发展中的DNA测序技术

发展中的ＤＮＡ测序技术赵晓娟刘金毅综述蔡有余琦祖和＊审校（中国医学科学院中国协和医科大学实验动物研究所北京）ＤＮＡ序列分析是基因工程和分子生物学领域最重要的技术之一,是了解基因结构和功能的基础。“人类基因组计划”（ｈｕｍａｎｇｅｎｏｍｅｐｒｏｊｅｃｔ）的实施,有力地推动了高速ＤＮＡ测序技术的发展。除经典的测序方法在技术环节上的不断改进外,近年来发展了一些全新的ＤＮＡ测序方法,如毛细管凝胶电泳...     

西安地区汉族人群中HLA抗原的分布

近年来,有关人类白细胞抗原（HLA）的 研究进展迅速,因本抗原分布有明显的人种、民 族和地区的差异,其它地区人群HLA 的分布 调查先后已有不少报道,但位于西北门户的西 安地区尚未见报道,为此,我们对西安地区汉族 人群中HLA抗原的分布进行了调查,现报告 如下：     

先天性骨-肾畸形综合征小鼠(KM-ld)致病基因1d的染色体定位

对KM－1d小鼠的致病基因ld进行染色体定位。采用异构蛋白及同功酶电泳技术和体外扩增技术对同源导入近交系小鼠C57BL／6·KM－1d20对染色体上的14个生化标记基因位点和61个SSLP位点进行筛选,发现ld基因与2号染色体上的D2Mit30、D2Mit62和D2Mit633个SSLP位点连锁,从而把ld基因初步定位于2号染色体。为进一步对ld基因准确定位,培育了86只（C57BL／6×KM－ld）F1×KM－ld回交后代小鼠用于连锁分析。体外扩增所有回交后代的D2Mit13、D2Mit30、D2Mit62和D2Mit634个SSLP位点,结合表型,分析与ld基因的连锁关系,通过计算遗传距离,将ld基因具体定位于2号染色体上76cM处,距D2Mit30、D2Mit62和D2Mit6325．58cM,距D2Mit1331．39cM。     

大苞红唇益智选育研究

采用杂交育种和系统选育技术,利用良姜亚属的益智(Alpinia oxyphylla Miq.)作母本,艳山姜亚属的小草蔻(Alpinia henryi K．Schum．)作父本,进行远缘杂交,经多年多代分离、筛选和鉴定,从其杂交后代中选育出姜科花卉新品种大苞红唇益智。该品种综合园艺性状优良,主要表现为具有较强的丛生性,花序直立,花大艳丽,唇瓣红色,赏花期长,适应性广。适合于园林布置或生产切花用。     

仿爱夜蛾成虫在莫高窟模拟壁画表面的运动行为及其损害机理

【目的】探明莫高窟优势病害昆虫仿爱夜蛾Apopestes spectrum (Esper)成虫在模拟壁画表面的运动行为,以揭示壁画损坏过程及其机理。【方法】本研究依据古代敦煌壁画制作工艺制作模拟壁画。利用扫描电镜观察了仿爱夜蛾成虫爬行足跗节的微观形态,定量分析了成虫翅面鳞粉量及其对壁画的污染程度,观测动物运动行为并系统记录了病害昆虫在90°模拟壁画表面的运动行为特征,分析了仿爱夜蛾成虫运动参数与模拟壁画表面粗糙度间的关系。【结果】仿爱夜蛾成虫主要依靠胸足的侧爪、中垫、掣爪片和微刺的协调作用在壁画表面黏附和爬行,在90°模拟壁画表面依然具有很强的爬行能力。仿爱夜蛾成虫通过调整步态实现在不同粗糙度表面的稳定爬行,壁画粗糙度决定了其是否需要扇动翅膀,以增大在垂直壁画表面稳定爬行的前进动力。【结论】仿爱夜蛾成虫爬行时的爪部接触冲击和拍翅行为均易造成壁画损坏,对于带有起甲、酥碱等病害的脆弱质壁画危害的风险更大。     

对执行护航任务舰艇官兵的情绪研究

目的:近年来,随着执行护航任务的日趋常态化,舰艇官兵要面临一系列的身心考验,可能会出现一定的情绪问题。本文的目的是为了更清楚的了解护航任务期间官兵的情绪变化和情绪问题,以便更好为官兵服务。方法:本文通过使用SAS、SDS及POMS量表对执行护航的舰艇官兵情绪进行跟踪研究。结果:结果表明,执行任务官兵的焦虑、抑郁体验及心境纷乱程度得分均显著高于军人常模,从时间变量来看,护航焦虑体验最高的是护航初期,抑郁体验最高的是护航中期,护航后期的心境纷乱程度最低。结论:护航任务官兵焦虑、抑郁情绪明显,心境状态受任务影响显著,并且随任务执行的时间,在任务的不同阶段存在不同的表现。     

集成干扰素突变体Ⅱ的分子构建、表达及提纯

目的：通过定点突变,构建集成干扰素突变体Ⅱ（IFN-Con-m2）,以期获得兼具高效作用和可定点聚乙二醇（PEG）修饰的新型药物分子。 方法：采用PCR体外定点突变技术,使集成干扰素突变体Ⅰ（IFN-Con-m1）基因的第86位密码子由TAC突变为TGC。将扩增片段克隆入pET-23b表达载体,重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）。IPTG诱导后,表达的IFN-Con-m2经包含体变复性、疏水层析、DEAE层析和凝胶过滤层析等纯化后,用WISH-VSV系统进行生物活性测定。 结果：IFN-Con-m2以包涵体形式表达,表达量占菌体总蛋白的30%以上。纯化后,IFN-Con-m2的纯度大于95%,比活性大于5.0×108IU/mg。 结论：构建了IFN-Con-m2的表达载体,并成功地在大肠杆菌中表达,获得了高活性突变分子IFN-Con-m2,建立了IFN-Con-m2的纯化工艺。     

amiRNAi-实现高效稳定的特异基因沉默新方法

RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)是实现基因沉默的有效工具。近年来,随着分子生物学与生物技术的快速发展,在RNAi基础上又发展出另一种特异性更高的基因沉默技术—amiRNAi (artificial microRNA interference)。amiRNAs是一类由内源miRNA前体生成的长21个核苷酸的人工小RNA分子,它能在不影响其他基因表达的情况下特异地介导单个或多个靶基因高效稳定沉默。与普通的RNAi相比,amiRNAi具有特异性高、稳定性强和沉默效应可预见等优点。因而amiRNAi可能成为基因功能分析的最有效工具之一,同时amiRNAi对于基因负调控研究和应用而言前景广阔。着重介绍了amiRNAi技术的原理、优势及其潜在的应用价值。     

新型集成干扰素-人血清白蛋白融合蛋白在毕赤酵母中的分泌表达和纯化

将含编码HSA天然信号肽、HSA和新型集成干扰素(NIFN)的融合基因,插入毕赤酵母表达载体pPIC3.5,转染毕赤酵母GS115,用于分泌表达融合蛋白HSA-NIFN的酵母工程菌。诱导表达后,产物经SDS-PAGE、Western blot和MALDI-TOF-MS分析表明该蛋白分子量为86369Da,且能被抗HSA单抗特异性结合;表达的HSA-NIFN经超滤、Blue亲和层析和CM阳离子交换层析纯化后,HSA-NIFN的纯度大于95%。用细胞病变抑制法测定其比活性为7.75±0.39×106IU/mg。