miR-145通过靶向吞噬和细胞活力蛋白1抑制乳腺癌细胞侵袭

吞噬和细胞活力蛋白1（engulfment and cell motility protein 1,ELMO1）可以促进多种癌细胞的侵袭和转移,但ELMO1的表达是否受miRNA的调控鲜有研究。本研究旨在探讨miR-145与ELMO1表达的相关性,以及miR-145通过结合ELMO1的mRNA对乳腺癌侵袭的影响。通过TargetScan (http://www.targetscan.org/)靶基因预测软件预测与ELMO1的3′UTR结合的miR-145。荧光素酶结果证实两者互补结合。Transwell侵袭结果显示,miR-145组和siELMO1+miR-145组MDA-231乳腺癌细胞穿膜数较对照组分别降低40%（P＜0.05）和79%（P＜0.05）。siELMO1+miR-145组和siELMO1组细胞穿膜数则无显著差异（P>0.05）。结果提示,miR-145通过与ELMO1的mRNA结合抑制细胞侵袭。qRT-PCR显示,低侵袭的MCF-7乳腺癌细胞miR-145的表达量较高侵袭的MDA-435细胞高80%（P＜0.05）,较MDA-231乳腺癌细胞高75%（P＜0.05）,即miR-145与癌细胞侵袭能力呈负相关。Western印迹结果表明,miR-145组ELMO1表达量低于阴性对照组,miR-145 抑制组ELMO1表达量高于抑制剂NC组（P＜0.05）,证明miR-145抑制ELMO1的表达。qRT-PCR显示,过表达miR-145后ELMO1 mRNA含量与对照组无显著差异（P>0.05）。结果提示,miR-145对ELMO1的调控作用通过抑制其翻译实现。F-肌动蛋白聚合实验表明,miR-145组和阴性对照组于20 s和60 s时F-肌动蛋白聚合结果存在明显区别（P＜0.05）。Western 印迹结果表明,miR-145组活化的Rac1表达量较阴性对照组降低60%（P<0.05）,抑制剂NC组活化的Rac1较miR-145 抑制组降低55%（P<0.05）;miR-145组磷酸化的整合素β1较对照组于15 min时降低42%（P<0.05）,于30 min时降低31%（P<0.05）。由此得出的miR-145过表达显著促进乳腺癌细胞F-肌动蛋白聚合、Rac1活化和整合素β1磷酸化结论。综上所述,miR-145通过靶向ELMO1的 mRNA抑制ELMO1翻译,从而抑制乳腺癌的侵袭。     

絮凝法处理L-脯氨酸发酵液的研究

通过滤饼的重量比阻和溶液流动电位(亦称ζ电位)的测定,分析、讨论了用絮凝技术预处理L-脯氨酸发酵液的合理性,实践也表明不仅能大大提高发酵液的固液分离效果,同时使树脂对L-脯氨酸的重量吸附容量增加了40%。     

木本植物花粉生活力测定及生活力下降原因探讨

贮藏花粉,保持花粉生活力在育种和种质保存中具有重要意义。一种贮藏方法的优劣,最终要以贮藏后的生活力为衡量依据。因此,测定花粉生活力是花粉贮藏研究中不可缺少的重要部分。花粉生活力的测定方法很多,刘武林等作过综述。其中被普遍釆     

凝胶板植酸酶活力检测

将１ｍｍ厚凝固于复印膜上的水琼脂（１５％～２．０％）凝胶板侵入含１２ｍｍｏｌ／Ｌ植酸钠的Ｇｌｙ—ＨＣｌ缓冲液中达１ｈ以上,取出干至胶表面无水迹,于上加Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｓｐ．５９—２植酸酶或与电泳后的凝胶板紧贴１０～６０ｍｉｎ。然后水平置于恒温水浴锅中反应一定时间,取出浸入１ｍｏｌ／ＬＨ_２ＳＯ_４－２％（ＮＨ_４）_６Ｍｎ_７Ｏ_２４－１０％ＦｅＳＯ_{４相似文献}   

大鼠大脑皮层中钙调神经磷酸酶活力的时空变化

以ＰＮＰＰ为底物测定了超离心制备的大鼠出生后早期和成年大脑皮层亚细胞各组分中钙调神经磷酸酶的活力,实验结果表明：（１）钙调神经磷酸酶活力广泛地存在于胞液和突触部分,并且各亚细胞组分有明显差异,成年大鼠大脑皮层中ＣａＮ活力相对最高水平是在突触体,突触质,胞液,重的和轻的突触膜部分。（２）大鼠大脑皮层突触体中ＣａＮ活力在出生后第２周和第３周出现高峰的平台期,这与突触发生的高峰期是一致的,在胞液和重的突     

用平板透明圈法测定延胡索酸酶活力

将黄色短杆菌培养在含有延胡索酶的平板培养基上,该菌产生的延胡索酸酶能转化延胡索乱Ｌ－苹果酸。用６Ｎ硫酸处理平板后,其菌落周围便会出现清晰的透明圈。     

生长光强对亚热带自然林两种木本植物稳定碳同位素比、细胞间CO2浓度和水分利用效率的影响

生长于１００％、４０％和１６％自然光下的荷木和黧蒴幼苗叶片稳定碳同位素比（δ１３Ｃ,－‰）,细胞间ＣＯ２浓度（Ｃｉ）和水分利用效率（ＷＵＥ）有一定的差别。１６％和４０％弱光下,δ１３Ｃ的负值增加－０．５４Ｊ‰到－０．８９‰。Ｃｉ增大８．１－１３．２μｉＬ－１,ＷＵＥ则下降６－２４％。结果表明,叶片的水分和气体交换特性受生长光强的调节,叶片的δ１３Ｃ值可反映其生长过程中受光的强弱状况。     

微波处理对水稻种子萌发的影响（简报）

水稻种子经微波加热激或单以热激处理后,在相同处理温度（45℃）下,微波加热激处理显著促进芽活力和根活力,而单以45℃热激仅极显著促进根活力。表明在相同升温幅度下,微波处理和常规水浴热激处理的影响有明显区别。