全文获取类型
收费全文 | 2886篇 |
免费 | 148篇 |
国内免费 | 481篇 |
专业分类
3515篇 |
出版年
2024年 | 3篇 |
2023年 | 44篇 |
2022年 | 51篇 |
2021年 | 62篇 |
2020年 | 59篇 |
2019年 | 115篇 |
2018年 | 98篇 |
2017年 | 64篇 |
2016年 | 88篇 |
2015年 | 98篇 |
2014年 | 134篇 |
2013年 | 204篇 |
2012年 | 138篇 |
2011年 | 197篇 |
2010年 | 160篇 |
2009年 | 193篇 |
2008年 | 201篇 |
2007年 | 197篇 |
2006年 | 231篇 |
2005年 | 173篇 |
2004年 | 164篇 |
2003年 | 167篇 |
2002年 | 131篇 |
2001年 | 82篇 |
2000年 | 79篇 |
1999年 | 69篇 |
1998年 | 54篇 |
1997年 | 52篇 |
1996年 | 26篇 |
1995年 | 28篇 |
1994年 | 32篇 |
1993年 | 14篇 |
1992年 | 19篇 |
1991年 | 12篇 |
1990年 | 13篇 |
1989年 | 9篇 |
1988年 | 7篇 |
1987年 | 6篇 |
1986年 | 8篇 |
1985年 | 12篇 |
1984年 | 9篇 |
1983年 | 4篇 |
1982年 | 6篇 |
1981年 | 2篇 |
排序方式: 共有3515条查询结果,搜索用时 0 毫秒
61.
62.
63.
Yoshinori Sasaki Takashi Tsujii Shigeki Takeda Hideru Obinata Takashi Izumi Keiichi Yamada Ryoichi Katakai 《Journal of peptide science》2008,14(12):1251-1258
A combinatorial peptide library contains an enormous combination of amino acid sequences and drug candidates, but an effective screening strategy to identify a variety of bioactive peptides has yet to be established. In this article, a random hexapeptide library was screened to identify novel peptide ligands for a 5-oxo-ETE receptor (OXER), which is a G-protein-coupled receptor for bioactive lipids, by using an OXER-Gi1alpha fusion protein. We successfully identified 2 hexapeptides-Ac-HMQLYF-NH2 and Ac-HMWLYF-NH(2)-that exhibited agonistic activity. Although the corresponding affinities were relatively low (EC50 values of 146 and 6.7 microM, respectively), the activities were confirmed by other independent cell-based assay methods, namely, intracellular calcium mobilization and cell chemotaxis. This study demonstrates that a combinatorial peptide library may be screened using a [35S]GTPgammaS binding assay with G-protein-coupled receptor (GPCR)-Galpha fusion proteins, in general, and that of peptide ligands can be obtained even for nonpeptide receptors. 相似文献
64.
65.
蛋白质核心设计的序列组合文库筛选方法 总被引:1,自引:1,他引:1
本文提出一种新的蛋白质序列组合文库筛选方法,异型自系统最优法,用于从头设计蛋白质核心。经λ-阻遏蛋白、噬菌体434CRO蛋白、白介素-4、硫氧还蛋白、泛肽等的检验,表明此方法用于从头设计蛋白质的核心是可行的。 相似文献
66.
Smads家族是最新发现的TGF-β信号转导途径中一个重要的新基因家族,SMAD2属于受体激活的SMADs。Smad2在某些肿瘤中发生突变,是一种可能的肿瘤抑制基因。Smad2基因完全剔除小鼠在胚胎期E6.5天死亡,为了研究Smad2在成体各组织器官及肿瘤发生中的可能作用,构建了Smad2条件基因剔除载体,将LoxP置于Smad2基因组序列C末端功能域两侧,并在组成型表达Cre重组酶的大肠杆菌中检测了LoxP位点的功能,该载体的构建为进行Smad2组织特异性基因剔除研究了奠定了基础。 相似文献
67.
