滤膜法测定水中大肠菌群简便方法的研究

本研究方法为ＩＳＯ９３０８－１规定的滤膜法测定水中大肠菌群的方法,该方法操作简便只需分离和证实两步实验即可得出结果;分离培养基上的阴阳性菌落颜色分明,易于分辩;所用培养基不含致癌物质。本研究方法的准确度高,回收率的均值为９４７％,批内变异系数小于１０％,检出限为５００ｍｌ水样可检出１个ＣＦＵ,检出率是传统方法的３１倍。本研究还探讨了分离培养基的ｐＨ值对菌落颜色的影响。本研究内容经查新在国内尚无报道。     

“酶”一节教学演示实验

初中《生理卫生》第七章中“新陈代谢概述”一节没有实验,鉴于新陈代谢的概念比较抽象,同化作用和异化作用的变化过程非常复杂,包含了许多生物化学反应,而体内几乎所有的生化反应都是在不同的酶催化下进行的,即使学生对于酶的概念和作用特点能有所理解,但也比较抽象,教师在讲授这部分教材时,除了将酶与一般催化剂进行比较,指出酶“仅能影响化学     

shRNA沉默卵巢癌细胞SKOV-3的IDO基因表达在体外对NK细胞杀伤作用敏感性的影响

目的通过shRNA沉默吲哚胺2,3-双加氧酶（indoleamine2,3-dioxygenase,IDO）基因表达,研究IDO表达在体外对NK细胞杀伤能力的作用。方法 shRNA沉默IDO基因表达质粒和空白质粒分别稳定转染至人卵巢癌细胞SKOV-3,应用Western blot检测IDO在SKOV-3、SKOV-3/Mock和SKOV-3/shIDO细胞中的表达情况,用MTT试剂盒检测3组肿瘤细胞体外生长速度和对NK细胞杀伤作用的敏感性。结果 IDO蛋白在SKOV-3/shIDO细胞中表达被抑制,在SKOV-3和SKOV-3/Mock细胞中有表达。3组肿瘤细胞体外生长曲线比较差异无统计学意义（P〉0.05）。SKOV-3/shIDO细胞存活的百分比明显低于其他2组对照（SKOV-3和SKOV-3/Mock）细胞,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论本研究应用shRNA沉默IDO基因表达质粒稳定转染卵巢癌细胞SKOV-3,获得IDO无表达卵巢癌细胞SKOV-3/shIDO,结果显示抑制IDO表达对卵巢癌细胞体外生长速度无影响,但可增强卵巢癌细胞SKOV-3对NK细胞杀伤作用的敏感性。因此,IDO可以作为卵巢癌基因治疗的潜在新靶点,shRNA沉默IDO基因表达可以作为卵巢癌治疗的新方法。     

α1, 2-岩藻糖转移酶基因转导对人卵巢癌细胞RMG-I p38MAPK信号通路介导的凋亡的影响

以α1,2-岩藻糖转移酶基因转染前后卵巢癌细胞RMG-I、RMG-I-H为细胞模型,用细胞免疫荧光方法检测转染前后细胞p38MAPK和p-p38MAPK的细胞内定位,RT-PCR和Western blot方法从mRNA和蛋白质两个水平检测转染前后细胞p38MAPK表达的变化;以兔抗人IgG抗体处理组为对照,分别利用RT-PCR和Western blot方法检测Lewisy单克隆抗体处理前后RMG-I-H细胞p38MAPK mRNA和蛋白质表达水平的变化;以0.1%DMSO为对照,用流式细胞仪(FCM)检测p38MAPK特异性抑制剂SB203580处理后RMG-I-H凋亡比率的变化,并利用RT-PCR和Western blot方法检测caspase-3的mRNA和蛋白质水平的变化;用RT-PCR方法检测卡铂和SB203580处理后p38MAPK及caspase-3表达的变化.结果表明,RMG-I与RMG-I-H的p38MAPK蛋白主要定位在细胞质,p-p38MAPK蛋白定位在细胞核,转染后p38MAPK的mRNA水平明显高于转染前(P<0.05);Lewisy单克隆抗体处理后RMG-I-H细胞p38MAPK m...     

