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目的:制备人突触囊泡蛋白2C(SV2C)单克隆抗体。方法:纯化SV2C/L4蛋白,免疫BALB/c小鼠并制备杂交瘤细胞,筛选针对SV2C/L4的特异性抗体,鉴定亚型及测定效价;选取效价最高的抗体进行大量制备,并经SDSPAGE、Western印迹、间接ELISA和动物实验对抗体纯度、特异性、亲和力及中和活性进行检测。结果:得到纯度大于95%的SV2C/L4蛋白,经2轮筛选共获得13株鼠单抗,抗体重链大多为IgG1、IgG2a型,轻链均为κ型;选取效价最高的30号抗体进行大量制备,纯化后抗体的纯度大于99%,亲和力为6.7 nmol/L,中和活性为100 LD50/mg。结论:筛得1株高亲和力、具有中和活性的特异性SV2C鼠单抗,为肉毒中毒的治疗提供了新的选择,也为阐明Bo NT/A受体间的关系奠定了基础。 相似文献
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《微生物学免疫学进展》2016,(5)
目的制备口服可溶性ST2(Soluble ST2,sST2)质粒,观察其对于小鼠炎症性结肠黏膜免疫应答水平。方法提取小鼠脾脏总RNA,扩增sST2基因,并克隆至pcDNA3.1/myc-His A载体,构建pcDNA3.1-sST2-myc-His A质粒,借此转染COS-7细胞,使之表达sST2-myc-His A融合蛋白。利用脂质体LipofectamineTM2000包裹,制备口服sST2质粒,经灌胃给予用葡聚糖硫酸钠(Dextran sulfate sodium,DSS)诱生溃疡性结肠炎的C57BL/6实验小鼠,并用组织病理学方法观察结肠黏膜组织形态变化。用Real-time PCR检测sST2基因表达,用免疫印迹检测sST2质粒融合蛋白的表达;用ELISA检测小鼠肠固有层淋巴细胞培养上清中细胞因子(IL-4、IL-5和IL-13)的分泌水平。结果Real-time PCR检测到sST2基因的正确表达,经双酶切及测序鉴定,证明质粒pcDNA3.1-sST2-myc-His A构建成功,免疫印迹试验在转染的COS-7细胞检测到sST2-myc-His A融合蛋白的表达,其相对分子质量与预期的相符;观察到结肠黏膜组织形态发生的变化;Real-time PCR结果显示,sST2质粒组在结肠黏膜组织内sST2的表达水平明显高于pcDNA3.1组和生理盐水组(P0.01);ELISA结果显示sST2质粒组结肠固有层淋巴细胞培养上清中IL-4、IL-5和IL-13的分泌水平高于pcDNA3.1组和生理盐水组(P0.05)。结论实验成功制备口服sST2质粒;该质粒可抑制小鼠炎症性结肠黏膜组织内Th2型免疫应答。 相似文献
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同一生育时期大豆品种长农5号植株中的酰脲含量,以主茎最高,叶柄次之,叶片最低。前二者的酰脲含量从基部向上逐渐增加,茎段幼嫩部分含量最高。叶片中酰脲含量在营养生长期间稍高,生殖生长期间同一节位叶片中无明显变化。结荚期以前幼叶中酰脲含量较高,鼓粒期不同节位间无明显差异。不同节位叶片中尿囊素酶活性高低与茎和叶柄中酰脲含量大小的变化趋势基本相似。 相似文献
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《菌物学报》2015,(6):1187-1195
C42属于epipolythiodioxopiperazines(ETPs)二酮呱嗪类化合物,具有多种生物学活性,包括抑制病毒复制;不过其对hepatitis B virus(HBV)复制的影响及机理鲜有报道。自噬是广泛存在于真核细胞、通过溶酶体降解长半衰期蛋白的现象,参与多种生理、病理过程。有研究发现自噬对HBV的复制至关重要。C42是否通过改变自噬来影响此病毒的复制目前还未见报道。在该研究中,我们发现表达HBV基因组的Hep G2.215细胞较原始的Hep G2细胞,自噬体明显增加并伴随着Akt磷酸化的增高。C42可以降低自噬基因LC3-II和p62的水平,同时会影响Akt信号通路。氯喹是一种自噬抑制剂,它的存在可以抑制C42导致的LC3-II降低,表明C42可以引起该细胞的自噬。敲降自噬基因和抑制Akt磷酸化均可以减少HBV-X蛋白表达。而利用氯喹抑制自噬体与溶酶体的融合却提高了HBV-X蛋白水平。由于HBV-X对该病毒的复制至关重要,因此,我们认为,C42通过自噬和Akt信号通路来抑制HBV的复制。 相似文献
