聚合酶链式反应快速鉴定啤酒有害菌研究

建立了PCR快速鉴定啤酒有害菌的新方法。用基于抗酒花基因horA部分序列的特异引物对啤酒污染乳酸菌进行PCR检测,灵敏度可达到3个细胞(CFU),样品的预培养需12~16h。啤酒有害菌检测所需时间从传统的5d减少到24h。     

水柱法场扩大提高CE-UV检测核酸灵敏度

目的：采用水柱法场扩大堆积技术,提高毛细管电泳紫外分析核酸灵敏度。方法：已知浓度的DNA Marker为标准样品,TE缓冲液递度稀释,压力进样前加一段去离子水柱（0.5psi,20s）,观察不同浓度下压力进样紫外检测图谱。结果：在对分离度无明显影响下,将压力进样时间延长至0.5psi,990s,与常规的压力进样（0.5psi,10s）相比,灵敏度提高了94.4倍。与时间延长后的压力进样（0.5psi,90s）相比,灵敏度提高8.2倍,最低检测总浓度为1ng/μl,DNA的检测限降至80ng/ml（S/N=3）,比前人报道的7ng/μl检测限提高了87.5倍。结论：验证了水柱法场扩大堆积注射可以有效提高毛细管电泳紫外检测核酸灵敏度。     

面临血液不足的危机 新技术陆续登场

为了应付血液制剂中可能存在的病原体,日本引进了”NAT”技术,这种技术的灵敏度很高,即使几个拷贝的病毒也能够被检测出来,也可以用来进行艾滋病病毒（HIV）、丙型肝炎病毒（HCV）和乙型肝炎病毒（HBV）的检查。由于NAT的威力强大．使得日本近几年来由于输血引起的感染事故大大减少,只发生了十几起。     

乙酰胆碱酯酶的定点突变法设计及其在生物传感器领域的应用

有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂抑制乙酰胆碱酯酶(AChE)的天然生物活性。近年来,AChE作为生物识别元素的生物传感器在杀虫剂残留量检测领域受到了广泛的关注。简要分析了AChE结构与功能关系,综述了近年来通过定点突变法设计AChE以增加对各种杀虫剂的检测灵敏度及其在生物传感器领域的应用现状,指出多种灵敏的AChE突变体同时被应用于多样品及多分析物的平行检测体系是该领域进一步的发展方向。     

应用纳米金探针检测HSV-2的目视化基因芯片

本实验建立了一种应用金标链霉亲和素探针的目视化高灵敏度检测单纯疱疹病毒2型(Herpes Simplex Virus-2, HSV-2)的基因芯片.该芯片以HSV-2 DNA 聚合酶的高保守区为靶序列,设计HSV-2特异性引物和探针,通过PCR反应使扩增产物标记上生物素;氨基修饰的探针固定在活化的玻片上,与生物素标记的扩增产物杂交;利用生物素与链酶亲和素高亲合力的特性,加入纳米金标记的链酶亲和素后形成生物素-链酶亲和素-纳米金生物反应放大系统;银染反应后,达到目视化检测HSV-2效果.该HSV-2检测基因芯片能目视化检测出100fmol/L的HSV-2扩增产物,具有灵敏度高,低成本的特点,通过临床标本验证表明该芯片具有较高的准确性.     

结核感染T细胞斑点试验对肺外结核诊断价值探讨

目的评价结核感染T细胞斑点试验（T—SPOT．TB）在肺外结核中的诊断价值。方法采用T—SPOT．TB试剂盒对疑诊或待排结核患者外周血中特异性T淋巴细胞进行检测。结果结核感染T细胞斑点试验的对结核病的敏感度、特异度分别为76．7％、84．3％。肺外结核组与肺结核组阳性率分别为92．0％和78．2％,差异有统计学意义（P〈0．05）。该数据显著高于结核菌素试验的31．4％和结核分枝杆菌培养的19．3％,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论结核感染T细胞斑点试验是诊断肺外结核的快速敏感方法,值得在临床中推广使用。     

