人羊膜细胞临床前研究:治疗非神经系统的损伤性疾病研究进展

本刊前两期(中国细胞生物学学报2011;33(5):590-3、33(6):720-3)分别介绍了人羊膜细胞在治疗神经损伤和神经退行性疾病方面的临床前研究,强调了人羊膜上皮细胞在生化方面具有神经细胞特性,说明它在治疗神经系统疾病方面具有许多优越性,但并不否定它在治疗非神经系统的损伤性疾病的可能性。     

人羊膜与人脱细胞羊膜形态结构的对比观察

目的：对比观察人羊膜（human amniotic membrane,HAM）脱细胞处理前后的形态结构变化,为人脱细胞羊膜（human acellu-lar amniotic membrane,HAAM）作为良好的生物支架材料提供依据。方法：取健康剖宫产孕妇的胎盘,剥离获取HAM,行HE染色、透射电镜（transmission electron microscope,TEM）、上皮面与基质面扫描电镜（scanning electron microscope,SEM）检测;将HAM经物理和胰蛋白酶等脱细胞处理后获得HAAM,亦行HE染色、TEM、上皮面与基质面SEM检测;最后将检测结果进行对比观察。结果：通过HE染色表明HAM的细胞成分去除干净;TEM断面观察HAAM表明其富含大量密集的呈点状、线状及条索状的纤维成分;SEM观察表明HAAM的上皮面与基质面呈现不同的三维结构,未见胶原纤维和网状纤维断裂。结论：HAM经脱细胞处理制备的HAAM,既去除了可引起移植排斥反应的细胞成分,又保存了完整的三维结构,为良好的生物支架材料。     

脱细胞羊膜与小肠黏膜下层促进大鼠皮肤缺损修复和血管形成

目的观察脱细胞羊膜(HAM)与小肠黏膜下层(SIS)促进大鼠皮肤缺损修复和血管形成的作用。方法SD大鼠24只,在两侧背部各做1个直径为1.8cm圆形全层皮肤缺损。创面随机分为A组、B组和C组。A组HAM覆盖,B组SIS覆盖,C组纱布覆盖。在2周时处死动物取材,HE染色观察皮肤缺损修复情况。免疫组织化学染色检测K19和VEGF,RT-PCR检测VEGF mRNA的表达。结果A组、B组愈合较好。C组愈合较差。免疫组织化学染色显示,A、B组K19、VEGF阳性细胞显著多于C组,其中A组最多;RT-PCR结果显示,A、B组比C组表达更多的VEGF mRNA其中A组最多,差异显著,有统计学意义(P<0.05)。结论HAM和SIS均能增加皮肤创面组织中K19阳性细胞数,上调VEGF mRNA的表达、增加VEGF的分泌,其中HAM具有更强的促进皮肤缺损修复和血管形成作用。     

用野生醋栗花粉匀桨诱导栽培番茄变异的初步研究

实验以79286栽培番茄品种为受体,用野生醋栗花粉匀桨物质处理该受体植株柱头再对其授粉。从诱导后代中获得了结果习性、果肩色等具有某些醋栗性状的变异,并从中选育出一个耐储性好、多果型的番茄新品系。其受体番茄由聚伞花序转化为总状花序型的频率为7.8-23%。酶碎结果树有4-5个增加值6-8个。过大小介于供体与受体两者之间。Abstract: The exeperiment used tomato as the recipient and the pollen homogenate of wild-gooseberry as the donor. We treated the matuma of recipient with the pollen homogenate of donor, and then pollinated with normal pollen of the maternal plants. Several offspring of changed characters, as the size of fruit and the fruit number were obtainted in generation H2 From these plants, we have chosen a new variety with store-resisting and multifruit type. The above results show that the method was effective to practical tomato breeding and multifruit type. The above results show that the method was effective to practical tomato breeding. However some theoretical problem need to be further studied.     

