声触诊组织定量技术鉴别诊断甲状腺微小癌的价值

目的：声触诊组织定量技术（VTQ）是一种新的弹性成像方法,能够定量、无创地评价组织硬度信息。本文的研究目的是探讨声触诊组织定量技术在鉴别诊断甲状腺微小癌（TMCs）中的应用价值。方法：应用VTQ 技术对110 例共114 个结节（最大直径≤1 cm）进行检测,获取并分析结节及周边甲状腺组织的横向剪切波速度（SWV）。利用ROC曲线对测量结果进行分析,评价VTQ技术的诊断价值并确定最佳诊断界值。结果：114 个结节中良性结节32 个（30 个为结节性甲状腺肿,2 个为腺瘤）,恶性结节82 个（均为乳头状癌）。甲状腺良性结节及周边甲状腺组织的SWV 平均值分别为（2.30± 0.49） m/s、（2.08± 0.40） m/s,恶性结节及周边甲状腺组织的SWV 平均值分别为（3.12± 0.97） m/s、（2.06± 0.46） m/s。恶性结节的SWV 值明显高于良性结节,两者之间差异具有统计学意义（t=5.911,P＜0.0001）;恶性结节与其周边甲状腺组织比较有显著差异（P＜0.0001）;而良性结节与其周边甲状腺组织无统计学差异（P＞0.05）。ROC曲线下面积为0.833,以2.30 m/s诊断界值点时,敏感度、特异度分别为90.2%、62.5%。结论：甲状腺恶性结节的SWV 值明显高于良性结节。VTQ 技术能够提供组织硬度信息,在鉴别诊断甲状腺微小癌方面具有一定的临床应用价值。     

Molecular cloning,expression, and anti-tumor activity of a novel serine protease from Arenicola cristata

Arenicola cristata, a marine annelid, is a wellknown and prized traditional Chinese medicine. However, the serine protease gene of A. cristata has not been cloned yet. In this study, a novel protease ofA. cristata was cloned, sequenced, and expressed in Escherichia coli, and the functions of this recombinant protease were also investigated. The whole complementary DNA （cDNA） of this novel protease was of 980 bp in length and consisted of an open reading frame of 861 bp encoding 286 aa. Sequence analysis of the deduced amino acid sequence revealed that the protease belongs to the serine protease family. The active enzyme of the pro posed A. cristata protease is composed of a signal peptide, a propeptide, and a mature polypeptide. The molecular weight of the recombinant mature protein was 26 kDa after overexpression in E. coli. The recombinant pro tein significantly inhibited cell growth and induced cell apoptosis of esophageal squamous cell carcinoma （ESCC） in vitro, and reduced tumorigenicity in vivo. Furthermore, administration of the recombinant protein led to the activa tion of caspase9 as well as downregulation of Mcl1 and Bcl2. Taken together, our findings indicated that the recom binant serine protease ofA. cristata could inhibit ESCC cell growth by mitochondrial apoptotic pathway and might act as a potential pharmacological agent for ESCC therapy.     

Silencing RhoA inhibits migration and invasion through Wnt/β-catenin pathway and growth through cell cycle regulation in human tongue cancer

Ras homolog gene family member A （RhoA） has been iden- tified as a critical regulator of tumor aggressive behavior. In this study, we assessed the role of RhoA in the mechan- isms underlying growth, migration, and invasion of squa- mous cell carcinoma of tongue （TSCC）. Stable RhoA knockdown of TSCC cell lines SCC-4 and CAL27 were achieved using Lentiviral transfection. The effects of RhoA depletion on cell migration, invasion, and cell proliferation were determined. The possible underlying mechanism of RhoA depletion on TSCC cell line was also evaluated by determining the expression of Galectin-3 （Gal-3）, β-catenin, and matrix metalloproteinase-9 （MMP-9） in vivo. Meanwhile, the underlying mechanism of TSCC growth was studied by analysis of cyclin D1/2, p21clel/WArl, and p27 kiap 1 protein levels. Immunohistochemical assess- ments were performed to further prove the alteration of Gal-3 and β-catenin expression. We found that, in mice injected with human TSCC cells in the tongue, RhoA levels were higher in primary tumors and metastasized lymph nodes compared with those in the normal tissues. Silencing of RhoA significantly reduced the tumor growth, decreased the levels of Gai-3, β-catenin, MMP-9, and cyclin D1/2, and increased the levels of p21 CIPI/WAFI and p27Kiap 1. In vitro, RhoA knockdown also led to inhibition of cell migration, in- vasion, and proliferation. Our data suggest that RhoA plays a significant role in TSCC progression by regulating cell migra- tion and invasion through Wnt/β-catenin signaling pathway and cell proliferation through cell cycle regulation, respecti- vely. RhoA might be a novel therapeutic target of TSCC.     

