人源性抗出血热单克隆抗体重链可变区基因克隆及其序列测定

单克隆抗体已广泛应用于医学生物学的各个领域。但目前使用的单克隆抗体多为鼠源性,在临床应用中常使患者产生抗异种蛋白的免疫反应。人源性单抗用于临床比鼠源性优越,但其制备尚有许多难题,其杂交瘤细胞不稳定、抗体产量低、多为IgM,难以达到临床的应用。我们前已报道了成功地获得能分泌人源性     

脑组织中的胰岛素及其受体

在新发现的胰岛素敏感组织——脑的不同区域中,胰岛素含量和胰岛素受体(IR)含量有明显的差异,并且同一区域内的胰岛素含量与IR的含量之间不表现平行关系。作为IR的一个结构和功能亚型,脑IR的α-亚基和β-亚基的分子量低于肝细胞和脂肪细胞的IR。但脑IR的化学性质与后者基本相同。更为重要的是,胰岛素在脑中表现了与经典胰岛素靶组织所不同的生理功能,很值得探究。     

甲型肝炎重组痘苗病毒(VMS11HAV25)的构建及其某些生物学性质

将5′端经过剪切的甲型肝炎病毒全部开放读码框架cDNA连接于痘苗病毒晚期启动子P11下游,重组于痘苗病毒天坛株的HiodⅢM片段Spb Ⅰ位点获得了重组病毒VMS11HAV25。对其生物学性质的研究表明,该重组病毒诱生痘苗抗体的能力、对鸡红细胞的血凝性质、空斑大小及对温度的稳定性等均与原天坛株相同。重要的区别是,重组病毒在家兔皮内和小鼠脑内的毒力都比原天坛株低约1个对数。病毒在人胚肺二倍体细胞连续传15代的表达水平与传代早期者相同。连续传20代后提取病毒DNA做Southern blot杂交表明,甲型肝炎病毒基因仍稳定地存在于原插入位置。     

山东省麦红吸浆虫发生环境的初步分析

本初步分析丁山东省麦红吸浆虫发生的环境条件．结果表明．毗邻四省是麦红吸浆虫的高发区．为扩散到我省提供了虫源条件．鲁南各有虫县常年的4月上旬～5月上旬的温度和麦田湿度有利于麦红吸浆虫的化蛹和羽化．麦红吸浆虫成虫峰期和小麦抽穗期相吻合．为麦红吸浆虫产卵提供了条件．小麦品种混杂,增加了田间感虫机会．地膜蒜地形成了麦红吸浆虫的早期虫源．田间种群数量的积累．666停用后没有很好的替代土壤处理药剂．也是有利于麦红吸浆虫发生的条件．     

蛋白激酶C的分离纯化及其性质研究

 本文由兔脑细胞质可溶部分分离纯化了蛋白激酶C,测得该酶分子量为79.2kD,最适pH为6.5,最适反应温度为20℃,热不稳定,即使在4℃下,24h就丧失活力50％,同时观察了蛋白激酶C的抑制剂H_7对酶活力的影响。     

一种新的具有多肽性质的β-肾上腺素能受体激动剂

从蚯蚓中分离出一种能增强离体豚鼠心耳收缩作用的物质。用分子筛层析,阴离子交换层析及高效液相色谱法进行了纯化,进一步分析表明,它是分子量约为30,000daltons的多肽(称为蚯这多肽制剂),可被肾上腺素能受体阻断剂——心得安对抗,能竞争性抑制~3H标记心得舒与大鼠心肌膜制剂内β-肾上腺素能受体的结合,为一种新的β-肾上腺素能受体激动剂。     

