双拷贝APP/BACE/DPsn转基因果蝇模型的建立及基因功能的研究

阿尔茨海默症 (Alzheimer′s disease, AD), 是一种以脑中β-淀粉样蛋白 (β-amyloid peptide, Aβ)沉积为主要病理改变的神经退行性疾病。在果蝇Drosophila模型中建立淀粉样蛋白前体蛋白 (amyloid precursor protein, APP)的剪切通路模拟Aβ的产生过程, 有望建立一种快速筛选治疗AD药物的动物模型。我们利用经典的Gal4/UAS系统, 将现有的APP/BACE/DPsn果蝇品系连续杂交, 通过同源重组的方法构建表达两个拷贝的APP/BACE/DPsn稳定可遗传的转基因果蝇新品系。进一步的实验结果表明： 与不表达APP/BACE/DPsn的对照果蝇w/y; APP/Cyo; BACE-DPsn/TM6BTb相比, 表达两拷贝APP/BACE/DPsn的 w/y; elav-APP; BACE-DPsn果蝇的最长寿命为52 d, 比对照组(69 d)缩短了17 d, 为对照组果蝇的75%; 中位生存时间为39 d, 比对照组(49 d)缩短了10 d, 为对照组的80%; 平均寿命为37 d, 比对照组(47 d)缩短了10 d, 为对照组的79%。同时, 表达两个拷贝APP/BACE/DPsn的果蝇所产卵的羽化时间比对照果蝇延长了3 d; 其羽化成虫的理论值为1∶9 (11%), 而实际羽化率仅为5.2%。结果提示, 由elav-Gal驱动在果蝇泛神经元内过表达APP/BACE/DPsn, 可以缩短果蝇寿命、 干扰果蝇胚胎正常发育。该果蝇有可能作为初步筛选AD治疗药物的动物模型, 为AD治疗新药的发现提供工具。     

药用植物内生放线菌的生物活性及菌株D62的代谢产物分析

利用琼脂移块法及WST-8法分别对分离自西双版纳药用植物的165株内生放线菌进行了抗菌、抗肿瘤活性测定。结果显示,超过42%的菌株对病原菌表现出拮抗活性,且对病原真菌的总体拮抗活性明显强于土壤放线菌;78%的菌株表现出抗肿瘤活性,且大部分菌株(54.5%)具有强抗肿瘤活性。选取其中对真菌及肿瘤细胞均有高抑制活性的菌株D62,并对其次生代谢产物进行了进一步的研究,共分离得6个化合物,分别是Antimycin A4a(1),Antimycin A7a(2)、Antimycin A2a(3)、Antimycin A1a(4)、10-hydroxy-10-methyl-dodec-2-en-1,4-olide(5)及6-(2-(4-aminophenyl)-2-oxoethyl)-3,5-dimethyl-tetrahydropyran-2-one(6),其中化合物6为新化合物。以上结果表明药用植物内生放线菌作为一类新的微生物资源具有很好的开发潜力。     

杜仲花粉不对称分裂的超微结构观察

运用透射电镜对杜仲花粉发育进程进行了观察研究。结果显示,杜仲小孢子的第一次分裂为不等分裂,形成小的生殖细胞和大的营养细胞。分裂开始前小孢子的营养极形成许多小液泡,建立细胞极性;然后随着核膜的解体核周围的细胞器逐渐向纺锤体区靠近,围绕在纺锤体周围。花粉第一次有丝分裂完成后,生殖细胞所获得的细胞器开始分布在细胞的两侧,后来移向生殖细胞的营养极,而紧贴花粉壁的生殖极无细胞器分布。这种生殖细胞早期的细胞极性,可能为进一步分裂形成精细胞奠定基础。     

污染场地地下水渗流场模拟与评价——以柘城县为例

地下水数值模拟技术可以定性、定量描述地下水系统中大量的不确定性和模糊因素。由于不合理的开发利用水资源,拓城县土壤和地表水受到污染严重。以拓城县作为研究区,通过探讨研究区的水文地质概念模型、地下水流运动的数学模型,求解该模型,确定研究方法。同时,结合地下水各类监测因子,对研究区的污染场场地地下水进行模拟评价,包括了参数率定和模型预测两部分,从而确定最合理的地下水开采方案。     

纳米氧化铁双歧杆菌LTA对实验性胃癌抑制效果的影响

目的探讨纳米氧化铁（Fe3O4）双歧杆菌脂磷壁酸（Lipoteichoic acid,LTA）对实验性胃癌体内抑制效果的影响及其抑瘤途径。方法用人胃癌BGC823细胞建立裸鼠移植瘤模型,用硝酸还原酶法检测各剂量组裸鼠腹腔巨噬细胞分泌NO和iNOS的含量,用免疫组化法检测移植瘤内VEGF、Survivin和TAMs的表达。结果纳米Fe3O4-LTA各组与阴性对照组相比,NO生成量增加、iNOS活性增高,差异有非常显著性（P〈0.01）。移植瘤内VEGF、Survivin和TAMs蛋白表达显著低于阴性对照组（P〈0.01）。结论纳米Fe3O4-LTA对人胃癌裸鼠移植瘤的生长具有明显的抑制作用,其抑瘤机制可能与激活巨噬细胞,使其分泌多种具有杀瘤作用的活性因子以及下调胃癌内VEGF、Survivin和TAMs的表达,进而抑制其血管形成有关。     

