝胺(Polybrene)的介导下感染Vero细胞,筛选出一株稳定表达ASFV-P54蛋白的Vero细胞系,命名为Vero-AG-ASFV-P54。间接免疫荧光试验表明,该细胞系能够与P54多克隆抗体反应;经波兰国家兽医研究所进一步验证,结果显示,该细胞系与ASFV抗体阳性血清也能发生反应,并且与阴性血清无反应。结果表明,Vero-AG-ASFV-P54细胞系能够稳定高效的表达具有生物活性的ASFV-P54蛋白。     

中国陆栖蚯蚓各属的分类特征

全世界陆栖蚯蚓有12科、181属、1800多种(1977年统计)。我国有7科、22属、178种与15个亚种。 链胃科 Moniligastridae共5属。我国产2属16种与亚种。 巨蚓科Megascolecidae共20属。我国产7属149种与亚种。 寒(虫宪)科 Ocnerodrilidae 共21属。我国产3属3种。     

小果青钱柳的分类地位

<正> 钟补求教授于1936年根据采自安徽黄山的模式标本而发表小果青钱柳Pterocarya mi-cropaliurus Tsoong新种时指出,该种与青钱柳的主要区别在于:(1)果实(包括果翅)较小,直径不超过2.5匣米,而在青钱柳则为3—7匣米;(2)果序较短,长约为青钱柳之半;(3)小叶数目较多,通常9—11枚,且较青钱柳为狭小;(4)小叶的锯齿较密较尖,最大的小叶通常每边有60个以上的锯齿,而在青钱柳则通常不到40个。但根据《中国植物志》第二十一卷(以下简称《植物志》),小果青钱柳应为青钱柳Cyclocarya paliurus(Batal.)Iljinsk.的异名。该《植物志》写道:“本种的小叶大小及数目、果翅的形状及大小变异极大,某些极端类型看来好象可以划分成各别的种,但都存在有中间类型,并且也无一定的地理分布限定,因此它必然是一个自然的种”。为此,我们对有关的腊叶材料进行了     

微创踝关节融合术治疗老年创伤性踝关节炎中的临床效果及对患者氧化损伤与骨代谢的影响

目的:研究微创踝关节融合术治疗老年创伤性踝关节炎中的临床效果及对患者氧化损伤与骨代谢的影响。方法:收集2014年3月至2015年3月我院收治的94例老年创伤性踝关节炎患者,按随机数表法分为实验组和对照组,每组各45例。两组患者在手术前均进行常规检查,对照组采用常规开放式踝关节融合术,实验组采用微创踝关节融合术。对比两组治疗后血清氧化损伤指标肌红蛋白(MYO)、缺血修饰白蛋白(IMA)、总抗氧化能力(TAC)、丙二醛(MDA)水平,骨代谢指标碱性磷酸酶(ALP)、酸性磷酸酶(ACP)、甲状旁腺素(PTH)、骨钙素(BGP)、降钙素(CT)水平,视觉疼痛模拟评分(VAS)、美国矫形外科足踝协会(AOFAS)评分及不良反应的发生情况。结果:治疗后,实验组血清MYO、IMA、MDA水平显著低于对照组[(20.48±2.59)ng/mL vs.(27.07±2.97)ng/m L,(65.68±8.20)U/L vs.(74.27±9.01)U/L,(5.01±1.03)nmol/L vs.(9.64±2.17)nmol/L](P0.05),血清TAC水平显著高于对照组[(11.40±2.50)kU/L vs.(7.36±1.03)kU/L](P0.05);血清ALP、BGP、CT水平均显著高于对照组[(103.28±12.47)U/L vs.(90.53±10.02)U/L,(11.08±1.42)ng/L vs.(8.01±1.23)ng/L,(61.39±5.87)ng/L vs.(50.28±4.92)ng/L](P0.05),ACP、PTH水平均显著低于对照组[(5.21±0.60)U/L vs.(8.03±0.92)U/L,(42.95±5.38)ng/L vs.(60.49±6.92)ng/L](P0.05);VAS评分显著低于对照组[(1.06±0.23)分vs.(3.79±0.67)分](P0.05),AOFAS评分显著高于对照组[(73.02±6.28)分vs.(65.58±5.13)分](P0.05);不良反应总发生率显著低于对照组[6.66%(3/45) vs. 20.41%(10/49)](P0.05)。结论:微创踝关节融合术可调节老年创伤性踝关节炎患者的骨代谢,增强骨密度,减少术后不良反应,有利于改善患者预后。     

