人胃腺苷脱氨酶的分离纯化及性质研究

用硫酸铵分级沉淀、ＤＥＡＥ－纤维素离子交换层析、免疫亲和层析、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００凝胶柱层析从人胃组织中提取出腺苷脱氨酶。酶纯化１９３２４倍,比活力为５７９７Ｕ／ｍｇ蛋白。提取酶液经ＰＡＧＥ、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和等电聚焦只呈现一条区带。测得该酶的分子量为４１．２ｋＤ,等电点为ｐＨ４．８,氨基酸组成分析表明该酶由３８８个氨基酸残基组成,Ｎ端氨基酸为精氨酸。酶的最适ｐＨ为６．５,ｐＨ小于５．０或大     

慈菇（Sagittaria safittifolia）α—半乳糖苷酶的纯化与性质

以对硝基苯糖苷基为底物,测定了慈菇的１２种糖苷酶,其中α－甘露糖苷酶,α－和β－半乳糖苷酶活力较高,经硫酸铵分级沉淀,ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１５０分子筛层析,ＣｏｎＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析,ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ离子交换层析,从慈菇抽提液纯化了α－半乳糖苷酶,纯化酶的比活提高１０７２倍,活力回收１５．６％,在圆盘聚丙烯酰胺凝胶电泳和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ上均显示了１条蛋白质带,在     

以魔芋葡甘聚糖凝胶为载体亲和层析分离纯化猪血SOD

以魔芋葡甘聚糖（ＫＧＭ）凝胶作为铜金属螯合亲和层析的载体一步亲和纯化猪血ＳＯＤ,得到电泳均一,比活为８６２２Ｕ／ｍｇ,纯化倍数为７７．８倍的ＳＯＤ,其回收率为８５．４％。探讨了魔芋葡甘聚糖凝胶作为亲和载体的可能性及前景。     

河南小麦梭条斑花叶病病原鉴定、病毒提纯及其特性

经鉴定,我国河南邓县冬小麦上发生的一种病毒病的病原,是小麦梭条斑花叶病毒。 对病毒的分离纯化进行了研究,提出了一个简单可靠的病毒纯化程序,获得了较为理想的提纯病毒制品,提纯病毒具有典型的、核酸含量约为5～6％的线状病毒紫外吸收曲线,病毒粒体宽约12nm,长度分布从200～2000nm以上,平均粒体长度约为1000nm,在300nm、600nm及1000nm处有3个分布高峰,用提纯病毒免疫兔子获得效价为1/1024的抗血清,提纯病毒的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳可检测到多条蛋白带,分子量从36.6kd至28.6kd,其中36.6kd的蛋白为病毒的外壳蛋白,其余的为外壳蛋白的降解产物。     

水稻120KDa光敏色素的提纯

采用改进的 Grimm 等方法,从晚粳“农垦58”水稻(Oryza sativa L.subsp.japonica,var.nongken 58)6天龄黄化苗中提取光敏色素。经液氮深冻的胚芽鞘在含有乙二醇和苯甲基磺酰氟化物等、pH 为8.45的 Tris 缓冲液中匀浆。对聚乙烯亚胺沉淀后的提取液照射红光,经硫酸铵盐析后、通过羟基磷灰石柱层析梯度洗脱。合并的含有光敏色素的洗脱液再经硫酸铵盐析和三次不同体积、不同浓度的磷酸缓冲液洗涤。最后溶于 HEPES 缓冲液的天然光敏色素(120kDa)经 SDS-PAG 电泳检测为一条带,并具有经典的纯净光敏色素的吸收光谱,产率达12%。     

果胶裂解酶的分离,提纯及其特征

用等电聚焦层析方法从酶制剂Pectinex Ultra SP-L中分离获得制备标准的内切果胶裂解酶(PL),并测定了这个内切-PL的一些重要物理、化学及生物化学特性。用分析用等电聚焦电泳,生物化学反应及薄层层析证明所制备的PL为纯品。所制备的内切-PL的一些特性数据如下:pl∶pH=3.9,K_m=1.91 mg/ml,V_(max)=0.88单位/min。用苹果果胶(酯化度为71%)为底物时,PL的最适pH为6.0,最适温度是60℃。用H-果胶(酯化度为94%)为底物时,作用的最适pH为8.5,最适温度是65℃。所制备的PL是高温稳定和pH稳定的。PL的活性被Na~+激活。