纳米四氧化三铁双歧杆菌LTA对实验性胃癌增殖及凋亡的影响

目的 观察纳米四氧化三铁(Fe3O4)双歧杆菌脂磷壁酸(lipoteichoicacid,LTA)对实验性胃癌增殖细胞核抗原(PCNA)和bcl-2、bax蛋白表达的影响.方法 用胃癌BGC-823细胞裸鼠皮下移植瘤模型,观察不同浓度纳米Fe3O4双歧杆菌LTA组与LTA组及环磷酰胺组移植瘤的生长情况,免疫组化法检测bcl-2和bax及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.结果 纳米Fe3O4双歧杆菌LTA各剂量组胃癌移植瘤PCNA阳性细胞面密度以及bcl-2阳性细胞面密度均显著低于肿瘤对照组(P<0.01),而bax 的阳性细胞面密度显著高于肿瘤阴性对照组(P<0.01).结论 纳米四氧化三铁LTA能明显降低人胃癌移植瘤的增殖活性及增强bax的蛋白表达,同时使其bcl-2基因蛋白的表达下调.     

利用气相色谱-质谱联机测定土壤氨基酸手性异构体13C富集比例

氨基酸手性异构体的转化与更新程度在表征土壤有机质的循环转化机制方面具有重要意义.为有效区分土壤中原有的和利用外加碳源新合成的氨基酸,本文建立了稳定同位素培养 气相色谱/质谱联机测定土壤氨基酸手性异构体¹³C富集比例的方法.由于培养过程中加入的¹³C葡萄糖被迅速利用形成氨基酸碳骨架,因而利用质谱技术可检测同位素的富集强度的变化.外加葡萄糖直接合成氨基酸的比例可利用质谱碎片(F+n)的相对强度变化来评价（n为质谱碎片F中含有的碳原子数目）;而源于葡萄糖的¹³C同位素在氨基酸分子中的富集程度是所有同位素峰相对强度变化的总和.¹³C在目标化合物中的富集比例用原子百分超（APE）评价,D 氨基酸的APE还需进一步利用水解诱导的外消旋化系数校正.¹³C在目标化合物中的富集程度可反映各氨基酸手性异构体的碳循环速率大小,是研究土壤氨基酸动态变化的有力工具.     

聚丙烯补片材料在腹股沟疝修补中的临床应用研究

目的:采用生物材料补片进行修补,加强腹壁薄弱区域实现功能重建,分析该方法治疗腹股沟疝的临床疗效。方法:选择我院收治的无嵌顿性择期腹股沟疝手术患者30例,随机分为传统修补组与生物补片修补组。比较患者的围手术期指标(手术时间、出血量、住院时间、术后下地活动时间、镇痛药物应用例数)、临床疗效,通过随访比较术后1个月、3个月、6个月患者的VAS评分及主观满意度,记录切口感染及其他并发症的发生情况。结果:所有患者均顺利完成手术,并完成半年以上随访。研究组的手术时间、术中失血量、住院时间、术后下地活动时间、镇痛药物应用均明显短于或低于对照组(P0.05)。两组患者术后1个月、3个月、6个月的VAS评分、主观满意度均较术前显著降低(P0.05),但两组之间相比差异无统计学意义(P0.05)。结论:采用生物补片材料修补腹股沟疝的手术创伤较小且患者恢复期短,近期疗效及安全性与传统手术相当。     

陆地水-碳耦合模拟研究进展

在全球气候变化和水资源危机背景下,人类对土地、森林和水资源的适应性管理需求推动了生态系统水、碳耦合与制约关系的研究.在多时空尺度上研究水、碳耦合关系、以及探讨全球变化下生态系统水、碳平衡及其相互响应机制是现阶段的研究热点.本文在综述不同尺度水、碳耦合关系的基础上,探讨了其中关键过程与参数的涵义和测算方法,分析了大尺度上基于遥感技术的蒸散发模型的构建及其对水碳耦合研究的重要性,最后展望了多源数据同化技术等在未来气候变化背景下水碳耦合模拟中的应用.     

人心肌肌钙蛋白C两种突变转基因小鼠模型建立与对比分析

目的：为建立心肌组织特异性表达人cTnCD145E和cTnCG159D突变基因转基因小鼠,为对比分析两种不同心肌病的发生发展建立模型。方法利用定点突变技术分别制备人cTnC基因的cTnCD145E和cTnCG159D两个突变体,随后插入心肌特异性表达启动子α-MHC下游构建人cTnCD145E和cTnCG159D基因转基因载体。通过显微注射法建立转基因C57BL/6小鼠。利用心脏超声和病理观察对比分析不同年龄转基因小鼠心脏的结构与功能。结果建立了心肌组织高表达人cTnCD145E和cTnCG159D突变基因转基因小鼠,cTnCD145E和cTnCG159D转基因小鼠随年龄增加,有分别向HCM和DCM发展的趋势,12月龄时,cTnCD145E转基因小鼠收缩末期和舒张末期左室容积（ left ventricle end-diastolic volume and end-systolic volume,EDV and ESV）与同窝阴性小鼠相比下降,射血分数（ejection fraction, EF）和收缩末期左心室后壁厚度（left ventricle end-systolic posterior wall thickness ,ESPWT）增加,而cTnCG159D转基因小鼠EDV和ESV与同窝阴性小鼠相比上升,EF和ESPWT减少。结论心肌组织特异性表达人cTnCD145E突变基因转基因小鼠表现肥厚型心肌病病理表型,而心肌组织特异性表达人cTnCG159D突变基因转基因小鼠表现扩张型心肌病病理表型,二者可作为对比研究由不同发病机制导致的心肌病模型。