Construction and packaging of pseudotype retrovirus containing human N—ras cDNA antisense sequence and its biological effects on human hepatoma cells

N-ras is one of the transforming genes in human hepatic cancer cells.It has been found that N-ras was overexpressed at the mRNA and protein level in hepatoma cells.In order to explore the biological roles of N-ras in human hepatic carcinogenesis and the potential application in control of cancer cell growth,a preudotype retrovirus containing antisense sequence of human N-ras was constructed and packaged.A recombinant retrovirus vector containing antisense or sense sequences of N-ras cDNA was constructed by pZIP-NeoSV(X)1.The pseudotype virus was packaged ang rescued by transfection and infection in PA317 and ψ 2 helper cells.It has been demonstrated that the pseudotype retrovirus containing antisense N-ras sequence did inhibit the growth of human PLC/PRF/5 hepatoma cells accompanied with inhibition of p21 expression,while the retrovirus containing sense sequence had none.The pseudotype virus had no effect on human diploid fibroblasts.     

自病人气管灌洗物中分离出一株嗜肺性军团杆菌

本文报道了用自制的蓝藻军团杆菌选择性培养基从病人气管灌洗物中分离到一株嗜肺性军团杆菌(Legionella pneumophila)并与BCYE及硝酸铁琼脂平板等培养基作了比较,发现该菌在蓝藻军团杆菌选择性培养基上生长最好。生化、动物试验;细菌学、血清学的鉴定和诊断及临床治疗效果观察均与军团病杆菌(LDB)的鉴定标准相符合,证明经分离得的是一株嗜肺性军团杆菌血清6型菌株。     

微生物在水环境中的存活和生长

在灭菌自来水模拟水体中,研究了7种细菌的存活和生长规律。Klebsiella pneumo-niae,Enterobacter aerogenes,Agrobacterium tumefatciens,在7天内平板计数降至0,而水体中镜检细菌总数(AODC)和活菌直接计数(DVC)结果无大变化,说明细菌已变成活的非可培养状态。Micrococcus,flavus 和 Streptococcus faecalis 的可培养菌数也可降至0。Pseudomonas sp.在48小时内由10~5降至10~2cfu/ml,随即升至10~6 cfu/ml 并持续到实验终了(41天)。Bacillus subtilis 在48小时平板计数降至10~2cfu/ml 并维持在该水平至实验结束(38天)。研究结果表明仅用涂布平板法检测多种细菌在水环境中的生存和分布是不合适的。     

水分亏缺诱导的氧化胁迫和植物的抗氧化作用

简要介绍了水分胁迫下植物体内O2、H2O2、OH及1O2等活性氧的产生及其检测方法,评述了水分胁迫下植物内源抗氧化系统的作用,并对有关方面的研究作了展望。     

一氧化氮与痛觉调制

大量证据表明一氧化氮（ＮＯ）参与外周及中枢水平的痛觉调制：在外周,ＮＯ表现为致痛和镇痛双重作用;在中枢,ＮＯ不但可以促进脊髓水平痛觉过敏的形成和发展,而且参与脑内的致痛作用。     

非豆科植物根瘤放线菌研究进展

非豆科植物根瘤放线菌研究进展吴清平,周小燕,蔡芷荷,张华云,张菊梅（广东省微生物研究所,广州５１００７０）１放线菌根瘤的研究概况木本双子叶植物根瘤并不像豆科植物根瘤那样为人们所熟悉,它是土壤放线菌与各类木本双子叶植物根系之间共生,形成具有固氮作用的瘤...     

细小病毒非结构蛋白转基因小鼠模型建立

将小鼠乳腺癌病毒启动子控制的细小病毒非结构蛋白基因(长5.7kb)氯化铯超速离心,纯化透析后用显微注射法导入C57BL/SJL F_1小鼠受精卵雄核,植入假孕母鼠输卵管,得成活小鼠15只。抽取鼠尾DNA,对其中10只小鼠作PCR和southern blot鉴定,其中4只(40％)整合有目的基因。对首建者B_6()的8只子代小鼠鉴定,3只(37.5％)整合有目的基因。说明导入的目的基因能传代。     

黑曲霉糖化酶高产和低产菌株糖化酶基因调控区的克隆及其分析比较

以PCR合成的糖化酶高产菌株黑曲霉(Asp. Niger)T21糖化酶基因5’近端非编码区588bp(EcoRI-BamHI)的序列为探针,从T21染色体DNA中克隆到近2.0kb的糖化酶基因5’端非编码区序列,并以此序列为探针从糖化酶低产菌株黑曲霉3.795(T21的诱变出发株)的染色体DNA中克隆到1.5kb的糖化酶基因5’端非编码区序列。该二序列的分析测定结果表明,其结构特征与文献报道的黑曲霉糖化酶基因5’端非编码区的基本一致,被称为“核心启动子”(Core promoter)的TATAAAT框及GCAAT框,分别在翻译起始点的-109bp及-178bp处。此外,在曲霉amdS,amyB基因中已发现有调控功能的CCAAT序列存在于-449bp和-799bp处。高产和低产菌株糖化酶基因5’端非编码区序列的分析比较结果表明,有9个部位的碱基发生了变化。此实验结果为进一步研究黑曲霉糖化酶基因在转录水平上的调控规律打下了基础。     

生化他感作用的种群生态学意义

对生化他感作用的种群生态学意义,包括种群动态、种群关系、种群进化的影响,作了概述。     

天然型与非天然型脱落酸的生物活性比较

采用新方法精制脱落酸（ＡＢＡ）异构体试样,提高了（Ｓ）－（＋）－ＡＢＡ与（Ｒ）－（－）－ＡＢＡ两对映体纯度。抑制生长试验和残留量分析以及气孔闭合试验表明：天然型（Ｓ）－（＋）－ＡＢＡ活性显著高于非天然型（Ｒ）－（－）－ＡＢＡ或（ＳＲ）－（±）－ＡＢＡ。抑制莴苣种子发芽５０％的活性强度,（Ｓ）－（＋）－ＡＢＡ约是（Ｒ）－（－）－ＡＢＡ的５倍,（ＳＲ）－（±）－ＡＢＡ介于两者之间。抑制萝卜下胚轴生长试验,最显著有效期为２～６ｄ,生理作用期约为一周,（Ｓ）－（＋）－ＡＢＡ活性是（Ｒ）－（一）－ＡＢＡ的３．５倍。鸭跖革气孔闭合试验,（Ｓ）－（＋）－ＡＢＡ活性比（Ｒ）－（－）－ＡＢＡ高１倍。