结核分枝杆菌ESAT6-CFP10融合蛋白对小鼠巨噬细胞自噬功能的影响

目的研究结核分枝杆菌（MTB）ESAT6-CFP10融合蛋白对小鼠巨噬细胞自噬功能的影响。方法H37Rv菌株感染小鼠巨噬细胞后加入纯化的重组ESAT6-CFP10融合蛋白,通过透射电镜检测自噬体的形成。提取细胞总RNA和蛋白,以实时定量RT-PCR及Western blot方法检测自噬相关基因（atg）分子水平和蛋白表达水平。结果ESAT6-CFP10融合蛋白可抑制小鼠巨噬细胞自噬体的形成,并导致atg分子表达水平下降,其中atg8表达量下降最为明显。结论MTB ESAT6-CFP10融合蛋白通过调控atg分子表达水平影响小鼠巨噬细胞自噬功能。     

结核杆菌潜伏感染小鼠模型的制备及其评价指标

目前对于结核分枝杆菌进入潜伏期的机制以及再激化的原因知之甚少,一个重要的原因是缺乏潜伏感染(LTBI)动物模型,完整的LTBI模型应包括两种类型,一是低剂量荷菌的持续性感染模型,另一种为潜伏感染模型,即Cornell模型的改进型。综合使用柯氏量表评分、脾肺荷菌数、诱导的IFN-γ和TNF-α水平、组织中IL-10和IL-4的表达、脏器中特异性抗原负荷以及激素诱导TB复发的时间、潜伏感染相关基因的表达水平等指标可以比较准确、客观、特异性的评价小鼠LTBI模型的反应性。     

苹果主栽品种高效遗传转化系统的建立及其影响因子的研究

研究影响农杆菌介导的苹果主栽品种遗传转化的若干因子效应,建立起新乔纳金苹果简单、高效的遗传转化系统。外源基因向新乔纳金苹果细胞转移的效率明显高于皇家嗄拉和富士苹果。菌株ＥＨＡ１０５介导基因转移的能力比菌株ＬＢＡ４４０４明显高。用乙酰丁香酮、磷酸饥饿、低ｐＨ值等ｖｉｒ基因诱导因子处理菌株ＥＨＡ１０５的细胞,未能提高转化效率。叶片在菌液中的浸泡时间不仅影响基因转移效率,而且影响头孢霉素对外植体上农杆菌生长的抑制效果。共培养时,叶片远轴面与培养基接触比近轴面与培养基接触的转化效率高。     

低氧对横断脊髓大鼠脊髓反射兴奋性的影响

本文用低压舱模拟不同海拔高度,测定横断脊髓大鼠脊髓反射兴奋性恢复曲线。断脊髓组和对照组自海拔２０００ｍ以后脊髓反射兴奋性逐渐增高,但两组出现差异有显著性的海拔高度不同,断脊髓组为海拔４０００ｍ,对照组为海拔３０００ｍ。对照组与断脊髓组在同一海拔高度上比较,除海拔３０００ｍ时差别有显著性（Ｐ＜０．０５）外,在其它各海拔高度上两组间差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。结果表明,低氧时脊髓以上中枢和脊髓都参与脊髓反射兴奋性升高的调节     

精氨酸对烧伤大鼠免疫功能的影响

旨在观察烧伤后补充Ａｒｇ对大鼠血清免疫球蛋白、ＴＮＦ、吞噬细胞功能的影响。用Ｗｉｓｔａｒ大鼠,１８０±１０ｇ,Ⅲ°烧伤后１,３,７,１０天取血测定免疫球蛋白Ａ、Ｇ、Ｍ,及ＴＮＦ水平,并于烧伤后第３天取腹腔吞噬细胞观察其功能,计算其吞噬指数、吞噬率。结果烧伤大鼠血清ＩｇＡ、ＩｇＧ、ＩｇＭ水平降低,ＴＮＦ水平明显升高,吞噬细胞功能下降;饲喂补充Ａｒｇ的饲料后,血清免疫球蛋白水平、吞噬细胞功能均有所改善,ＴＮＦ水平降低。说明烧伤后补充Ａｒｇ可以改善机体免疫状态。     

去甲基化酶JARID1D在前列腺癌侵袭和转移中的作用与机制

目的 探索去甲基化酶JARID1D在前列腺癌侵袭和转移中的作用与机制,以期为前列腺癌的转移防治提供新的预测指标及治疗靶点。方法 选择前列腺癌细胞系22RV1和DU145转染慢病毒,以敲低JARID1D的表达,获得细胞系sh-JARID1D,并通过qRT-PCR及Western Blot检测转染后22RV1和DU145细胞中JARID1D的表达情况。通过Transwell实验检测JARID1D低表达后细胞侵袭能力的变化。通过裸鼠尾静脉注射sh-JARID1D细胞系建立体内实验转移模型,观察敲低JARID1D表达后体内肿瘤细胞的转移能力的变化。通过qRT-PCR及Western Blot检测JARID1D对转移相关基因基质金属蛋白酶2(MMP2)表达的影响。结果 Transwell实验显示JARID1D低表达的前列腺癌细胞侵袭能力增强(22RV1细胞系P<0.01,DU145细胞系P<0.001);体内实验显示JARID1D低表达可显著增强肿瘤细胞的体内转移潜能(22RV1转移模型P<0.01,DU145转移模型P<0.01)。进一步实验表明降低JARID1D表达,...     

一株感染家蚕的高致病性白僵菌的筛选及复合诱变

【背景】白僵蚕中的生物活性物质在医疗、保健品及化妆品行业有着广泛的应用。目前,许多人工养殖僵蚕基地在实际生产中使用的菌种多为未进行纯化优选的自然感病死亡僵蚕孢子粉且无固定的施用浓度,使得蚕的僵化死亡率难以保证。提高白僵菌菌株的致病力并筛选性状优良的高毒力菌株是工厂化生产白僵蚕研发的重要方向。【目的】利用紫外-微波复合诱变技术筛选高毒力菌株,为僵蚕工厂化生产提供优良菌株。【方法】利用孢子稀释法从山西省养殖农户中自然感染白僵菌的家蚕中分离获得一株原始白僵菌,运用紫外-微波复合的方式对该菌株进行诱变,并比较诱变前后菌株的产孢量及对家蚕的致病力。【结果】分离得到的原始菌株经鉴定为球孢白僵菌(Beauveria bassiana),命名为Beauveria bassiana Bb1003。通过对致死率和正突变率的考察,确定紫外-微波复合诱变的最佳诱变条件为紫外(功率为15 W)照射30 min,微波(功率为800 W、额定微波频率2 450 MHz)辐照60 s。筛选后得到6株复合诱变菌株(UMCM1、UMCM2、UMCM3、UMCM4、UMCM5和UMCM6)。菌株UMCM2对家蚕的僵化率高达...     

间接血凝试验检测抗乙型肝炎表面抗原的抗体

间接血凝试验是将抗原吸附在红血球上,当遇到血清中存有相应抗体时,即可发生血球凝集。间接血凝试验检测抗乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的抗体(Anti-HBs)较琼脂扩散、对流电泳和补体结合试验敏感性高,而与放射免疫试验敏感性近似,且具有优于放射免疫的简