摄入异烟肼对家蚕幼虫体内谷胱甘肽氧化还原循环和谷胱甘肽S-转移酶活性的影响

为了建立家蚕Bombyx mori的药物筛选和毒性评价模型, 以剂量为2 000 mg/kg的抗结核模药异烟肼饲喂家蚕5龄第3天幼虫后检测其中肠和脂肪体的抗氧化解毒相关代谢的变化。结果表明： 雌蚕中肠组织中, 总谷胱甘肽(GSH+2GSSG)、 还原型谷胱甘肽(reduced glutathione, GSH)和氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione, GSSG)含量均呈现迅速上升再缓慢下降趋势; 谷胱甘肽S 转移酶(glutathione S-transferase, GST)活性升高到较大值后逐渐降低; GSH/GSSG的比值下降表明, 在72 min后中肠组织向氧化态转移。脂肪体组织中, 总谷胱甘肽、 GSH和GSSG含量变化均呈现迅速下降再迅速上升的趋势; GST活性达到最大值后逐渐降低后趋于平稳; GSH/GSSG比值升高表明, 在72 min后脂肪体组织向还原态转移。无论雌蚕还是雄蚕, 总谷胱甘肽、 GSH和GSSG含量以及GST活性均是脂肪体高于中肠。雌蚕的总谷胱甘肽含量、 GSH和GSSG含量高于雄蚕, 但雄蚕的GST活性高于雌性。结果说明, 摄入异烟肼引起了家蚕幼虫体内谷胱甘肽氧化还原状态的改变和酶活性的变化, 在这个过程中脂肪体起主要解毒代谢作用。     

GA_3对离体蒜苔细胞内含物再分配过程中H_2O_2代谢的作用(英文)

离体蒜苔构成一个完整的细胞内含物再分配系统。 ２５ ℃条件下,于黑暗中贮存时,苔茎基部细胞内含物转移到顶端珠蒜中,最后苔茎下部枯萎,顶端形成鲜嫩多汁的珠蒜。适当浓度 ＧＡ３处理苔茎基部可以有效抑制上述细胞内含物再分配过程。已有研究表明, Ｈ２Ｏ２由超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）催化产生,被过氧化物酶（ＰＯＤ）和过氧化氢酶（ＣＡＴ）催化降解; Ｈ２Ｏ２对生物个体发育具有重要调节作用。本文主要测定ＧＡ３对离体蒜苔Ｈ２Ｏ２代谢的影响;为进一步探讨Ｈ２Ｏ２在细胞内含物再分配中的作用提供参考。 取珠蒜未明显膨大的离体蒜苔为供试材料,采用 ５０μｇ／ｍＬ ＧＡ３溶液处理蒜苔基部,用比色法和氧电极法测定珠蒜和苔茎下部Ｈ２Ｏ２水平和ＳＯＤ、ＰＯＤ、ＣＡＴ活性。结果表明：（１）在处理后４８ｈ内,珠蒜和苔茎下部Ｈ２Ｏ２代谢即产生明显差异（Ｆｉｇ．１－４）;（２）贮存２０ｄ后对照珠蒜明显膨大,而ＧＡ３处理珠蒜光显著变化（Ｔａｂｌｅ１）;（３）ＧＡ３处理显著提高了珠蒜Ｈ２Ｏ２水平和ＳＯＤ、ＰＯＤ、ＣＡＴ活性,相反苔茎下部Ｈ２Ｏ２水平和ＰＯＤ、ＣＡＴ活性受到显著抑制,而ＳＯＤ活性提高（Ｆｉｇ．５－８）。ＧＡ３处理对珠蒜和苔茎下部Ｈ２Ｏ２代谢的相反     

家蚕蛾衰老期间活性氧代谢的性别差异(英文)

物种在寿命方面存在性别差异。本文研究了家蚕性别差异在衰老期间所引起活性氧代谢上的差异。本实验条件下,家蚕雄蛾存活期为3～4天,雌蛾为6～7天。于羽化后;第1～4天定时取样、冻存、测定。雄蛾干物质消耗比雌蛾大（Tab．1＆2）。雄蛾体内活性氧物质丙二醛含量比雌蛾大（Tab．2）,受其伤害的程度也更大些。另一活性氧物质H_2O_2含量的变化先是呈逐步下降,后期有一个短暂的回升（Fig．1）。但雄蛾H_2O_2含量在下降期比雌蛾的高,而在回升期比雌蛾的低。这可能与其体内活性氧物质清除系统的变化有关。该系统中酶类,如SOD（Fig．2）和CAT（Fig．3）含量的变化为：雄蛾后期比雌蛾低得多,整个变化过程也剧烈得多。作为这些酶类的辅基,除Mn是相反以外,其他诸如Fe、Cu、Zn等含量的下降幅度;雄蛾均高于雌蛾（Tab．3）。     

