5-羟色胺转运体基因异体表达模型的建立

目的:探讨建立5-羟色胺转运体(5-HTT)基因异体表达模型的可行性,且为进一步探讨5-羟色胺重摄取的动力过程和条件以及其功能的调控机制奠定基础.方法:利用体外转录cRNA技术将克隆至pOTV中的5-HTT的cDNA转录、合成5HTT的cRNA,通过显微注射技术将该cRNA注入成熟雌性非洲爪蟾卵母细胞的胞质中,使其表达以建立5-羟色胺转运体(SERT)的异体表达模型,并用电压钳技术检测其转运功能.结果:爪蟾卵母细胞可被用做5-HTT的异体表达模型,其转运功能呈浓度依赖性并具饱和现象,转运过程可被特异阻断剂Desipramine阻断.结论:非洲爪蟾卵母细胞可作为5-羟色胺等单胺类神经递质转运体的异体表达系统,为进一步研究转运体蛋白的功能和调控提供了有效工具.     

人IL-29的定点突变及抗肿瘤活性初步分析

为探讨人白细胞介素-29(h IL-29)变异体的抗肿瘤活性,根据h IL-29成熟肽的生物信息学分析数据,采用大引物PCR方法对其肽链第33位赖氨酸、35位精氨酸的编码基因进行定点突变,获得的h IL-29变异体基因构建重组真核表达质粒转化毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115进行发酵表达,经纯化得到重组人白细胞介素-29变异体蛋白(rh IL-29mut33,35)。经CCK-8法检测抗肿瘤细胞增殖的数据显示,rh IL-29mut33,35对肝癌细胞BEL7402、结肠癌细胞HCT8和胃癌细胞SGC7901的增殖均具有抑制作用,高剂量组对这3种肿瘤细胞的增殖抑制率分别为(30.99±1.58)%、(22.47±1.37)%和(32.05±2.02)%,而且抗增殖作用比野生型rh IL-29的更强(P0.01),表明变异体rh IL-29mut33,35具有潜在的医药开发价值。     

急性等容稀释性自体输血与异体输血对剖宫产手术患者T细胞亚群、肝肾功能及炎性细胞因子水平的影响

摘要 目的：探讨急性等容稀释性（ANH）自体输血与异体输血对剖宫产手术患者T细胞亚群、肝肾功能及炎性细胞因子水平的影响。方法：回顾性分析我院于2016年7月~2019年8月期间收治的128例行剖宫产手术患者的临床资料,根据输血方式的不同将患者分为A组（n=64,异体输血）和B组（n=64,ANH自体输血）,比较两组患者血常规指标[血红蛋白（Hb）、血细胞比容（HCT）、血小板（PLT）、红细胞（RBC）]、T细胞亚群、炎性细胞因子指标[C反应蛋白（CRP）、白介素-6（IL-6）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）]和肝肾功能指标[天冬氨酸转氨酶（AST）、谷丙转氨酶（ALT）、肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）],比较两组输血期间不良反应发生情况。结果：A组术后5dHb、HCT、PLT、RBC均下降（P<0.05）;B组术后5dHb、HCT、PLT、RBC均高于A组（P<0.05）。两组患者术前、术后5dAST、ALT、Cr、BUN组间及组内比较差异均无统计学意义（P>0.05）。A组术后5dCD4⁺/CD8⁺、CD4⁺均下降,CD8⁺升高（P<0.05）;B组术后5dCD4⁺/CD8⁺、CD4⁺高于A组,而CD8⁺则低于A组（P<0.05）。两组输血期间不良反应发生率对比未见统计学差异（P>0.05）。B组术后5dIL-6、CRP、TNF-α均低于A组（P<0.05）。结论：ANH自体输血对剖宫产手术患者T细胞亚群、炎性反应、肝肾功能及血常规影响作用较不明显且安全性较好。     

寻找mRNA的选择性剪接

在真核生物的基因中,mRNA选择性剪接现象十分普遍。mRNA选择性剪接导致一个基因多转录本的产生,被认为是高等生物增加蛋白质多样性的主要机制,且已发现与许多人类疾病密切相关。发现这些转录本的选择性剪接位点、新的外显子和外显子组合,乃至获得这些剪接变异体的完整克隆,对于基因功能的深入研究十分必要。简要介绍了几种在mRNA水平探索选择性剪接的方法。     

密度和饵料投放量对安吉小鲵幼体生长与同种相残率的影响

用改变安吉小鲵 (Hynobiusamjiensis)盆养密度和饵料投放量的实验方法 (共 2× 2种处理 ) ,研究了这两个生态要素对动物生长和同种相残率的影响。结果表明 ,小鲵幼体生长率及其变异受到饵料投放量的显著影响 ,而相残率受到密度与饵料投放量的双重制约 ;4种处理中 ,低密度高饵料组有最大生长率和最小的个体差异 ,而高密度低饵料组有最小的生长率和最大的相残率。以上结果符合理论预期。     

