表达昆虫特异性神经毒素AaIT基因的转基因烟草的抗虫性

经改造的昆虫特异性神经毒素AaIT基因插入植物高效表达载体得到重组质粒pNGY-2。重组质粒中AaIT基因5＇端与烟草花叶病毒(TMV)的Ω序列3＇端融合,受两个串联的35S启动子控制,通过土壤农杆菌LBA4404介导转化烟草NC89,经NPTⅡ选择后再经GUS染色挑选出阳性再生植株,Southern blotting进一步证实了AaIT基因已经整合到烟草基因组中,对棉铃虫(Heliothis armigera)的抗虫实验表明,转基因烟草有显著的抗虫活性。     

疏肝补肾法对疲劳大鼠的学习和记忆力之影响

目的:探讨疏肝补肾法对疲劳大鼠学习和记忆力及对海马CA1区神经颗粒素(Neurogranin,Ng)的mRNA表达变化的影响。方法:成年雄性Spargue-Dawley大鼠36只,随机分为模型组(MG)、对照组(CG)、和疏肝补肾组(LK)。采用复合模型:运动疲劳模型与睡眠剥夺法造疲劳大鼠模型。运用Y迷宫进行学习和记忆力的测试。以Real-timePCR技术分析海马CA1区神经颗粒素的mRNA表达。结果:Y迷宫实验显示用药后大鼠的学习和记忆能力优于模型组,而疏肝补肾组大鼠在正确反应率、错误反应次数、达标所需训练次数和总反应时间皆与模型组有差异(分别为P<0.01、P<0.01、P<0.05和P<0.05),其NgmRNA在海马CA1区的表达也显着高于模型组(P<0.01)。结论:复合模型会造成大鼠学习和记忆能力受损。疏肝补肾法能显着影响疲劳大鼠的学习记忆能力及海马CA1区Ng的mRNA表达。     

来源于酸热脂环酸杆菌的嗜酸性α-淀粉酶的表达研究

从嗜酸耐热的酸热脂环酸杆菌Alicyclobacillusacidocaldarius中克隆到α_淀粉酶的基因 (amy) ,该基因全长 390 3bp ,编码130 1个氨基酸 ,理论分子量约 140kD。将基因amy分别克隆到大肠杆菌E .coli表达载体pET-2.2b(+)和毕赤酵母P .pastoris表达载体pPIC9α ,并在大肠杆菌和毕赤酵母中得到了表达 ,表达产物具有淀粉酶的活性。对酵母中表达的酶蛋白AMY进行了纯化 ,并初步研究了它的酶学性质 ,它的作用最适pH3.2 ,在pH 2.5～4.6范围内 ,酶活性保留 50%以上 ,它的最适温度65℃ ,在 70℃下处理 30min ,酶活性维持50%以上 ,基本保留了天然酶蛋白的耐热性和嗜酸性。位于基因amy内部 +1174～+3288bp的基因片段amy′全长 2115bp ,编码705个氨基酸 ,在E .coli表达后依然具有淀粉酶的活性。     

弗氏链霉菌丝氨酸蛋白酶基因的克隆及表达

从一株具有极强的降解羽毛能力的弗氏链霉菌菌株（Streptomyces fradiae var.k11）中纯化得到了一种丝氨酸蛋白酶SFP2。经蛋白测序,得到部分氨基酸序列,设计简并引物,PCR扩增得到部分基因序列,通过构建基因文库,获得了包括信号肽序列在内的完整的基因sfp2(EMBL收录号AJ784940),开放阅读框全长924bp,包括114bp的信号肽编码序列和810bp的酶原编码序列, 其中成熟蛋白编码基因长576bp,编码191个氨基酸,理论分子量为19.112kD。酶原编码基因和成熟蛋白编码基因均在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中得到了表达,酶原编码基因表达产物具有正常的生物学活性,证明了克隆基因的生物学功能。     