半抗原特异性抗体的筛选及亲和力成熟 总被引:1,自引:0,他引:1
噬菌体抗体库技术的出现开创了一条便捷的基因工程抗体生产路线,为小分子半抗原抗体的制备提供了一条新途径,具有极大的应用潜力,但得到的抗体片段的亲和力普遍较全分子差,需要优化筛选策略及抗体的体外亲和力成熟来解决这一问题。 相似文献
68.
Tomoya Matsunobu Kiyoyuki Torigoe Masaki Ishikawa Ashok B. Kulkarni Yoshihiko Yamada 《Developmental biology》2009,332(2):325-338
TGF-β has been implicated in the proliferation and differentiation of chondrocytes and osteoblasts. However, the in vivo function of TGF-β in skeletal development is unclear. In this study, we investigated the role of TGF-β signaling in growth plate development by creating mice with a conditional knockout of the TGF-β type I receptor ALK5 (ALK5CKO) in skeletal progenitor cells using Dermo1-Cre mice. ALK5CKO mice had short and wide long bones, reduced bone collars, and trabecular bones. In ALK5CKO growth plates, chondrocytes proliferated and differentiated, but ectopic cartilaginous tissues protruded into the perichondrium. In normal growth plates, ALK5 protein was strongly expressed in perichondrial progenitor cells for osteoblasts, and in a thin chondrocyte layer located adjacent to the perichondrium in the peripheral cartilage. ALK5CKO growth plates had an abnormally thin perichondrial cell layer and reduced proliferation and differentiation of osteoblasts. These defects in the perichondrium likely caused the short bones and ectopic cartilaginous protrusions. Using tamoxifen-inducible Cre-ER™-mediated ALK5-deficient primary calvarial cell cultures, we found that TGF-β signaling promoted osteoprogenitor proliferation, early differentiation, and commitment to the osteoblastic lineage through the selective MAPKs and Smad2/3 pathways. These results demonstrate the important roles of TGF-β signaling in perichondrium formation and differentiation, as well as in growth plate integrity during skeletal development. 相似文献
69.
从cDNA文库中筛选分析阳性克隆的简便方法 总被引:2,自引:0,他引:2
cDNA文库中阳性克隆的传统筛选分析法既费时又费力.利用微波炉加热的方法,简化了原位杂交中噬菌斑裂解、DNA变性与固定的程序;进一步运用PCR扩增技术,特异扩增克隆载体中插入的cDNA片段,加快了阳性克隆分析的进程. 相似文献
70.
极长链多不饱和脂肪酸(very long chain polyunsaturated fatty acids,VLC-PUFAs)是哺乳动物视网膜、睾丸等极少数组织中特有的脂肪酸,其生物合成的关键酶为极长链脂肪酸延长酶4(very long chain fatty acid elongase 4,Elovl4)。建立组织特异性敲除Elovl4基因的动物模型有利于深入研究VLC-PUFAs的生物学功能,因此,本研究基于Cre/loxP系统,先分别构建了Stra8-Cre小鼠和Elovl4 floxed小鼠,通过杂交获得(Elovl4[flox/+],Stra8-Cre)杂合子基因敲除小鼠,再选择雌鼠与Elovl4 floxed纯合子雄鼠即Elovl4 [flox/flox]雄鼠杂交,通过基因型鉴定筛选获得(Elovl4[flox/flox], Stra8-Cre)纯合子小鼠。利用RT-PCR、qRT-PCR、Western blotting、免疫组化和免疫荧光检测Elovl4在睾丸组织中的敲除效率,结果表明,无论是杂合子还是纯合子基因敲除小鼠,其睾丸组织中Elovl4的表达在mRNA及蛋白水平显著下调,但其他组织未受影响。本研究成功构建了睾丸组织特异性敲除Elovl4基因小鼠,为后续研究VLC-PUFAs对雄性小鼠生殖功能的影响及相关分子机制提供可靠的动物模型。 相似文献