幽门螺杆菌napA基因在乳酸菌中的表达及免疫原性分析

为在乳酸菌中表达幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,H.pylori）中性粒细胞激活蛋白(NAP),口服免疫小鼠后检测其免疫原性。在实验中利用了分子克隆技术构建携带nap基因的重组原核表达质粒pNICE:secnap,将重组质粒转化乳酸菌NZ9000株,筛选鉴定阳性菌落,诱导表达的NAP蛋白用SDSPAGE和Western blot进行鉴定。将雌性ICR（CV级）小鼠随机分为4组,分别用PBS、携带空质粒的乳酸菌、携带pNICE:secnap的乳酸菌、灭活的H.pylori 灌胃。免疫7次后检测其特异性IgG和IgA的产生。成功扩增了nap基因并构建了重组原核表达质粒pNICE:secnap,转化乳酸菌NZ9000后经nisin诱导可表达Mr约17kDa的重组蛋白,表达量约占菌体总蛋白量的9.5%,表达的蛋白能与兔抗H.pylori 血清特异性反应,具有良好的免疫原性。携带pNICE:secnap质粒的乳酸菌刺激产生的IgG水平明显高于携带空质粒组,与灭活H.pylori组没有明显的差异,但其刺激产生的IgA水平明显高于其他组。以上结果说明表达NAP蛋白的乳酸菌口服免疫小鼠后,能够刺激小鼠产生特异的IgG和IgA,对幽门螺杆菌疫苗的研究开发具有理论意义。为乳酸菌作为抗原递送载体的研究和H.pylori口服疫苗的开发提供了一定的实验基础。     

有限元法计算各向异性介质球头模型电位分布

在脑电正问题研究中,脑神经元所产生的电活动可用电流偶极子来模拟.本文提出把大脑看作各向异性介质球,即同时考虑电容效应、电导效应对脑内电流偶极子产生的电位的影响,并用有限元法推导出偶极子在各向异性介质球模型中的电位分布计算公式.结果表明介质的电容效应对电位分布是有影响的,反映了大脑活组织电特性,对外来不同频率的信号刺激有不同的响应.同时有限元法对大脑内某一区域内电位分布求解表明,测量较深层组织的电特性变化敏感的特点,可获得更多的测量信息.     

芍药黄芩乳膏的临床前制备工艺研究

目的:探讨芍药黄芩乳膏的提取工艺.方法:以浸膏得率和芍药苷含量为考察指标,采用正交试验法,考察浸泡时间、加水量、提取次数、提取时间4个因素对提取工艺的影响.结果:最佳提取工艺为A3B3C3D2即药材加水10倍量,浸泡时间为1.5h,提取3次.提取时间为1.5h.结论:正交试验优选的芍药黄芩乳膏的提取工艺快速、准确、简便.     

小鼠腹腔巨噬细胞的分离与培养

目的:建立一种小鼠腹腔巨噬细胞分离的简便方法,为低强度激光照射对巨噬细胞功能的影响研究提供实验细胞.方法:以无血清的RPMI-1640培养液灌洗小鼠腹腔,分离获取小鼠腹腔巨噬细胞,在含10%小牛血清的RPMI-1640培养液中培养.采用倒置显微镜观察细胞形态,台盼蓝染色计算存活率,瑞氏染色计算纯度.结果:获得高纯度的巨噬细胞,具备巨噬细胞的形态特征.结论:本法是一种简便实用的分离小鼠腹腔巨噬细胞的方法.     

应用RNA干扰技术调节大鼠c-jun基因的表达

目的:应用RNA干扰(RNAi)技术调节大鼠c-jun基因在Cos-7细胞中的表达.方法:分别构建大鼠c-jun基因的RNA干扰载体和真核表达GFP(绿色荧光蛋白)载体,将两者共转染Cos-7细胞,镜下观察大鼠C-Jun-GFP融合蛋白的表达,应用Western blot方法检测抑制效率.结果:酶切和测序结果表明,大鼠c-jun基因的RNA干扰载体和真核表达GFP载体构建成功,镜下及Western blot共转染结果均显示随着RNA干扰载体浓度的增加C-Jun-GFP融合蛋白表达量逐渐减少.结论:在Cos-7细胞中应用RNAi技术成功调节大鼠c-jun基因的表达.     

