兔多杀性巴氏杆菌C51-3株黏附蛋白的表达、纯化及其抗原性检测

应用PCR从兔多杀性巴氏杆菌C51-3株基因组DNA中扩增出编码36 kD黏附蛋白的cp36基因, 将其克隆到pMD18-T载体并对插入片段进行测序。以重组质粒pMD18-cp36为模板, 用PCR扩增得到编码信号肽除外的成熟黏附蛋白基因cpm36, 并克隆到原核表达质粒pQE30中, 得到重组质粒pQE30-cpm36, 转化大肠杆菌M15, 在IPTG诱导下表达融合蛋白CPM36, 经Ni2+-NTA亲和层析纯化。DNA测序结果表明cp36基因片段大小为1032 bp, 与已报道的16个血清型多杀性巴氏杆菌cp36基因的核苷酸序列比较, 同源性在76.9%~100%之间。SDS-PAGE结果显示, 表达分子量约为37 kD的带有6×His标签的CPM36蛋白, 与预期分子量相符。Western blotting结果表明, 抗重组蛋白抗体分别能与CPM36蛋白和多杀性巴氏杆菌36 kD蛋白发生特异性反应, 证明原核表达蛋白具有抗原性, 为进一步开展多杀性巴氏杆菌免疫保护性抗原的研究奠定了基础。     

苦楝不同部位挥发油成分的气相色谱-质谱分析

采用水蒸气蒸馏法对苦楝的叶、树皮和果皮的挥发油进行提取,用气相色谱--质谱联用技术对挥发性成分进行分析,共鉴定了70个化合物.组成成分分析结果表明,苦楝叶以倍半萜类化合物Elixene(22.53%)、石竹烯(10.75%)和醇类化合物叶绿醇(10.27%)、斯巴醇(5.73%)等为主;苦楝树皮中以饱和烷烃3,8-二甲基十一烷(9.25%)、4,6-二甲基十二烷(9.13%)、十七烷(6.88%)和3-乙基-3-甲基庚烷(5.94%)等为主;果皮中以棕榈酸(27.65%)、己酸(6.94%)、油酸甲酯(5.47%)、肉豆蔻酸(5.00%)和醇类化合物3,7,11,15-四甲基-2-十六烷醇(11.28%)、叶绿醇(4.78%)等为主.这一结果说明苦楝不同部位的挥发性成分相差较大,在综合开发利用苦楝时应分部位加以提取利用.     

唐古特白刺果实花色苷体外清除自由基的活性

为探讨唐古特白刺(Nitraria tangutorun Bobr.)果实花色苷体外清除自由基活性,研究了其对超氧阴离子(O-2·)体系、羟基自由基(·OH)体系和二苯代苦味酰基自由基(DPPH·)体系的清除效果,并与抗坏血酸(vc)进行了比较.结果表明,该花色苷对O-2·、·OH、DPPH·均具有清除作用,且与浓度呈量效关系.对·OH和DPPH·清除效果相对较好,优于Vc.     

中华鲟染色体组型的研究

材料和方法 试验鱼于1983年冬天和1984年春天取自湖北省武汉市市场(长江水系),二雌一雄,体长为2.0—3.2米,体重为99—220公斤。取肾脏组织在无菌的条件下用PBS溶液进行多次洗涤后,用剪刀剪成小块,再用0.02％胰蛋白酶消化15分钟,离心分离肾细胞,进行短期培养,用0.075M氯化钾溶液低渗处理,气干法制片,吉姆萨染色。在油镜下观察、计数、确定染色体数目。然后选择分散好、形态清晰的中期分裂相做显微镜照相,将标准的中期分裂相剪下,按同源染色体配对、测量,并用统计学方法计算其臂比和相对长度。根据Levan等(1964)提出的按着丝点的位置进行染色体的命名和分类。     

用化学方法将两种细菌引入小麦根部皮层细胞的报告

向植物细胞内引入微生物是生物工程技术内容之一。目前,用基因工程技术把微生物的遗传信息通过转化方法直接引入植物细胞内,期望获得植物固氮、产生某些新的重要活性物质,以及植物的抗逆、抗病、抗虫害等新功能的工作,都未获得肯定结果。     

失重对生物有机体的影响

第二次世界大战期間,馮·德林休芬(Von Deringshofen)經受了由飞机俯冲后拉起再进入第二次俯冲时产生的失重,他认为这是一件很愉快的事。随着火箭技术的飞速发展,使人类几千年的梦想——飞向宇宙就要成为現实。失重会不会成为宇宙飞行的障碍呢?这一人們从未研究过的課題摆在我們面前。从1949年人类第一次把动物(狗、猴子、白鼠)用火箭发射到高室,研究失重对动物的影响以后,失重的生物学研究开始有了进一步的发展,但由于制成失重条件的限制(主要是火箭技术),絕大多数工作集中在苏联和美国,其他如意大利、法国等也做了一些工作,尤其是苏联取得的成就最大。虽然只有13年的时間,失重的研究由动物进而以人作为实驗对象,由研究几分钟的     

