植物多基因干扰载体体系构建与效用分析

多数重要的功能基因属于多基因家族,这些家族成员间存在功能冗余,高效的多基因干扰体系对研究多基因家族成员的生物学功能及其分子调控机制具有重要意义。对pCAMBIA1301载体改造,构建了适用于植物的多基因干扰体系pCAMBIA1301m和pCAMBIA1301s。使用该多基因干扰体系构建了四基因的干扰载体pCAMBIA1301m：35S∷SlPP2C1-2-3-4,4个目标基因为来源于番茄PP2C家族A组的PP2C1、PP2C2、PP2C3和PP2C4,并通过遗传转化导入番茄,用GUS染色和PCR检测转基因阳性植株,再利用RT-qPCR技术检测T₁和T₂代转基因植株中目标基因的干扰效率,用T₂代种子分析转基因番茄对ABA敏感性。结果表明,应用该干扰体系成功获得了四基因干扰的转基因植株35S∷SlPP2C1-2-3-4。在转基因番茄中4个目标基因的表达量显著低于野生型,其干扰效率均高于70%,转基因番茄种子萌发具有强烈的ABA不敏感性。多基因干扰体系能高效地同时沉默多个目标基因。     

镇海棘螈产卵场微生境选择

镇海棘螈(Echinotriton chinhaiensis)为国家一级重点保护野生动物,其种群面临着生境退化及丧失的重要威胁。产卵是决定镇海棘螈种群数量增长的关键环节之一,了解其产卵选择的微生境偏好可以更有针对性地保护该物种。本研究旨在确定影响镇海棘螈产卵场微生境选择的关键环境变量,同时为该物种的产卵生境保护、改造和重建提供科学基础。本文于2021年3-5月(繁殖期)在浙江省宁波市北仑区林场对镇海棘螈产卵位点(n=105)与非产卵位点(n=70)处的18个微生境变量进行调查。采用拟合优度卡方检验判断3种无序分类变量的差异性,并利用生境喜好系数对生境选择性进行分析。采用二元逻辑斯蒂回归模型对15个数值型变量进行分析,确定影响镇海棘螈产卵微生境选择的关键变量。结果显示镇海棘螈繁殖期间对产卵场微生境有明显偏好,通常产卵于朝向水坑、落叶层较厚(5.19±0.18 cm)、坡度较陡(18.64°±1.18°)和土壤含水量较低(33.51%±1.87%)的土壤基质上。此外,在大型遮蔽物中,镇海棘螈偏好选择体积较小的石块和乔木(2,994.63±316.17 cm³)作为遮蔽...     

抑郁症患者的脑CT灌注成像特征与认知功能的相关性

摘要 目的：探讨抑郁症患者的脑CT灌注成像特征与认知功能的相关性。方法：选取我院2020年1月到2023年1月收治的90例抑郁症患者作为研究对象,将其分为观察组,另选取同期来我院体检的90名健康志愿者作为对照组。收集所有受检者脑CT灌注成像检查数据,分析抑郁症患者的脑CT灌注成像特征,并建立受试者工作特征（ROC）曲线分析脑CT灌注成像对抑郁症的诊断效能。随后对观察组和对照组受检者均进行认知功能评估,其中包括连线检测（TMT）、视觉再生测验（VRT）、言语流畅性测验（VF）、数字广度测验（DST）以及数字符号测验（SDMT）,并分析脑CT灌注成像与抑郁症认知功能的相关性。结果：观察组与对照组受检者rCBV、rCBF、MTT、TIP、右枕叶、左枕叶、右颞叶、左颞叶、右顶叶、左顶叶CT值对比无明显差异（P＞0.05）,观察组与对照组受检者右额叶、左额叶CT值对比差异显著,观察组明显低于对照组（P＜0.05）;90例抑郁症患者经过汉密尔顿抑郁量表（HAMD）评估后分数均＞20分,确定存在抑郁症状,脑CT灌注成像与HAMD评分诊断抑郁症的准确性、灵敏度、特异性、阳性预测值和阴性预测值对比无明显差异（P＞0.05）,脑CT灌注成像的曲线下面积为83.89,最佳诊断着色界限值为82.53%,HAMD评分的曲线下面积为84.26,最佳诊断着色界限值为87.57%;观察组与对照组受检者连线提笔数、连线错误数、视觉再生检测结果对比无明显差异（P＞0.05）,观察组与对照组受检者连线、言语流畅性、数字广度、数字符号检测结果对比差异显著（P＜0.05）;Spearman相关分析结果表明：连线提笔数、连线错误数、视觉再生与脑CT灌注参数均无明显相关性（P＞0.05）,连线、言语流畅性、数字广度、数字符号与rCBV、rCBF、MTT、TIP、右枕叶、左枕叶、右颞叶、左颞叶、右顶叶、左顶叶CT值无明显相关性（P＞0.05）,连线与右额叶、左额叶CT值呈负相关（P＜0.05）,言语流畅性、数字广度、数字符号与右额叶、左额叶CT值呈正相关（P＜0.05）。结论：抑郁症患者的脑CT灌注成像与健康群体呈现差异,其中右额叶、左额叶差异情况最为显著,提示抑郁症患者可能存在大脑额叶功能改变,另外,抑郁症患者的大脑额叶功能与认知功能变化具有明显相关性。     

中国人促红细胞生成素cDNA的克隆及其在COS—7细胞中的表达

利用PCR技术,以中国人促红细胞生成素(EPO)次全基因组为模板,进行了基因修补和重组,克隆出EPO cDNA全序列。同时发现中国人EPO cDNA与国外的克隆比较有一个核苷酸的差异,导致第62位氨基酸是丝氨酸,不是亮氨酸。将人EPO cDNA基因插入表达载体pSV2-dhfr中的不同克隆位点,构建了6种不同的转移载体质粒,即pSV2-dhfr/F1,pSV2/N2,pSV2-dhfr/F3,pSV2-dhfr/P4,pSV2-dhfr/G1和pSV2-dhfr/G3。将它们分别转染导入COS-7细胞,结果表明6种转移载体质粒转染的细胞上清液都有明显的EPO活性。人EPO cDNA基因转移载体质粒在COS-7细胞中的表达水平高于人次全EPO基因组转移载体质粒。     

宽头山东鳄(Shantungosuchus brachycephalus Young,1982)的再研究

根据对原标本的进一步修理,本文首先对宽头山东鳄（ShantungosuchusbrachycephalusYoung,1982）进行了重新记述,并对其特征作了修订。其主要特征为：头骨相对较宽;眼前孔小,上下分隔为二;轭骨前端不参与构成但接近眶前孔的后边缘;牙齿尖锐,第三枚上颌齿异常粗壮,比其它上颌齿至少大一倍;腭面诸骨表面光滑;基蝶骨腹面中央凹槽前窄后宽变化显著;侧欧氏管孔位于基蝶骨、基枕骨和外枕骨3者之间;下颌外孔大,齿骨后缘分为上、中、下三支;肩胛骨前外侧肩峰之上,发育一显著的嵴状突起。其次,把它与本属的其他两个种：莒县山东鳄（Shantungosuchuchuhsienensis）和杭锦山东鳄（Shantungosuchushangjinensis）做了比较。就目前的资料,还不能确立山东鳄属各种间的系统关系。