JEG-3细胞分泌孕激素与HLA-G mRNA表达的相关性研究

目的:探讨JEG-3细胞自身分泌孕激素与其HLA-G mRNA表达的相关性,为进行滋养叶细胞HLA-G分子表达的调控研究提供线索和依据.方法:培养JEG-3细胞,在不同时点(1,2,3,4,6,12,24h)收集细胞和培养上清液,分别采用实时定量PCR方法和EIA方法测定JEG-3细胞的HLA-G mRNA的表达及孕激素的浓度.结果:JEG-3细胞培养上清液中孕激素浓度与JEG-3细胞HLA-G mRNA表达的强度随时间进程具有相似变化趋势,经Spearman等级相关分析,JEG-3细胞自身孕激素的分泌与其HLA-G mRNA的表达量呈显著正相关(r=0.964,P＜0.05).结论:JEG-3细胞孕激素的分泌与其HLA-GmRNA的表达量具有高度相关性,进一步体外研究孕激素对滋养叶细胞HLA-G分子表达的调节作用时,应考虑到JEG-3细胞自身孕激素分泌的影响.     

洞穴动物的进化

真洞穴生物(troglobites)对洞穴环境的适应包括体色变化(因缺乏色素导致无色或白色)、视觉和听觉退化(眼退化和听觉器官退化或消失)、触觉敏锐(附肢和触角具有更多的感觉神经元、附肢显著延长等)、产卵量少和孵化率高(洞穴内可摄取的食物量少,洞穴环境条件稳定、天敌少、每个卵的营养物含量高)以及洞穴生物代谢率小,体型较大,寿命长,发育历期长等。这一系列适应性特征是真洞穴动物共有的,被称为洞穴形态共征(troglomorphicsuite),     

小麦高分子量麦谷蛋白亚基5基因序列

1　Ｓｏｕｒｃｅ　ＴｈｅｓｅｑｕｅｎｃｅｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｆｒｏｍａＰＣＲｐｒｏｄｕｃｔ,ｗｈｉｃｈｗａｓｌｉｇａｔｅｄｔｏｐＭＤ1 8 Ｔｖｅｃｔｏｒ(ＴａＫａＲａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＣｏ.) ,ｆｒｏｍｎｕｃｌｅａｒｇｅｎｏｍｉｃＤＮＡｏｆ“ｃｈｅ     

重庆市生态系统服务价值动态评估

研究生态系统服务价值的动态变化对于区域生态环境的保护和恢复具有重要意义.本文分别采用Costanza等和谢高地等确定的生态系统服务价值评估方法,对重庆市1997-2005年的生态系统服务价值进行估算.结果表明:重庆市生态系统服务价值总体上呈增长趋势,生态系统服务价值与GDP的比值呈下降趋势;灰色系统预测的结果显示,重庆市生态系统服务价值将继续增长;采用Costanza等方法、2000年不变价的谢高地等方法和当年价的谢高地等方法计算得到的生态系统服务价值数值差异较大,不同的方法之间可比性较低;3种方法分别回答了不同的问题,采用Costanza等方法主要反映了生态系统服务价值对土地利用变化的响应,采用2000年不变价还反映了生物量的变化对生态系统服务价值的影响,而采用当年价除反映了土地利用、生物量变化的影响外,还部分地反映了人们对生态系统服务支付意愿的变化.     

滴滴涕对太湖经济鱼类危害的生态风险

选取滴滴涕(diehloro-diphenyl-trichloro-ethane,DDT)作为太湖持久性有机氯污染的代表性污染物,以大银鱼、陈氏短吻银鱼和刀鲚为研究对象,建立太湖主要经济鱼类食物网模型,并结合DDT的生物化学特性以及蒙特卡罗(Monte Carlo)不确定性分析方法,应用食物网模型研究DDT在食物网主要经济鱼类中的迁移分布特性,分析由此导致的生态风险.结果表明:大银鱼DDT累积量为0～0.329 mg·kg-1,平均值为0.039 mg·kg-1;陈氏短吻银鱼DDT累积量为0-0.188 mg·kg-1,平均值为0.022 mg·kg-1;刀鲚DDT累积量为0-0.575 mg·kg-1,平均值为0.067 mg·kg-1;以脂溶性为代表的污染物累积性质是太湖经济鱼类富集DDT的主要控制因素;生态风险总体状况为:刀鲚＞大银鱼＞陈氏短吻银鱼.