松树蜂形态及危害特点的研究

在发生松树蜂的林场利用"五点取样法"进行调查,调查样方内树木种类、胸径大小、生长情况、蛀干害虫种类和在树干上的分布情况;同时,选取虫害木,解剖并统计不同蛀干害虫的羽化孔数量和特点,幼虫钻蛀特征和危害特点;研究松树蜂自然种群的寄主选择规律和垂直分布特点。结果表明,松树蜂在我国仅危害衰弱的樟子松,30-40年生的中龄林受害最严重,平均有虫株率为10.94%±8.67%。松树蜂产卵后的树皮表面有流树脂现象,呈点状或流泪状。同松幽天牛和吉丁危害状不同,松树蜂羽化孔呈正圆形,直径大小约为7 mm,分布在树干0-4.20 m的高度,其中90%的集中分布在0-3 m范围内。松树蜂幼虫坑道横截面为正圆形,无排粪孔,虫粪和蛀屑都呈粉末状,紧实堆满蛀道,颜色和蛀道周围颜色无明显差异。     

不同种质资源蛹虫草菌丝生长特性及其多糖产量的研究

研究本试验中6株不同来源的蛹虫草菌株(150707,150715,150725,150808,52244,51762)的菌丝生长特性及其多糖产量。测定这6株蛹虫草菌丝生长速度、分生孢子产量,利用水提醇沉法提取不同菌株粗多糖。研究发现在不同培养基上不同来源的这6株蛹虫草菌丝生长速度、产分生孢子量、多糖得率不同,在加富PDA培养基上生长速度较快,但是在血平板培养基上孢子产量及多糖得率较优。分析得出150707、52244两个菌株孢子产量和多糖产量相对较高,为优势菌株,血平板培养基为蛹虫草孢子及多糖产量较优培养基。     

花生侵脉新赤壳菌果腐病生防芽孢杆菌的分离鉴定及防病效果

【目的】为了分离鉴定对花生侵脉新赤壳菌果腐病病原菌Neocosmospora vasinfecta具有抑制作用的根际芽孢杆菌。【方法】利用平板稀释法从花生的根际土壤分离芽孢杆菌,再采用平板对峙法筛选出对N.vasinfecta具有抑制作用的根际芽孢杆菌,通过形态观察、生理生化特性和分子生物学相结合的多相分类方法对生防根际芽孢杆菌进行分类鉴定,检测脂肽类抗生素合成基因类型,并进行花生侵脉新赤壳菌果腐病的田间防治试验。【结果】从花生根际土壤中分离到28株芽孢杆菌,其中对花生果腐病病原菌具有明显抑制作用有8株。多相分类法结果显示2株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),6株为解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens)。脂肽类抗生素合成基因检测显示,8株生防芽孢杆菌含有至少1种脂肽类抗生素,其中所有生防菌均含有丰原素B合成基因,推测这些芽孢杆菌对N.vasinfecta的抑制机制可能与脂肽类抗生素的合成相关。田间防病实验结果显示,B.amyloliquefaciens GF-3和GF-22制备的生物有机肥均能有效降低NPRP的发病指数,其防治效率分别为32.35%和79.41%,增产率分别为19.12%和25.85%。【结论】分离鉴定了2株对花生侵脉新赤壳菌果腐病具有明显防治效果的根际芽孢杆菌,这不仅为花生侵脉新赤壳菌果腐病的生防制剂研制提供了菌株,还为研究防治机理奠定了基础。     

大麦TILLING群体的构建及EDR1基因突变的检测

该研究选用栽培大麦品种‘西引2号’,通过化学诱变剂甲基磺酸乙酯（ethyl methane sulfonate, EMS）处理,创建了3 750个 M₁及2 012个 M₂突变株系。结果表明：在M₂中,有115株表现黄化,98株表现矮化,101株表现极早或极晚抽穗,其他35株表现分蘖少、叶片小或者不育等性状,所有突变株系占M₂群体的17.35%;M₂的基因组DNA用于突变频率的研究,用优化的CELⅠ酶切体系对M₂株系进行了EDR1基因突变体筛选,获得了EDR1基因的3个突变体,其中一个发生在外显子区域,导致了氨基酸Pro到Ser的转换,突变频率平均为每661 kb一个点突变,这与前人研究的突变频率基本在一个范围内。该研究创建了大麦品种‘西引2号’的TILLING筛选群体,并用于EDR1突变体的筛选。为大麦性状研究提供了不同的思路,搭建了新的资源和技术平台。     

β-环糊精及其衍生物对薄荷醇的增溶作用及热力学研究

采用相容解度法研究β-环糊精及其衍生物羟丙基-β-环糊精与薄荷醇的包合作用、增溶作用,考察不同环糊精与薄荷醇包合反应的热力学参数,探讨包合过程的机理和驱动力。研究结果表明,不同环糊精与薄荷醇包合反应的吉布斯自由能、焓和熵均小于零,说明包合过程为放热反应,较低温有利于形成包合物,与β-环糊精相比,羟丙基-β-环糊精对薄荷醇的包合作用更好,且与薄荷醇形成的包合物的溶解度更大。