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361.
Baylor医学院的KoenVenken博士创新了基因敲入技术,这一突破使生物学家向果蝇体内敲入大量的DNA成为可能。传统的方法只能在果蝇基因组中插入较小的DNA片段,Venken的方法可将20000到133000大小碱基对的DNA敲入果蝇基因组。传统上,生物学家利用果蝇基因组中的P元素能够整合外源性DNA片段的特性,将目标DNA片段插入P元素,再将含有外源性DNA的P元素复合体导入果蝇基因组。这一传统方法能整合的DNA片段长度有限。Venken在研究中需要敲入很长的DNA片段到果蝇体内。于是他将含有DNA片段的P元素转入到质粒里,质粒能够较P元素自身更稳定地携带大片断DNA。  相似文献   
362.
本文建立了GATA1s敲除人多能干细胞(human pluripotent stem cells,hPSCs)细胞株,并以此为模型探讨了GATA1s缺失对体外诱导造血分化的影响。本文通过构建含有重组臂-敲入片段(GATA1外显子Ⅱ-Ⅵ序列及BGH polyA序列)-LoxP-潮霉素筛选标记-LoxP-重组臂的打靶质粒和含有gRNA-Cas9的gRNA质粒对hPSCs进行基因编辑以敲除GATA1s。通过第一步电穿孔将以上质粒导入细胞,潮霉素初步筛选7 d后的阳性克隆进行下一步电穿孔环化重组酶(Cre)使LoxP位点特异性重组以去除筛选标记,通过单细胞克隆的方式进一步培养,PCR及测序鉴定出正确基因编辑细胞,最后通过蛋白质免疫印迹验证其GATA1与GATA1s蛋白的表达情况,验证敲除GATA1s后的细胞株进行体外诱导造血分化,发现其CD34+、CD43+及CD45+细胞增多,但GPA+、CD41a+及CD42b+细胞显著减少,通过转座子系统过表达GATA1也不...  相似文献   
363.
本研究拟应用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UHPLC-Q-Orbitrap HRMS)技术对不同年限广陈皮进行入血成分鉴定研究。课题组采用UHPLC-Q-Orbitrap HRMS技术,以及Compound Discover 3.0软件进行分析,比较广陈皮提取液、给药血浆、空白血浆的图谱差异,将分子量、二级碎片信息、参考文献以及对照品信息进行结合,找出口服广陈皮药液后吸收入血的原型成分和代谢产物。结果显示2、4、8年广陈皮鉴定出成分分别为34、24和15个,2年广陈皮黄酮类入血成分含量高于4、8年广陈皮。UHPLC-Q-Orbitrap HRMS能快速、精确、全面地分析广陈皮给药后的血中移行成分,为后期广陈皮的药效物质基础规律研究提供参考,为陈久者良科学内涵的研究提供新思路。  相似文献   
364.
分别于2018年4月和2019年4月对滆湖入湖河流底栖动物开展调查,并利用生物指数对水质进行生物学评价。结果表明:共鉴定滆湖入湖河流底栖动物28种,以重度耐污种霍甫水丝蚓(优势度为0.46)和中等耐污种铜锈环棱螺(优势度为0.11)占据绝对优势。生物多样性方面以鹤溪河最高,湟里河、扁担河次之,夏溪河及入湖河口最低,水生植物分布是影响各区域底栖动物多样性的重要因素。卡尔森营养状态指数(TSI)与水质污染等级生物评价结果基本一致,以新孟河延伸拓浚工程沿线为界,鹤溪河、夏溪河、湟里河中上游河段处于中度富营养化水平,水体为轻-中污染状态,而下游河段、扁担河及入湖河口处于重度富营养化水平,水体为中-重污染状态。  相似文献   
365.
目的:探讨微创后入路手术治疗肩胛骨骨折的临床疗效。方法:选取2009年6月~2014年1月在我院接受后路内固定手术治疗的40例肩胛骨骨折,治疗组20例,行微创后入路内固定术,对照组20例,行Judet入路内固定术。比较两组间手术时间、术中出血量、切口总长度及术后肩关节功能Constant评分。结果:40例患者均获随访,随访时间12~36个月,平均16.5个月。治疗组手术时间、术中出血量、切口总长度均优于对照组(均P0.05),术后6个月肩关节功能:治疗组优15例,良3例,可1例,差1例,优良率90%,对照组优14例,良2例,可3例,差1例,优良率80%。两组优良率比较,差异有统计学意义(P0.05)。两组均无感染、骨折延迟愈合或不愈合。对照组1例发生肩胛上神经卡压。结论:微创后入路手术操作简单,创伤小,恢复快,是一种安全有效的肩胛骨骨折手术入路。  相似文献   
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