不同骨移植材料骨诱导活性的研究现状

目前因创伤、肿瘤或骨病等原因造成骨缺损的病人越来越多.临床上对大范围骨缺损的修复治疗仍是一个难题.骨移植是人类几个世纪以来不断深入研究和探索的重要课题,而产生骨诱导作用又是任何一种骨移植术的主要目的.直到今日,对采用何种材料、以何种方式进行骨移植,如何才能发挥植入材料骨诱导作用的最大效应等问题仍需进一步深入研究.本文针对目前临床上应用的不同骨移植材料:自体骨移植、同种异体骨移植、异种骨移植、及人工合成的骨替代物,从种类来源、作用机理和保存方法等方面对其骨诱导活性进行对比探讨作一综述.     

甜菜夜蛾SeGluCl剪接变异体的敲除及其对杀虫剂敏感性的影响

【目的】本研究旨在利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,探索甜菜夜蛾Spodoptera exigua谷氨酸门控氯离子通道(glutamate-gated chloride channels, GluCls)基因不同转录变异体编码的SeGluCls对杀虫剂敏感性是否存在差异。【方法】采用RT-PCR和RACE技术获得甜菜夜蛾SeGluCl的全长cDNA序列,并对其进行生物信息学分析;利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除SeGluCl两个剪接变异体SeGluCl 3a和SeGluCl 3b,并构建甜菜夜蛾敲除品系(3a-KO和3b-KO),生物测定甜菜夜蛾敏感品系WH-S(对照品系)及3a-KO和3b-KO品系的3龄幼虫对阿维菌素、甲维盐和氟虫腈3种杀虫剂敏感性的差异。【结果】获得了甜菜夜蛾SeGluCl全长cDNA序列,并发现其2种剪接变异体(SeGluCl 3a和SeGluCl 3b),SeGluCl 3a(GenBank登录号：OM304353)的开放阅读框(open reading frame, ORF)长1 362 bp,编码454个氨基酸,SeGluCl 3b(Gen...     

33个黄花菜品种及3种野生黄花菜的过氧化物酶同工酶分析

１９８４－１９８７年先后全国１６个省区收集了３３个黄花菜（ＨｅｍｅｒｏｃａｌｌｉｓｃｉｔｒｉｎａＢａｒａｎｉ）品种和３个野生黄花菜品种。８７－９４年连续７年观察了各品种的主要形态特征,农艺性状。利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术分析比较了各品种的过氧化物酶同工酶谱。结果表明,凡形态上差异较大者,过氧化物酶谱同工酶谱差异也大;形态上无明显差异者,过氧化物酶同工酶谱也基本相同,表现了很强的对应性。各地栽培的黄花菜中普遍存在着同物异名或同名异物现象。收集的３３个黄花菜品种整理归并为２５个不同的品种;１７号早黄花（野生）、１９号四月花（栽培）均为北萱草（Ｈｅｍｅｒｏｃａｌｌｉｓｅｓｃｕｌｅｎｔｓ）,１８号野黄花为折叶萱草（Ｈｅｍｅｒｏｃａｌｌｉｓｐｌｉｃａｔａ）。为研究黄花菜品种的亲缘起源关系及进行杂交育种工作提供了一些理论依据。     

关节镜下应用带跟骨异体跟腱一期联合治疗膝关节脱位合并不稳定

目的：探讨关节镜下应用带跟骨异体跟腱一期联合重建治疗膝关节脱位合并不稳定的治疗效果。方法：2008年1月至2010年1月,我们于关节镜下应用带跟骨异体跟腱一期联合重建治疗膝关节脱位合并不稳定患者11例,男9例,女2例;年龄17～45岁,平均22.3岁;右膝6例,左膝5例。患者在排除手术禁忌后,分别在关节镜下采用带跟骨异体跟腱一期联合重建后交叉韧带（PCL）、内侧副韧带（MCL）、前交叉韧带（ACL）和外侧副韧带（LCL）。结果：术后所有切口均于2周后I期愈合。10例获得随访,随访时间24～36个月,平均30个月。术后24个月,Lysholm评分由术前的42.2±3.5,升至84.5±6.2分,其中A级9例,B级1例,C级0例;国际膝关节文献委员会（IKDC）评分有术前的41.7±6.5分,升至82.3±10.3分。术前与术后Lysholm评分及IKDC评分有显著差别（P〈0.05）。术后膝关节活动范围,与术前相比具有显著性差异（P〈0.05）。结论：关节镜下应用带跟骨异体跟腱一期联合重建治疗膝关节脱位能够较好的恢复患者膝关节稳定和活动范围,具有令人满意的临床效果。