TROP2在卵巢浆液性囊腺癌中的表达及其与预后的关系

目的:探讨TROP2在不同卵巢组织中的表达及其与卵巢浆液性囊腺癌患者临床病理因素之间的关系,明确TROP2表达是否与卵巢浆液性囊腺癌患者预后有关。方法:应用免疫组化法检测TROP2在98例卵巢浆液性囊腺癌组织及50例正常卵巢组织中的表达情况,分析TROP2表达与卵巢浆液性囊腺癌患者临床病理特征的关系,采用COX比例风险回归模型分析影响卵巢浆液性囊腺癌患者预后的因素。结果:TROP2在卵巢浆液性囊腺癌、正常卵巢组织中的表达阳性率分别为55.1%及24.0%,差异有统计学意义(P0.05)。TROP2表达与卵巢浆液性囊腺癌患者年龄无显著相关(P0.05),而与患者有无淋巴结转移,组织学分级和临床分期有显著相关(P0.05);临床分期、病理组织学分级、术后残余灶大小、TROP2基因表达均为影响卵巢浆液性囊腺癌患者预后的危险因素(P0.05)。结论:TROP2可能成为卵巢浆液性囊腺癌患者治疗的新靶点。     

兔羊膜上皮细胞的体外培养和增殖

研究妊娠晚期兔羊膜上皮细胞(amniotic epithelial cells, AECs)在体外生长和增殖特性.取妊娠晚期兔(27-28E) AECs进行体外培养, 光镜、扫描电镜下观察后, 利用免疫组化单克隆抗体AE1/AE3、AE5检测培养的AECs中细胞角蛋白的表达, 并采用流式细胞仪检测表皮生长因子(epidermal growth factor, EGF)和血清对AECs细胞周期的影响.结果表明妊娠晚期兔AECs在体外培养条件下生长良好、增殖旺盛; 单克隆抗体AE1/AE3、AE5染色阳性; 血清组、EGF组和联合应用组分别与对照组比较, 各周期细胞比例发生变化, G0/G1期减少, S期、G2/M期增加, 细胞增殖指数(PI)增加, P<0.01, 联合应用组分别与血清组、EGF组比较, P<0.05.说明妊娠晚期兔AECs表达细胞角蛋白CK3, 血清和EGF均能通过改变妊娠晚期兔AECs的细胞周期而促进AECs增殖, 两者联合应用对促进AECs的增殖更为显著.     

关于羊膜卵的进货的假想

羊膜动物是从无羊膜动物进化来的,它们的卵在结构和适应力方面差异极大,特别是胚外膜呈现“全或无”的状态。它们之间存在进化上的缺环。本文从脊椎动物上陆的历史背景入手,结合胚胎学的实验事实和当时的环境条件,分析卵的进化,提出关于原羊膜卵的假想,以补卵的进货缺环。     

羊膜动物的系统发生

以支序系统学为基础出发,将羊膜动物分为3个类群：下孔类、无孔类和双孔类,并简要介绍了其中的主要类群;同时也介绍了哺乳类、龟鳖类和翼龙类等几个重要类群及鸟类的起源演化问题。     

角型青光眼急性期行小梁切除并丝裂霉素联合羊膜移植术的疗效观察

目的探讨闭角型青光眼急性期滤过手术中应用生物羊膜的临床疗效。方法对我院收治的急性期闭角型青光眼患者25例施行小梁切除并丝裂霉素联合羊膜移植术,术后对手术疗效进行评估。结果 25例患者中,1例患者术后视力下降,其余24例患者视力无变化或提高。术后1、3、7天及术后1个月的视力变化,差异有统计学意义(P0.05);术后3天~1周的视力保持稳定,患者术前、术后各时间点眼压差异有统计学意义(P0.01)。术后1、3、7天以及术后1、3、6、12个月眼压控制较稳定,前房形成良好,无并发症发生。结论急性闭角型青光眼患者的眼压持续升高,实施小梁切除并丝裂霉素联合羊膜移植术安全有效。     

再生胰腺提取物诱导人羊膜间充质干细胞定向分化为胰岛素分泌细胞

利用天然生物诱导剂大鼠再生胰腺提取物(Rgenerating pancreatic extract,RPE)定向诱导人羊膜间充质干细胞(Human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSCs)向胰岛素分泌细胞分化。切除大鼠60%胰腺刺激胰腺再生,而后制备RPE,以终浓度为20 mg/L的RPE诱导hAMSCs。实验通过形态学鉴定、双硫腙染色、免疫荧光分析、RT-PCR基因检测和高糖刺激胰岛素分泌等实验鉴定细胞诱导结果。实验结果显示P3代hAMSCs经RPE诱导后形态变化明显,诱导15 d后细胞呈簇状生长,经双硫腙染色可见棕红色细胞团;免疫荧光染色结果显示诱导细胞呈胰岛素阳性表达;RT-PCR实验证明诱导细胞阳性表达人胰岛相关基因Pdx1和insulin;高糖刺激实验证明培养液中有胰岛素成分产生,且分泌量随刺激时间的延长先增加而后趋于稳定。实验结果表明hAMSCs在体外经RPE诱导可以分化为胰岛素分泌细胞。