亮白曲霉乳糖酶基因在毕赤酵母中的高效分泌表达及酶学性质研究

将克隆的亮白曲霉 (Aspergilluscandidus)乳糖酶基因lacb′插入到毕赤酵母 (Pichiapastoris)高效表达载体pPIC9中 ,与分泌信号肽序列α_因子融合 ,通过同源重组将lacb′整合到酵母染色体上。通过SDS_PAGE检测和表达产物的酶活性筛选 ,得到重组转化子 ,证明乳糖酶获得有效分泌和高效表达。表达的乳糖酶为糖蛋白 ,表观分子量为 130kD ,脱糖基后的蛋白分子量下降为 110kD。经过 5L小罐高密度发酵 ,重组酵母中酶蛋白表达量为 6mg mL发酵液 ,每毫升发酵液中乳糖酶的活力为 36 0 0U ,高于目前国内外报道的水平。进一步研究了表达产物的酶学性质 ,该酶最适pH为 5 . 2 ,最适反应温度 6 0℃ ,比活性为 70 6 . 5± 2 . 6U mg ,Km为 1 7mmol L ,Vmax为 3. 3μmol min。与米曲霉ATCC 2 0 4 2 3的乳糖酶相比 ,该乳糖酶具热稳定性强、比活性高、pH范围宽等特点。     

BCL-2、Ki-67、Cyclin D1在弥漫性大B细胞淋巴瘤中表达的临床意义

目的 探讨BCL-2、Ki-67、Cyclin D1蛋白在弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中表达的临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测CLBCL病例中BCL-2、Ki-67、Cyclin D1蛋白的表达,分析它们的表达与DLBCL临床特征、治疗效果及生存期的关系。结果BCL2、Ki-67、Cyclin D1蛋白在DLBCL中表达阳性率分别为48．3％、58．3％、37．9％,它们的表达之间没有相关性;BCL-2、Ki-67、Cyclin D1蛋白在DL3(2I。中的表达与患者的年龄、性别无关,与DLBCL的临床分期、疗效及预后有关,即临床分期为Ⅲ／Ⅳ期、疗效差组上述蛋白表达的阳性率较高;BCL-2、Cyclin D1蛋白在有全身症状的DLBCL患者组中的表达阳性率高于无全身症状组;而Ki-67表达在DLBCL患者中与出现全身症状有无无关。结论BCL-2、Ki-67、Cyclin D1在DLBCL中的表达与DLBCL的临床特征、治疗效果及预后有关;BCL-2、Ki-67、Cyclin D1蛋白的检测可以作为DLBCL患者的不良临床特征、治疗效果及不良预后的指标。     

世界性的“昆虫生理学杂志”创刊

昆虫生理学在最近十数年来发展很快,但是至今没有一本昆虫生理学的专门杂志,所以关于昆虫生理学的专门论文分散刊载在生物、医学、农业以及化学等的各种专门杂志中,读者搜集极感不便。“昆虫生理学杂志”(Journal of Insect Physiology)创刊的目的就是想把世界各国昆虫生理学方面的专门论文集中在一个杂志中,同时也包括陆棲节肢动物的其他类群的生理学论文,以利昆虫生理学的发展。该志将发表有助于解决昆虫生理问题的生物化学、毒理学、形态学的机能以及新方法与技术的创造性论文,同时也刊登对于了解昆虫生理学一般原则的文稿。     

貯藏物昆虫学的发展及其近年来研究情况（续）

(三)米蟓的系问题1944年英国 O.W.Richards 氏发见米蟓(Sitophilus oryzae L.)有大小差异很大的二种,最初认为系由于其食物不同所发生的变异,即大的米蟓常发生于玉米中,而小的常发生在小麦(Plate wheat)中。但是试验结果,认为虽然小麦种类对米蟓大小有若干影响,但是其变异的主要原因是由于系(Strains)的存在,其中一     

利用原子能的最新害虫防治法

原子能在昆虫学研究上的利用,到现在为止已知的约有四种:第一种是利用示踪原子来研究农作物害虫的传播速度和范围,就是配制含有一定化学元素的放射性同位素的物质溶液,注入受害虫为害的植物中,或注入害虫体躯中,然后再用专门的示踪害虫计数器来计算此种害虫的传播范围,以确定防治的区域与方法。     

貯藏物螨类标本的采集与制作

貯藏物螨类是貯藏物害虫的一个重要构成部分,由于近十余来蜱螨学(acarology)的发展,对于貯藏物螨类的研究也进行很多。笔者近年来曾对各国貯藏物螨类方面文献进行搜集,1959年起与上海粮食油脂公司科学研究所合作进行上海地区貯粮螨类的普查工作,以期了解貯粮螨类的重要种类、分布密度以及季节消长等情况,提供设计防治的基本资料。据近年来在上海地区普查结果,貯粮的螨类,分属于3个亚目,8个科。今年又对中药、干果以及食糖等貯藏物品进行螨类的调查,也发现很多种类,而如食糖中的甜果螨(Carpoglyphus lactis Linné)除在食糖中普遍存在外,在黑枣、红枣以及蜜饯中也大量存在,引起严重的螨病。