VEGF、HIF-1α、Vasohibin在子宫内膜腺癌血管生成中的作用及与预后的关系

目的通过研究血管内皮生长因子(vascular endometrial growth factor,VEGF)、缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)和vasohibin在正常子宫内膜(normal endometrium,NE)和子宫内膜样腺癌(endom-etrioid adenocarcinoma,EA)组织中的表达,探讨上述指标与间质微血管密度(microvessel density,MVD)、EA临床病理特性及预后的关系。方法采用免疫组化Envision二步法检测105例EA和20例NE组织中VEGF、HIF-1α、vasohibin和MVD的表达。分析各指标相互之间及与EA临床病理特性和预后间的关系。结果(1)EA组中,VEGF、HIF-1α和MVD的表达明显高于NE组(P0.05),vasohibin的表达明显低于NE组(P0.01)。(2)VEGF、HIF-1α和MVD的表达与EA的手术病理分期相关(P0.05)。(3)在EA组,除vasohibin外,VEGF、HIF-1α和MVD三者的表达量两两间均呈正相关(P0.05)。(4)98例有完整随访资料患者的5年生存率为87.8%,VEGF、HIF-1α及vasohibin表达阳性组与阴性组5年生存率无显著性差异;MVD高表达组5年生存率明显低于MVD低表达组(P0.05)。结论异常增生的微血管与EA发生、发展及预后有关。VEGF、HIF-1α、vasohibin三者间动态平衡的失调促进了EA组织中的微血管生成,重建三者间的正常调节关系,刺激vasohibin的表达,可能是EA治疗的一个靶点。     

泾河流域上游土石山区和黄土区森林覆盖率变化的水文影响模拟

泾河流域上游是黄土高原的重要水源地和退耕还林工程区,在较大空间尺度上定量评价区内森林覆盖增加的水文影响对科学指导林业生态环境建设、保障区域水安全和可持续发展均有重要意义。为了在尽量排除地形、土壤、气候等作用的基础上定量评价森林的影响,将泾河上游划分为土石山区和黄土区,分别制定了多种森林恢复情景,利用分布式流域生态水文模型(SWIM)模拟评价了森林覆盖率及其空间分布变化对流域年蒸散量、年产流量、年地下水补给量、年土壤深层渗漏量及日径流洪峰的影响。土石山区模拟结果表明,增加森林覆盖将增加流域蒸散和减少流域产流,如现有森林覆盖(占全流域面积比例为13.8%)情景与现有森林变为草地(占全流域面积比例为0)情景相比时,流域年蒸散量从445.4 mm变为427.7 mm(减少了17.4 mm和4%);年产流量从42.4 mm变为53.5 mm(增加了11.1 mm和26.3%),年地下水补给量从61.6 mm变为76.9 mm(增加了15.3 mm和24.8%),年深层渗漏量从72.9 mm变为88.3 mm(增加了17.7 mm和24.3%);平均森林覆盖率每增加10%,导致流域年蒸散量增加12.8 mm,年产流量减少8.0 mm,年地下水补给量减少11.1 mm。在比较干旱和土层深厚的黄土区,增加森林覆盖将同样增大流域蒸散和减少流域产流,但变化幅度明显小于降水相对丰富和土层浅薄的土石山区,平均森林面积增加10%导致流域年蒸散量增加9.0 mm,年产流量减少4.5 mm,年地下水补给量减少8.8 mm;此外,在较缓坡面造林的水文影响大于较陡坡面造林。从森林水文影响的年内变化来看时,森林覆盖率升高的水文影响在土石山区和黄土区也有差别,如土石山区5—7月份的蒸散显著增加,5—10月份的深层渗漏均有减少;而黄土区是蒸散量在5—10月均有增加,深层渗漏在7—10月份显著减少。另外,土石山区森林覆盖率增加对日径流峰值的影响不显著,而黄土区则能明显削弱,这可能主要是因土石山区的高石砾含量土壤的渗透性能明显高于黄土区的黄土,而黄土区的森林能够明显改善土壤入渗性能和减少地面径流形成。     