siRNA下调EZH2 基因对肾癌细胞系769-P增殖的影响

目的：运用小干扰RNA下调果蝇zeste 基因增强子人类同源物（enhancer of zeste homolog 2,EZH2）在肾癌细胞系769-P 中 的表达,明确其对肾癌细胞增殖的影响。方法：将处于对数生长期769-P 细胞分为实验组（experiment group）、阴性对照组(negative group)、空白对照组（blank group）,合成靶向EZH2 基因的小干扰RNA片段（EZH2-siRNA）和无效序列片段后,通过脂质体介导分 别转染至实理组和阴性对照组,空白对照组未做任何处理。以qRealtime-PCR 检测EZH2 基因mRNA 水平的变化情况,以MTT 法检测各组细胞增殖变化;流式细胞术（FCM）检测转染后细胞周期变化情况。结果：实理组中EZH2 在mRNA 表达水平明显受 抑制;MTT实验中第4 天始,实验组中769-P 细胞的增殖能力开始受抑制,第5 天时实验组细胞抑制更明显,与阴性对照组和空 白组比较差异有统计学意义（P < 0.05）。siRNA 转染后实验组中G0/G1 期细胞比例明显增多(81.32± 3.14)%,与阴性对照组 (44.13± 1.52)%和空白对照组(45.71± 2.32)%差异有统计学意义。结论：EZH2-siRNA 可有效下调并抑制肾癌细胞769-P的增殖, EZH2在肾癌的发生、发展中发挥了重要作用,为下一步研究肾癌基因治疗提供了理论支持。     

As2O3干预口腔鳞癌A431 细胞EGFR 表达的研究

目的：研究三氧化二砷（As2O3）对人口腔鳞癌A431细胞生长的抑制作用,探讨其抗肿瘤的机制。方法：合成特异性靶向到肿 瘤细胞表面表皮生长因子受体（EGFR）的近红外荧光分子对比剂EGF-Cy5.5,验证试剂合成的靶向特异性。口腔鳞状细胞癌 A431 细胞系暴露于浓度分别为0 滋M,0.5 滋M,2.5 滋M和5.0 滋M的三氧化二砷溶液中0,24 h,48 h和72 h。共聚焦显微镜、流式 细胞仪及免疫组化证实EGFR的表达水平,上述实验均测量三次,结果取平均值。结果：EGF-Cy5.5 靶向荧光对比剂的标记率为 68%~70 %。对比对照组,越高浓度的三氧化二砷处理的肿瘤细胞其获得的细胞荧光信号强度越小,这与药物浓度越高细胞表面表 达EGFR 的量越少相一致。流式细胞仪显示,在72 小时,作用于细胞的三氧化二砷药物浓度分别为0.5 滋M,2.5 滋M,和5.0 滋M, 其相对应获得的细胞EGFR 表达量分别为57.28± 3.2 %(P<0.05), 29.91± 2.2 %(P<0.01) 和10.73± 2.4 %(P<0.01),明显低于对照 组的细胞EGFR 表达量74.42± 1.8 %,（P <0.05)。结论：本研究应用近红外荧光分子成像的方法体外检测口腔鳞状细胞癌A431 的 EGFR表达水平,实验证明三氧化二砷对其EGFR 具有明显的抑制作用,且抑制作用具有时间- 剂量依赖性。     

中国肝细胞癌患者TACE术后死亡原因分析(英文)