丝蛋白合成和分泌期家蚕丝腺中有氧氧化特性分析

【目的】有氧氧化中葡萄糖(Glc)、丙酮酸(PA)、乙酰Co A(AC)、还原型吡啶核苷酸(NADH)和腺苷三磷酸(ATP)摩尔数的理论比值为1∶2∶2∶10∶30~32,而己糖激酶(HK)、磷酸果糖激酶1(PFK1)、丙酮酸激酶(PK)、丙酮酸脱氢酶(PDH)、柠檬酸合酶(CS)、异柠檬酸脱氢酶(ICDHm)、α-酮戊二酸脱氢酶(α-KGDH)、NADH泛醌还原酶(NCR)、琥珀酸泛醌还原酶(SCR)、泛醌细胞色素C还原酶(CCR)、细胞色素C氧化酶(CCO)和ATP合酶(AS)活性的理论比值为1∶1∶2∶2∶2∶2∶2∶10∶2∶12∶12∶26~28。本研究旨在分析丝蛋白合成和分泌期家蚕Bombyx mori丝腺有氧氧化的特性。【方法】利用分光光度法和高效液相色谱法测定了上述生化指标的变化。【结果】丝蛋白合成和分泌期家蚕丝腺中检测不到Glc,产物含量以1/30 ATP,1/10 NADH,1/2 AC和1/2 PA的顺序递增;糖酵解途径相关酶活性,以PFK1活性最低;三羧酸循环相关酶活性以1/2 ICDHm,1/2α-KGDH和1/2 CS的顺序递增;氧化磷酸化相关酶包括1/26 AS,1/10 NCR,1/2 SCR,1/12 CCR和1/12 CCO的活性以1/26 AS活性最低;1/26 AS,1/2 ICDHm,1/2 PDH和PFK1的活性依次递增。NADH含量、ATP含量、PFK1活性、PDH活性和NCR活性在丝蛋白合成期升高,但在丝蛋白分泌期下降。【结论】据此推测,家蚕丝腺中PFK1,ICDHm和AS分别是糖酵解途径、三羧酸循环和氧化磷酸化的限速酶;糖酵解途径、丙酮酸脱氢、三羧酸循环和氧化磷酸化速率依次递减;有氧氧化速率在丝蛋白合成期升高,相反在丝蛋白分泌期降低。     

H2O2参与离体蒜苔细胞内含物再分配的调控

植物生长发育过程中经常发生新老器官更替和细胞内分物的再分配，再利用。Lepold提出新生器官向衰老器官传递某种信息，动员后者细胞内含物向前者再分配。但是该信息的化学本质迄今仍不清楚。大蒜（Allium sativum)的离体蒜苔是研究细胞内分物再分配的良好材料，细胞内含物大量从苔茎向珠蒜中再分配。结果珠蒜显著膨大而苔茎衰老死亡。蔡可等发现赤霉素（GA3）处理可有效抑制细胞内含物再分配。我们此前的研究发现GA3处理苔茎基部可显著改变珠蒜和苔茎H2O2代谢。本研究中我们分别用GA3和3－氨基－1，2，4－三唑（AT）H2O2清除酶catalase的专一性抑制剂处理珠蒜，结果发现GA3和AT均可有效抑制离体蒜苔细胞内含物再分配（Fig.1)。根浓度不同，H2O2可以诱导细胞产生保护性反应或凋亡，细胞内含物再分配过程中珠蒜H2O2浓度显著下降后保持于低水平，相反苔茎H2O2浓度极显著升高10倍以上，而且细胞内含物转移早的苔茎下部H2O2峰值出现也早（Fig.2)。GA3或AT处理珠蒜，珠蒜H2O2浓度显著提高而苔茎H2O2浓度保持稳定的低水平或峰值显著推迟（Fig.2)，可见苔茎高浓度的H2O诱导了苔茎细胞凋亡并把细胞内含物转移给珠蒜。已知经2％的呼吸耗氧生成H2O2。珠蒜呼吸速率显著高于苔茎（王文宏等）表明珠蒜H2O2生成速率大于苔茎。珠蒜H2O2清除酶peroxidase和catalase活性逐步下降，与苔茎相反（Fig3,4)，可见珠蒜H2O2浓度应该显著高于苔茎，但事实上珠蒜H2O2水平显著低于苔茎，已知H2O2具有寿命长，易扩散和运输的特点，可见苔茎中积累的H2O2应该主要来自珠蒜。GA3和AT处理对珠蒜和苔茎中H2O2代谢的作用进一步表明，H2O2可能参与离体蒜苔细胞内含物再分配的调控。