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在自然生态系统中,鸟类常能迅速感受到环境条件的变化,对生态平衡及自然环境质量起着指示剂的作用.2001年4~6月间在松辽平原西北部的图牧吉-北大岗贝加尔针茅Stipa bacailensis草原地区,选取3块不同退化程度的草地进行繁殖鸟类多样性的调查.调查中共记录到19种繁殖鸟类,隶属于8目14科,其中以雀形目百灵科鸟类的数量为最多;在3块样地中,未退化草原植被生长状况较好,轻度退化草原植物种类较多,中度退化草原为三者中最差;随着草原退化程度的加剧,鸟类物种多样性逐渐降低,均匀性指数在0.81 ~0.86之间,单一的草原生境类型使鸟类的群落结构十分相似,群落间的相似性指数达到80%以上. 相似文献
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杂色山雀对人工巢箱内苔藓类巢材的选择 总被引:1,自引:0,他引:1
2008年及2009年每年的3~8月,在辽宁省仙人洞国家级自然保护区对杂色山雀(Parus varius)人工巢箱内苔藓类巢材进行了收集和鉴定,发现巢中共有藓类植物7科9属。其中,小锦藓属(Brotherella)、青藓属(Brachytheccium)、棉藓属(Plagiothecium)及绢藓属(Entodon)所占比重较大。我们分别按照样方和苔藓群落采集了周围环境中的藓类植物,鉴定出7科8属的藓类植物;采集到35个苔藓群落,出现最多的是东亚小锦藓(B.fauriei)群落。结果显示,杂色山雀对苔藓的选择可能与苔藓的生物学特性、分布和数量有关。另外通过统计分析和比较得出,按照苔藓群落来采集的方式更适合本文的研究。 相似文献
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描述了采自中国浙江九龙山的苔类植物一新种——毛茎合叶苔Scapania paraphyllia T.Cao,C.Gao,J.Sun&B.R.Zuo。该新种与腋毛合叶苔S.bolanderiAust.相近,两种皆具带齿叶片和假鳞毛,但新种具如下特征可与腋毛合叶苔区别:(1)植物体小,通常红色;(2)假鳞毛多数,不分枝,不仅生于叶腋,茎上也有着生;(3)背脊为腹瓣长的1/4-1/3,背瓣为腹瓣大小1/2-1/3;(4)叶角质层表面粗糙,具粗瘤,直径达6-8μm。与另一个相似种sampliata Steph.相比,因新种具有粗糙的叶表面和假鳞毛等特征,也易于区别。 相似文献
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大气二氧化碳浓度升高对银杏叶片内源激素的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
采用开顶箱系统,研究了银杏叶片内源激素脱落酸(ABA)、吲哚乙酸(IAA)、玉米素核苷(ZR)和赤霉素(GA3)对大气CO2浓度升高(环境CO2浓度+350 μmol·mol-1,EC)的响应.结果表明,EC处理能使ABA含量降低,与对照(CK)相比, ABA含量最大降低63.0%(处理后120 d).EC处理使叶片IAA和ZR含量增加,而且随着处理时间的延长,差异均达显著水平;IAA含量在处理后100 d为CK的2倍,ZR含量在处理后80 d时为CK的2.5倍.EC处理使叶片GA3峰值提前出现. (IAA+GA3+ZR)/ABA比值随着银杏的生长逐渐降低,在处理后期(处理后40~120 d)明显高于CK,表明大气CO2浓度升高可促进银杏的生长发育. 相似文献
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PFKFB3参与了11'-deoxyverticillin A(C42)诱导的HeLa细胞自噬和凋亡 总被引:1,自引:0,他引:1
摘要:【目的】明确糖酵解调节基因PFKFB3参与11-脱氧轮枝菌素A(11'-deoxyverticillin A,C42)诱导HeLa细胞自噬和凋亡中的作用。【方法】利用电镜、荧光显微镜、蛋白免疫杂交、转染、MTS 活性检测、siRNA干扰、定量RT-PCR等对C42处理的HeLa 细胞自噬和凋亡情况进行了检测。【结果】C42能够引起HeLa细胞不同的死亡。敲降自噬关键基因BECN1或LC3后,明显增加PARP-1的切割和促进C42引起的细胞活性丢失。尽管高浓度C42能更明显地抑制细胞增殖,但却不能增加细胞的自噬流;C42促进的自噬能被糖酵解调节基因PFKFB3的抑制剂所降低;而过量表达糖酵解调节基因PFKFB3能促进细胞自噬。【结论】糖酵解调节基因PFKFB3直接参与了C42诱导的HeLa细胞自噬,这种自噬的发生抑制了其诱导的细胞凋亡。 相似文献