谷氨酸下调培养海马神经元AMPA 受体GluR2亚单位的表达

目的研究在癫痫发病过程中,谷氨酸对AMPA受体Glu R2亚单位表达变化的影响。方法用RT-PCR和Western Blot方法观察谷氨酸诱导培养大鼠海马神经元AMPA受体Glu R2亚单位mRNA和蛋白的表达变化。结果在谷氨酸刺激后2h,8h,12h,培养海马神经元Glu R2mRNA和蛋白表达明显下降,与对照组相比,差异有显著性(P<0.05),而非NMDA受体拮抗剂CNQX能阻断此变化。结论在癫痫等疾病中,谷氨酸能通过激活AMAP/KA受体下调AMPA受体GluR2亚单位的表达,参与发病过程。     

IL-1β的促痫作用与GαmRNA表达的关系

目的为了探讨IL-1β的促痫作用机制.方法实验应用RT-PCR方法检测了谷氨酸钠致癫痫动物在同时脑内注射IL-1β、IL-1ra(IL-1R拮抗剂)或MCPG(mGluR5拮抗剂)后,海马组织Gαs、GαqmRNA的表达变化.结果 (1)谷氨酸钠诱导的癫痫发作使海马组织Gαs mRNA,Gαq mRNA表达上升.而IL-1β显著促进谷氨酸钠的作用,与单纯注射谷氨酸钠相比Gαs mRNA,Gαq mRNA表达上升更为显著(P＜0.05);(2)IL-1ra与MCPG均能阻断IL-1β的此种作用;(3)mGluR5 mRNA的表达未受影响.结论 IL-1β在癫痫中的作用是使Gαs,Gαq 激活,且表达上升,然后可能再通过cAMP等第二信使与其它受体或离子通道的相互作用起到促痫作用.mGluR5和 IL-1RⅠ在癫痫发作过程中可能存在协同作用,或者通过间接的"对话"共同促进Gαs和Gαq mRNA的表达,导致癫痫发作增强.     

代谢型谷氨酸受体5与白细胞介素1受体Ⅰ型在大鼠大脑皮质及海马神经元的共存

目的 研究代谢型谷氨酸受体5(mGluR5)和白细胞介素1受体I型(IL-1RI)在大鼠大脑皮质和海马的分布及共存状况。方法 采用相邻切片的免疫细胞化学双标法,在两张相邻脑冠状切片上分别显示mGluR5与IL-1RI的免疫组化染色结果,通过显微摄像确定mGluR5／IL-1RI双标神经元。结果 切片上mGluR5阳性产物为蓝黑色,定位于细胞膜上;IL-1RI阳性产物为棕黄色,主要定位于细胞膜,也存在于神经元内。在大鼠大脑皮质及海马锥体细胞层均存在较丰富的mGluR5及IL-1RI阳性神经元。在大脑皮质,有部分神经元内mGluR5与IL-1RI共存;在海马锥体细胞层,mGluR5及n1RI阳性反应细胞密集,分布区重叠,很可能也存在二共存的神经元。结论 大鼠大脑皮质内存在mGluR5及IL-1RI共存神经元。本研究的结果为免疫神经调质在神经元内相互作用提供了形态学依据。     

下丘脑室旁核内NPY神经元与CCK神经元相互关系的免疫电镜双标研究

应用包埋前免疫电镜双标技术对大鼠下丘脑室旁核的神经肽Y(NPY)和胆囊收缩素(CCK)神经元的相互关系进行了研究。用Norgren法进行免疫电镜双标染色。结果在电镜下观察到:在室旁核内侧部,NPY样免疫反应产物呈电子密度高的颗粒状或絮状,弥漫分布于胞浆;CCK样免疫反应产物则呈电子密度高的针状或块状,散在分布于胞浆,偶见于核内。有时,在一个神经末梢内既有浓重的颗粒状DAB反应产物,又有典型的针状TMB反应产物。在室旁核内,NPY和CCK神经元胞体互相混杂、交错存在,两者均为中等大细胞。在超微结构水平,NPY和CCK神经元的树突和轴突可由非NPY、非CCK神经末梢接受传入突触联系;CCK神经元的树突还可接受其他CCK神经末梢的传入性自调节突触;CCK神经元胞体可接受NPY神经末梢的传入性突触,后者的突触前成分内可能有CCK与NPY共存。     

白细胞介素-1β对Fos蛋白表达的影响及其在癫痫发作中的作用

目的探讨白细胞介素-1(IL-1)在癫痫发病中的作用。方法将实验动物分为四组：A组(对照组)、B组(IL-1β组)、C组(IL-1β Glu,阈下剂量组)、D组(IL-1受体拮抗剂 IL-1β Glu,阈下剂量组),分别在各组大鼠侧脑室注射上述试剂,然后观察动物行为学表现并用免疫组织化学方法检测大脑皮质及海马Fos蛋白的表达。结果A组无癫痫发作,B组发作程度达Ⅱ～Ⅲ级,C组为Ⅳ～Ⅴ级,D组为Ⅰ～Ⅱ级。在大脑皮质及海马,Fos蛋白在A、D组无明显表达,B、C组有明显表达,而在齿状回,A组仅少量表达,B、C、D组表达均明显增强。结论IL-1β可通过其受体介导而诱导癫痫发作,与Glu联合应用可促进癫痫发作,免疫因子对神经系统的兴奋性有调节作用。     

谷氨酸下调培养海马神经元AMPA受体G1uR2亚单位的表达

目的 研究在癫痫发病过程中,谷氨酸对AMPA受体G1uR2亚单位表达变化的影响。方法 用RT-PCR和Western Blot方法观察谷氨酸诱导培养大鼠海马神经元AMPA受体G1uR2亚单位mRNA和蛋白的表达变化。结果 在谷氨酸刺激后2h,8h,12h,培养海马神经元G1uR2 mRNA和蛋白表达明显下降,与对照组相比,差异有显著性（P〈0．05）,而非NMDA受体拮抗剂CNQX能阻断此变化。结论 在癫痫等疾病中,谷氨酸能通过激活AMAP／KA受体下调AMPA受体G1uR2亚单位的表达,参与发病过程。     

糖皮质激素的抗痫作用及其与γ-氨基丁酸的关系

为了探讨糖皮质激素的抗癫痫效应和作用机制, 本研究观察了糖皮质激素对戊四氮诱导的慢性点燃型癫痫大鼠的行为和脑电图的影响, 并应用免疫细胞化学双重染色技术探查了大脑皮质神经元内糖皮质激素受体（ＧＲ） 与γ－ 氨基丁酸（ＧＡＢＡ） 的共存情况。结果显示, 在慢性点燃型癫痫大鼠, 在点燃后的第３ 天或第１５ 天, 先经静脉给予地塞米松（４ｍ ｇ／ｋｇ）, 再经腹腔注射戊四氮（３０ｍ ｇ／ｋｇ） 可明显减弱或完全抑制癫痫发作。免疫细胞化学双重染色证明, ＧＲ和ＧＡＢＡ共存于大脑皮质部分神经元。以上结果提示, 糖皮质激素具有抗慢性癫痫的效应, 其作用机制可能与ＧＲ调节同一神经元内ＧＡＢＡ的合成有关。