超声心动图检查对慢性肺源性心脏病患者右心功能的诊断价值

目的:探讨超声心动图检查对慢性肺源性心脏病患者右心功能的诊断价值。方法:选取2016年8月至2017年12月间本院收治的35例慢性肺源性心脏病患者作为实验组,并选择同期健康体检者35例作为对照组,全部受试者均给予超声心动图检查。分别比较两组右房横径(RA)、右室前后径(RV)、肺动脉平均压(MPAP)、射血分数(EF)、舒张晚期A波峰值流速与舒张早期E波峰值流速的比值(A/E)和右心室Tei指数。同时比较实验组采用常规12导联心电图检查及超声心动图检查的诊断阳性率、右心扩大阳性率和右心扩大伴心衰阳性率。结果:与对照组相比,实验组RA、RV以及MPAP均升高,组间比较差异有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,实验组EF明显降低,而A/E值、Tei指数明显升高,组间比较差异有统计学意义(P0.05)。实验组超声心动图检查的诊断阳性率、右心扩大阳性率和右心扩大伴心衰阳性率均高于常规12导联心电图检查(P0.05)。结论:应用超声心动图检查能够有效诊断慢性肺源性心脏病患者的右心功能,而且操作简单方便,诊断阳性率较高。     

人源类溶菌酶蛋白6的功能研究及生理特性分析

对人源类溶菌酶蛋白6(human lysozyme-like protein 6,LYZL6)在受精过程中的作用进行研究,并对重组LYZL6蛋白(recombinant LYZL6,r LYZL6)的生理特性进行分析,从而揭示其生理功能。细胞免疫荧光法确定LYZL6定位于成熟精子头部的顶体后区域,反转录PCR(RT-PCR)分析表明精子表面的LYZL6蛋白来源于睾丸和附睾的分泌,Western blot法分析表明精子获能前后表面LYZL6的量无明显改变。半透明带结合实验和精子穿透实验分析表明兔抗LYZL6血清未明显抑制人精子结合透明带,但可明显抑制精卵融合。利用毕赤酵母表达系统成功表达了r LYZL6,使用甲壳素亲和层析和凝胶过滤层析可从发酵上清中纯化到具有生物活性的r LYZL6。酶联免疫吸附法(ELISA)分析显示r LYZL6不具有透明质酸结合能力、透明质酸水解能力和自由基清除活性,但具有较强的肽聚糖结合能力和异肽酶活性。LYZL6由睾丸和附睾分泌后定位于成熟精子头部的顶体后区域,可以参与精卵融合,并具有肽聚糖结合能力和异肽酶活性,提示LYZL6可能通过多种机制参与精子功能。     

链霉菌GXT6 β-葡萄糖苷酶的酶学性质及葡萄糖耐受性分子改造

【目的】从经过全基因组测序的链霉菌GXT6中克隆、表达一个编码糖基水解酶家族3的新β-葡萄糖苷酶基因,研究重组酶的酶学性质并进行相关葡萄糖耐受性的氨基酸残基的分子改造,提高其对葡萄糖的耐受性。【方法】根据链霉菌GXT6的全基因测序结果,对其中一个注释为糖基水解酶的基因设计引物,PCR扩增目的基因,以p SE380为表达载体构建重组质粒,转化至大肠杆菌中诱导表达;采用镍亲和层析技术纯化重组蛋白质,对目的蛋白质进行酶学性质研究;采用定点饱和突变的方法对重组酶进行相关氨基酸残基的分子改造。【结果】从链霉菌GXT6中克隆到一个编码糖基水解酶家族3的新β-葡萄糖苷酶基因,并在大肠杆菌中表达。酶学性质研究结果表明该β-葡萄糖苷酶的最适温度为40°C,最适p H为6.0,Km值为(0.4712±0.0180) mmol/L,Vmax值为(128.000±1.741)μmol/(min·mg),葡萄糖抑制常数Ki值为(1.8880±0.1307)mmol/L。该BGL3-GXT6能够水解黄豆苷、染料木苷、甜茶苷、虎杖苷、淫羊藿苷。还对BGL3-GXT6中与葡萄糖耐受性可能相关的氨基酸残基位点81-Trp和233-Trp进行了定点饱和突变,获得了25个具有酶活的突变酶并对其进行酶学性质研究。其中W233位点饱和突变后获得的突变酶的Km和葡萄糖抑制常数Ki值与重组酶BGL3-GXT6相比均发生明显变化,葡萄糖耐受性有不同程度的提高,最高的提高了209倍。【结论】本研究获得的BGL3-GXT6对天然底物甜茶苷、黄豆苷、染料木苷、虎杖苷和淫羊藿苷具有水解功能,这些特性表明该β-葡萄糖苷酶在理论研究及在工业中有一定的应用价值。