NK4基因转染对人卵巢癌细胞SKOV-3生物学特性的影响

目的 通过在人卵巢癌细胞SKOV-3中转染NK4基因表达片段,研究NK4对人卵巢癌的治疗作用,从而验证NK4可作为卵巢癌潜在的基因治疗新策略.方法 用NK4和荧光霉素表达质粒分别稳定转染人卵巢癌细胞SKOV-3.用West-ern blot检测细胞培养基中NK4蛋白表达,以及经不同培养基(SKOV-3、SKOV-3/LUC和SKOV-3/NK4培养上清)培养后SKOV-3细胞中c-Met和磷酸化-c-Met的表达.用MTT试剂盒绘制细胞生长曲线.用细胞划痕试验检测NK4对细胞转移的作用.结果 在SKOV-3/NK4培养基中有NK4蛋白表达,对照(SKOV-3,SKOV-3/LUC)细胞中无表达.磷酸化-c-Met在SKOV-3/NK4培养基培养的SKOV-3细胞中被抑制,而在对照(SKOV-3,SKOV-3/LUC)细胞培养基培养的SKOV-3细胞中正常表达.c-Met表达在各组差异无统计学意义.三种细胞体外生长曲线差异无统计学意义(P＞0.05).细胞划痕试验表明SKOV-3/NK4划痕区域的细胞个数明显少于SKOV-3和SKOV-3/LUC细胞.结论 NK4蛋白在SKOV-3/NK4细胞培养基中大量分泌,NK4能抑制人卵巢癌细胞c-Met受体磷酸化,并能抑制卵巢癌细胞体外活动能力,为应用NK4作为卵巢癌基因治疗方法提供了研究基础.     

PVB与PF方案对局部晚期宫颈癌PTEN、VEGF和CD105表达的影响

目的:比较PVB与PF方案对局部晚期宫颈癌患者PTEN、VEGF和CD105表达的影响。方法:选取我院妇科收治的局部晚期宫颈癌患者150例,随机分为两组,其中PVB组75例予顺铂、长春新碱、博来霉素化疗;PF组75例予博来霉素、顺铂配合5-氟尿嘧啶治疗。观察并对比治疗前后患者临床疗效及患者癌组织PTEN、VEGF表达阳性率、CD105抗体标记的肿瘤MVD值等指标。结果:1治疗后两组PTEN、VEGF表达阳性率均有所改善,与PVB组(76.3%)比较,PF组PTEN表达阳性率(88.3%)明显升高,差异有统计学意义(P0.05);与PVB组(15.3%)比较,PF组VEGF表达阳性率(6.7%)明显降低,差异有统计学意义(P0.05);2治疗后两组MVD值均有所改善,与PVB组(38.93±9.89)比较,PF组MVD值(35.61±10.33)明显降低,差异有统计学意义(P0.05);3治疗后,与PVB组(76.67%)比较,PF组的有效率(86.67%)明显较高,差异有统计学意义(P0.05)。结论:与PVB方案相比,PF方案能够使局部晚期宫颈癌患者PTEN表达水平升高,降低VEGF和CD105表达水平,临床疗效更确切。     

渗透作用实验的拓展

关于生物膜的选择透过性 ,高中教材设置的渗透作用示意图和实验九《观察植物细胞的质壁分离与复原》 ,都是证明生物膜与外界溶液确实发生了渗透作用 ,生物膜的确是一个选择透过性膜 ,正如教科书上提到的 ,水分子可以自由通过 ,细胞要选择吸收的离子和水分子也可以通过 ,而其他的离子、小分子 (如蔗糖分子 )和大分子 (蛋白质 )则不能通过 ,其实关于渗透作用演示实验 ,已有不少老师提出很多好的改进建议。笔者认为 ,书上的渗透作用示意图和实验九《观察植物细胞质壁分离与复原》都使用的是蔗糖 (0 .3g/ml) ,这固然是证明生物膜能选择透过某些…