胶州湾生物-物理耦合模型参数灵敏度分析

参数灵敏度分析旨在评价模型中各参数对模拟结果的影响程度,是参数优化和模型校正的基础步骤,也是认识模型行为的重要工具。所建的胶州湾生物-物理耦合模型包括浮游植物、浮游动物、营养盐、碎屑和溶解氧5类状态变量,对其涉及的50个参数进行灵敏度分析,得到3个非常灵敏性参数、2个灵敏性参数、11个比较灵敏性参数和34个不太灵敏性参数。非常灵敏及灵敏性参数包括浮游植物生长速率(μPRPC)、暗反应修正因子(FAC)、光饱和强度(α)、浮游植物死亡率(μDEPC)和水体消光系数(bla),主要影响浮游植物生长和死亡过程,反映了浮游植物在生态系统中的基础性和重要性作用。这5个参数显著地影响碳和营养盐循环,是整个胶州湾生态系统最主要的影响参数,应优先进行优化。比较灵敏性参数的影响主要表现在营养盐对浮游植物生长或死亡的限制以及温度对光饱和量的限制,浮游动物生长、牧食和死亡过程以及浮游植物生物量对牧食的限制,叶绿素a的生产,缺氧条件下沉积物释放磷以及浮游植物对磷的摄取等过程,这些参数对于各状态变量的灵敏性存在不同程度的差异,从而表征不同的特点。与不太灵敏性参数相关的过程主要为叶绿素a和碎屑消光作用,温度对浮游植物生长、浮游动物牧食、碎屑和沉积物矿化的限制,碎屑和沉积物矿化与沉降,与无机氮相关的大部分过程,溶解氧浓度变化等,这些过程除了受模型内部参数影响外,还在很大程度上受水深、海水温度和陆源污染等外部因素影响。比较灵敏及不太灵敏性参数影响模型局部过程,是模型校正的重要依据,除了非常灵敏及灵敏性参数以外,叶绿素a、浮游动物、碎屑和无机磷四种状态变量可分别根据叶绿素a最大生产系数(K CHmax)、浮游动物一级死亡率(μDEZC1)、有机碎屑矿化率(μREDC)和浮游植物磷摄取的半饱和常数(h UPPP)进行校正。与营养盐相关参数的灵敏度分析表明,胶州湾浮游植物处于磷限制,无机氮主要受陆源排污影响。因此,对无机氮的校正主要通过合理设置沿岸河流径流量或陆源污染物浓度与比例以及无机氮初始场。溶解氧对各参数均不太灵敏。     

《PLoS综合》：科学家开发出检测流感病毒新技术

日本理化研究所日前宣布,其科研小组开发出一种检测流感病毒的新技术,灵敏度相对大幅提高,可在发病后的很早阶段确认感染。有助于及时防止流感蔓延。     

抗脱氧雪腐镰刀菌烯醇单克隆抗体的制备

[目的]小麦赤霉病菌产生的毒素不仅在病害发展过程中具有加重赤霉病的作用,而且污染谷物导致严重的食用安全性问题.由于赤霉病的普遍发生,有必要建立快速、灵敏、有效的毒素检测方法,本试验旨在制备可用于检测被脱氧雪腐镰刀菌烯醇污染的粮谷类特异性单克隆抗体.[方法]本实验首先将脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的衍生物3-半琥珀酰-脱氧雪腐镰刀菌烯醇(3-HS-DON-OVA)与卵清蛋白(OVA)采用碳化二亚胺法进行偶联得到人工抗原,以此人工抗原免疫BALB/C小鼠,取该鼠脾细胞与SP2/O鼠骨髓瘤细胞融合,经筛选和克隆,得到了1株能稳定分泌DON抗体的单克隆细胞株(382),并制备单克隆抗体腹水.[结果]经检测382的抗体类型及亚类均为IgG1,其轻链为κ链.腹水通过间接酶联免疫吸附测定效价在1×10-7以上.该单克隆抗体与脱氧雪腐镰刀菌烯醇特异性结合反应的50%抑制质量浓度为29 μg/L,除与3-acetyldeoxynivalenol(3-Ac-DON)的交叉反应率为78.38%,与其他脱氧雪腐镰刀菌烯醇结构类似物无交叉反应.[结论]本实验所制备的单克隆抗体有较高的灵敏度和特异性,具有较好的应用价值.     

基于超高速摄影显微成像和超声散射的纳米包膜造影微泡包膜厚度估计

纳米包膜微泡和携带药物的生物微系统在超声成像和药物传递与释放等方面具有重要的应用价值。通过使用时间分辨率最小可达10ns的新型超高速显微成像装置,得到微泡在医用频率超声场中的半径振动曲线,对参数做灵敏度分析后,与理论预测结果做最小均方误差对比,经反向参数估计,获得包膜厚度估计值。结果表明,该技术在不破坏样品的务件下,能得到较为准确的包膜参数。