目的:通过探讨中国肝细胞癌患者肝动脉化疗栓塞术(TACE)术后并发症及死亡原因,来提高临床治疗效果,并积累治疗经验。方法:通过联合检索CBM及CNKI上从1994年1月到2008年9月的关于中国肝细胞癌患者行TACE术后出现并发症的相关文章,分析总结肝细胞癌患者TACE术后死亡的原因及特点。结果:中国肝细胞癌患者TACE术后并发症较为危重,致死率较高,死亡原因有84%是肝功能衰竭、上消化道出血及肝癌破裂出血,且死亡病例发生在术后1月内的占78.7%,因此大多是早期死亡。结论:中国肝细胞患者TACE术后死亡原因主要是肝功能衰竭、上消化道出血及肝癌破裂出血,且术后死亡常为早期死亡,因此TACE术后严重并发症可直接影响患者的预后情况,我们需要提高对TACE术选择时机的重视程度,规范介入治疗手段和流程,尽量避免和减少严重并发症的发生。     

腮腺腺样囊性癌中PTEN、MDM2表达

目的:研究腮腺腺样囊性癌组织中抑癌基因PTEN、癌基因MDM2蛋白表达,探讨PTEN、MDM2在腮腺腺样囊性癌中两者之间的相关性,为将来临床应用提供参考。方法:选取腮腺腺样囊性癌手术存档石蜡标本30例,另取10例腮腺腺样囊性癌癌旁正常组织石蜡标本作为对照组,采用免疫组化SP法检验PTEN、MDM2表达情况。结果:腮腺腺样囊性癌和癌旁正常组织中PTEN蛋白的阳性率分别为20%(6/30)和70%(7/10),二者存在显著性差异(P0.05)。MDM2蛋白在两种组织中阳性率分别为66%(20/30)和20%(2/10)(P0.05),二者存在显著性差异(P0.05)(r=-0.657),在腮腺腺样囊性癌中PTEN、MDM2的表达负相关。结论:PTEN、MDM2蛋白异常表达在腮腺腺样囊性癌的发生发展中起重要作用。     

MS-275联合平阳霉素对Tca-8113细胞生长和凋亡的影响

目的:观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACIs)MS-275联合抗生素类化疗药物平阳霉素(PYM)对口腔鳞状癌细胞Tca-8113的生长及凋亡的影响。方法:以体外培养的口腔鳞状细胞癌Tca-8113细胞为研究对象,应用MTT法检测不同浓度(0、1、2、4、8μmol/L)MS-275、(0、0.05、0.1、0.2、0.4μmol/L)平阳霉素(PYM)单独和联合用药对Tca-8113细胞增殖活性的影响;Annexin-V-FITC/PI双染流式细胞术定量检测细胞的凋亡情况。结果:不同浓度(1、2、4、8μmol/L)MS-275和(0.05、0.1、0.2、0.4μmol/L)PYM均可显著抑制Tca-8113细胞的增殖,并促进其凋亡,且呈浓度依赖性(P0.05)。4μmol/L MS-275和0.2μmol/L PYM联合应用时,其抑制Tca-8113细胞增殖和促进其凋亡的作用均显著高于单独应用MS-275或PYM(P0.05)。结论:MS-275能有效增强口腔鳞状细胞癌Tca-8113细胞对平阳霉素(PYM)的敏感性,体外实验中呈现较好的抗肿瘤效应。     

DEC1-mRNA在肝癌患者血清中的表达和手术预后的关系

目的:研究DEC1在肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)患者血清中的表达水平及其临床意义。方法:收集60例HCC患者,30例正常人,30例慢性肝炎患者,30例慢性肝硬化患者血清标本。采用实时荧光定量RT-PCR(RT-PCR)检测血清DEC1的表达情况。分析血清DEC1的表达水平与AFP相关性。探讨血清DEC1的表达水平与HCC手术预后的关系。结果:肝癌患者血清DEC1明显高于正常人、慢性肝炎和慢性肝硬化患者(P0.05)。皮尔森相关分析结果显示HCC患者血清DEC1的表达与血清AFP水平是呈正相关的。Kaplan-Meier结果显示血清DEC1低表达组术后的复发转移率显著低于高表达组,其术后生存率也显著高于高表达组(P0.01)。结论:DEC1在肝癌者血清中高表达,不仅可能成为HCC诊断的标记物,且其血清表达水平也有助于HCC临床预后的评估。