透明颤菌血红蛋白基因在淀粉酶产色链霉菌中的表达及对合成丰加霉素的影响

[目的]丰加霉素(Toyocamycin)是核苷类抗生素家族的重要成员,其在农业植物病害防治领域具有巨大的应用价值.为改善丰加霉素生产菌淀粉酶产色链霉菌(Streptomyces diastatochromogenes 1628)发酵过程溶氧限制,旨在实现vgb在S.diastatochromogenes 1628中的表达以促进丰加霉素的生物合成.[方法]首先以gfp为报告基因检测红霉素抗性基因启动子Perm*在S.diastatochromogenes 1628中的转录活性,再利用PermE*实现vgb的异源表达.[结果]在荧光显微镜下,重组菌1628-GFP菌丝可发出稳定明亮的绿色荧光,表明启动子PermE*在菌株1628中可有效启动外源基因的表达;通过一氧化碳结合差光谱分析显示VHb具有生物学活性;摇瓶实验表明:与原始菌株相比,重组菌可促进丰加霉素产量的提高,在中度和高度限氧条件下促进效果尤为明显,提高幅度分别为48.9％和104.5％. PCR和发酵效价检测显示重组菌具有良好的遗传稳定性.[结论]成功实现了vgb在S.diastatochromogenes 1628中的表达,有效提高了其丰加霉素的合成水平,为丰加霉素的工业化生产提供了基础条件.     

药物制剂中托普霉素的测定

前言 暗霉素是由链霉属tenebrarius产生的几种氨基糖苷抗生素的混合物。该混合物中最重要的是它的第六因子，也就是托普霉素被以Nebcin系统地加以管理，或者以Tobrex局部地加以管理，托普霉素的其结构如图1所示。暗霉素的各个单一组分可以混合并被加到发酵液肉汤中来抑制细菌的生长。     

《自噬》:自噬激活剂雷帕霉素可加速疾病进程

近期,国际学术期刊《自噬》(Autophagy)发表了中科院上海生命科学研究院/上海交大医学院健康所、中科院干细胞生物学重点实验室乐卫东研究组的研究成果Rapamycin treatment augments motor neuron degeneration in SOD1G93A mouse modelofamyotrophic lateral sclerosis。本项研究发现早期脊髓运动神经元内特异性的自噬水平升高,同时首次报道自噬激活剂雷帕霉     

制备液相色谱分离纯化埃博霉素B

基于制备液相色谱法开发与优化埃博霉素B的分离纯化工艺，制备得高纯度埃博霉素B样品。实验首先对埃博霉素B粗品进行了液相色谱（HPLC）分析，定位目标峰和杂质情况。其次，对两款正相色谱填料进行筛选和模拟制备，考查不同填料对埃博霉素B相关杂质的去除效果和回收率。结果表明，上样量为0.2%时，埃博霉素B在NPLC-2分析柱（250 mm×4.6 mm, 10μm）上保留得较好，可与杂质有效分离。最后，将优化好的纯化方法在制备水平上进行放大，以正庚烷和乙酸丁酯为洗脱剂，使用NPLC-2制备柱（260 mm×50 mm, 10μm）对埃博霉素B粗品进行分离纯化，样品的色谱纯度可达99.63%，回收率为90%，各项有关杂质均符合限量规定。该方法对埃博霉素B的相关杂质去除效果好，纯化效率和回收率均很高，为埃博霉素B分离纯化生产工艺的开发提供了新方法。     

紫外分光光度法测梧宁霉素中有效成份的研究

紫外分光光度法测梧宁霉素中有效成份的研究杜国民，张秀华，李凤忱，张宪丽（辽宁省微生物研究所，朝阳１２２０００）梧宁霉素（以下简称１１３７１）是辽宁省微生物研究所筛选的一株不吸水链霉菌梧州亚种经发酵产生的抗生素；其主要成份有四种，即四霉素Ａ、四霉素Ｂ、...     

在光、暗及高温下氧与鱼腥藻7120固氮的关系

鱼腥藻7120从光转暗不同时间后，照光检测固氮活性的损失速度与氧量直接相关。在黑暗12小时后，复光时的活性恢复被氧霉素、氯化铵或38—40℃空气氧所阻遏，黑暗中生成的酶易被氧失活。在光下和黑暗中短时暴露于不同氧压时，黑暗中氧引起固氮活性的下降比光下快得多。抗坏血酸大大减少高氧引起的失活，高温可能增加固氮酶活性对氧的敏感性。在光下100％O2处理120分钟，活性没有进一步下降，也没有活性的恢复，没有观察到构型保护。讨论了环境条件与氧保护的关系。     

南湖霉素对神经肌肉传递的影响和机理探讨

南湖霉素是我国学者筛选的一个新的多醚类抗生素，具有抑制枯草杆菌生长和抗鸡球虫病的作用。本工作利用电生理胞内记录方法，在小鼠膈神经膈肌标本上观察了它的作用。结果为（１）ＮＨＭ不可逆地阻遏神经肌肉传递，２０μｇ／ｍｌ时１．５－２ｈ完全阻遏。（２）２－２０μｇ／ｍｌ浓度的ＮＨＭ引起小终板电位发放频率显著地和阵发性地升高，持续４０－６０ｍｉｎ；其间，终板电位的平均量子含量也相应升高，并随传递阻遏的发生，终     

雷帕霉素介导的caspase 9同源二聚化调控人类多能干细胞自杀

人诱导多能干细胞（human induced pluripotent stem cells，hiPSCs）在再生医学领域具有广阔的应用前景。然而，多能干细胞（pluripotent stem cells，PSCs）具有肿瘤化风险，成为其临床应用最主要的安全性问题。雷帕霉素是一种安全和广泛使用的免疫抑制药物，通过诱导FKBP12与FRB片段的异源二聚起作用。为了保障hiPSCs治疗的安全性，本研究将雷帕霉素诱导的caspase 9（riC9）基因插入到AAVS1安全位点，构建了含有EF1α启动子、FRB-FKBP-Caspase9（CARD结构域）融合蛋白和嘌呤霉素抗性基因的供体，并与sgRNA/Cas9载体共转染hiPSCs。用嘌呤霉素筛选2周后，收集单个克隆进行基因和表型分析。最后，用雷帕霉素诱导caspase9同源二聚化，激活工程细胞的凋亡。通过对筛选获得的5个hiPSCs克隆鉴定，表明供体DNA准确敲入内源性AAVS1位点。hiPSCs保持正常的多潜能状态和增殖能力。雷帕霉素可诱导caspase 9同源二聚化，并激活细胞凋亡程序。本研究通过药物精确调控caspase 9的同源二聚化来启动细胞自杀，实现了可控的hiPSCs存活，这为保证hiPSCs治疗的安全性提供了新的策略。