松科植物属间C值和种子千粒重与进化关系初探

在检索C值数据库和种子数据库的基础上,对松科具有完整C值和种子千粒重等数据信息的5个属108种植物进行统计分析,并利用线性回归模型分析了二者之间相关性。结果显示,松科植物C值从9.5~36 pg呈正态分布,种子千粒重从1.2~1 269 g呈偏态分布,种间千粒重相差悬殊,高达1058倍。ANOVA分析表明,松属C值平均为25.79 pg,显著高于其它4个属;落叶松属C值最低（12.53 pg),显著低于云杉属（18.44 pg）,而云杉属、冷杉属和雪松属C值间却无显著性差异。结合前人研究结果,从C值的角度分析,松科5属间的演化顺序为：松属→云杉属→雪松属→冷杉属→落叶松属。松科5属间种子千粒重均值差异显著,松属种子均值最大（123.7 g）,其次为雪松属（84.5 g）和冷杉属（26.4 g）,最后为落叶松属（5.5 g)和云杉属(3.9 g)。除松属外,其它4个属ANOVA分析,雪松属种子千粒重显著高于云杉属、冷杉属和落叶松属（P<0.01),而云杉属和落叶松属种子千粒重间无显著差异(P>0.05)。对数回归分析和线性相关性分析表明,松科108种植物的C值和种子千粒重回归方程为：y=3.145x-7.248,决定系数（R²）为0.346,存在显著正相关性（P<0.000 1）,线性相关系数(γ)高达58.8%,这说明松科植物随着C值增大,其种子千粒重呈明显增加趋势。综上所述,松科属间种子千粒重差异显著,且随着属间进化程度的提高,C值和种子千粒重均呈明显下降趋势,其具体机理尚有待于结合其它功能性状做深入分析。     

小RNA的组成和功能——三类内源小RNA的研究概况

生物体中存在许多非编码的小RNA,可通过与靶mRNA完全或不完全的碱基互补配对,致使mRNA断裂或翻译抑制,从而达到调节基因表达的目的。这些小RNA组成了细胞中高度复杂的RNA调控网络,在生物的各项生理活动、生长发育过程中发挥着十分重要的作用。内源小RNA主要包括miRNA、siRNA和piRNA三类,概述这3种小RNA的生物发生,作用机制及功能等方面的研究进展。     

不同能量激光照射后中华大蟾蜍早期胚胎发育及其蛋白质谱变化的研究

应用YAG倍频激光器选择不同能量密度激光微束对中华大蟾蜍4细胞期胚胎进行照射,观察胚胎的生长、发育状况,统计出膜率、畸胎率和死亡率。实验结果表明：低能量激光照射明显地提高了胚胎的孵化速度,且使畸变率降低;而高能量激光对胚胎发育有明显抑制作用,而且使畸变率增高。不同能量密度激光微束照射中华大蟾蜍早囊胚,0．5h后制备样品进行双向电泳,凝胶成像后用PDQuest软件进行分析。结果显示激光照射对蛋白质点数及其分布有影响,影响程度与照射激光密度有关。结论：激光照射可以影响胚胎发育和蛋白质的合成。     

中国特有森林树种华山松的群体进化历史研究

利用现代分子群体遗传学的分析手段,对华山松27个自然群体129个个体的样本进行双亲遗传核基因AGP6片段的测序分析,检测该物种在第四纪冰期时的避难所和群体进化历史。结果表明:(1)华山松群体在AGP6基因座位上具有较高水平的核苷酸多态性,其沉默位点多样性值(πt=0.013 8,πsil=0.030 6)显著高于其他松属植物。(2)基于Bayesian聚类分析结果表明,华山松具有明显的群体遗传结构,地理分布区上能够分为中国中部和中国西南部两大区域族群,Network网络分析和系统发育分析均得到了相似的结果。(3)分子变异(AMO-VA)分析结果表明,遗传变异主要存在于群体内(65.65%)和族群间(30.18%),群体间存在较小的变异量(4.17%);物种水平和族群水平上的群体错配分析分布均呈多峰模式,说明华山松群体未经历过近期的扩张事件。(4)秦岭山脉和横断山区的群体存在较高水平的单倍型多样性和较多的特有稀有单倍型,进一步结合单倍型间的多样性关系,推测这些区域可能是华山松在第四纪冰期时期的避难所。研究认为,不同避难所地区间长期的地理隔离以及高大山脉、河流等异质性生境的形成可能促使了华山松在中国中部和西南部两大区域族群的异质性分化以及物种较高水平的核苷酸多态性。