温州蜜柑萎缩病毒提纯与抗血清制作及其应用

采用洋酸浆（Ｐｈｙｓａｌｉｓｆｏｒｉｄａｎａ）繁殖温州蜜柑萎缩病毒（ＳＤＶ）,改进提纯方法,经５％－２５％,酒石酸钾密度梯度离心获得的提纯制剂,在２２０－３００ｎｍ下呈单一吸收峰曲线,峰在２５９ｎｍ,谷在２３７ｎｍ,ＯＤ２５９／ＯＤ２３７＝１．６０,ＯＤ２５９／ＯＤ２８０＝１．７３,病毒得率约为１３ｍｇ／ｋｇ病叶,电镜观察各视野布满了直径约２６ｎｍ的球状病毒颗粒,病毒粒子外壳蛋白有两个组分,分子量     

大熊猫乳酸脱氢酶同工酶H4的分离纯化和某些性质的研究

采用８－（６－氨己基）－氨基－５－ＡＭＰＳｅｐｈａｒｏｓｅ亲和层分析法和ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ离子交换层析法从大熊猫心肌中分离纯化出乳酸脱氢酶同工酶Ｈ４,纯化的大熊猫ＬＤＨ－Ｈ４,比活为４４５Ｕ／ｍｇ蛋白,经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ,ＡＰＧＥ,等电聚焦电泳鉴定均为一条带,其亚基分了量为３６０００,等电点为５．４５。经测定大熊猫ＬＤＨ－Ｈ亚基Ｎ端被封闭,Ｃ端氨基酸残基经测定为Ｌｅｕ。氨基酸组成分析表明     

人a降钙素基因相关肽基因在酵母细胞中的分泌表达与产物的分…

化学合成的人ａ降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）基因用ＰＣＲ法改造后使其能正确融合在酵母分泌型表达载体ｐＶＴ１０２Ｕ／ａ中的ａ交配因子前导肽序列之后,然后进行克隆并转化酵母宿主菌Ｓ－７８进行表达,培养物的上清用酶标（ＥＬＩＳＡ）鉴定为阳性,而对照Ｓ－７８、ｐＶＴ１０２Ｕ／ａ为阴性,表达量用ＥＬＩＳＡ定量大于２ｍｇ／Ｌ。表达产物经阳离子交换层析（ＣＭ－Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｃ２５）和ＨＰＬＣ纯化得到了ＨＰＬＣ     

基因工程表达蛋白包涵体的形成和纯化

基因工程表达蛋白包涵体的形成和纯化张庶民,祁自柏综述李河民审（中国药品生物制品检定所,北京１０００５０）在过去的几十年里,基因工程技术的引进给生命科学领域带来了一场革命。科学家们利用基因操作方法克隆出目的基因,然后将其组装入表达质粒,转染到宿主细胞中...     

黑曲霉ρ-葡萄糖甘酶的提纯与性质

从黑曲霉Ａｓｐｅｒｇｉｌｕｓｎｉｇｅｒ发酵液中分离提纯了β－葡萄糖苷酶。提纯步骤通过（ＮＨ４）２ＳＯ４分级沉淀,ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－５０和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００等三步纯化,得到凝胶电泳均一的β－葡萄糖苷酶。该酶的最适ｐＨ４．５,最适温度６０℃,Ｋｍ为０．４４（ＮＰＧ）,并有较好的热稳定性。用ＳＤＳ－凝胶电泳法和凝胶色谱法测得该酶的分子量为１２００００     

黑曲霉β-葡萄糖苷酶的提纯与性质

从黑曲霉Aspergillus niger,发酵液中分离提纯了β-葡萄糖苷酶。提纯步骤通过(NH₄)₂SO₄分级沉淀,DEAE-Sephadex A-50和Sephadex G-100等三步纯化,得到凝胶电泳均一的β-葡萄糖苷酶。该酶的最适pH4.5,最适温度60℃,Km为0.44(pNPG),并有较好的热稳定性。用SDS-凝胶电泳法和凝胶色谱法测得该酶的分子量为120 000。     

乳酶克鲁维酵母β—半乳糖苷酶的分离纯化及性质研究

乳酸克鲁维酵母经高压破壁后的粗提液,其β－半乳糖苷酶比活力为５．５６ｕ／ｍｇ．经硫酸铵沉淀,丙酮沉淀,ＰＡＰＭＡ－Ａｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ柱层析后,乳糖酶比活力达３７０ｕ／ｍｇ,纯化了６６．２倍,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ鉴定为一条带,分子量８５０００Ｄａ。酶作用的最适ｐＨ在６．４－６．８之间,最适温度４０℃,５０℃保温１５ｍｉｎ酶活丧失９０％,以邻硝基苯－β－半乳糖苷为底物的米氏常数为２．７８ｍｍｏｌ／Ｌ