寄生虫致癌与抗癌的研究进展

随着分子生物学与肿瘤免疫学的不断发展,人们对寄生虫及其与肿瘤相互关系的认识不断深入,对待寄生虫的态度也从彻底消除转向了不断深入了解并加以利用。近几年来,随着对病原微生物抗肿瘤研究的不断深入,人们也逐步发现寄生虫诱导的免疫反应具有一定的抗肿瘤效应。从某些寄生虫具有致癌作用到一些寄生虫具有抗肿瘤效应,寄生虫的利用价值在不断被发掘,人们对于寄生虫与肿瘤关系的认识也在不断加深。本文就寄生虫与肿瘤的关系(致癌)以及寄生虫抗肿瘤的相关研究进展作一综述。     

抗iLRP单克隆抗体的制备和鉴定

为了研究抗iLRP (Immature laminin receptor protein)单克隆抗体在免疫治疗中的应用,本研究采用重组iLRP对6~8周龄BALB/c雌性小鼠进行免疫,取免疫后小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞系SP2/0进行细胞融合,在HAT (Hypoxanthine aminopterin thymidine)半固体培养基上挑选分离明显的细胞克隆于96孔板培养后,取上清液通过ELISA法进行克隆筛选,初次筛选得到23株阳性克隆,复筛后得到13株稳定分泌抗体的细胞株。抗体类别鉴定显示,其中9株为IgM,3株为Ig G1,1株为IgG2a,轻链类型都为κ型。其中1株IgG1和IgG2a用于制备小鼠腹水,经Protein-G柱纯化,SDS-PAGE检测抗体纯度,Western blotting验证抗体特异性。结果表明,抗体纯度均大于90%,并与i LRP有明显的特异性结合。此结果为后续的深入研究提供了一套完整有效的抗iLRP单克隆抗体生产和鉴定的程序,对以iLRP为治疗靶点的单克隆药物研究以及最近兴起的CAR-T (Chimeric antigen receptor modified T cell)免疫治疗具有积极的意义。     

细菌DNA抗肿瘤免疫的实验研究

应用纯化提取的３种细菌染色体ＤＮＡ进行体内抗肿瘤免疫实验。结果表明，大肠埃希菌、铜绿假单胞菌和长双岐杆菌ＤＮＡ由于含有大量的非甲基化的ＣｐＧ二核苷酸为核心的序列（称为ＣｐＧ ｍｏｔｉｆ），均能诱导ＮＫ细胞和单核细胞的激活，从而起到抗肿瘤免疫的作用。为微生物ＤＮＡ制剂作为生物反应修饰剂（ＢＲＭ）应用于抗肿瘤免疫提供了科学依据。     

PD-1/PD-L1抑制剂对肺鳞状细胞癌患者调节性T细胞及其亚型的影响

摘要 目的：探讨PD-1/PD-L1抑制剂对肺鳞状细胞癌（鳞癌）患者调节性T细胞（Regulatory T cell，Treg细胞）及其亚型的影响。方法：2019年1月至2020年12月来我院就诊的肺鳞癌初诊患者纳入本项研究；患者均接受Nivolumab治疗，根据治疗效果不同，将患者分为缓解组（n=20）和无效组（n=20）；流式细胞术检测外周血总Treg细胞、PD-1+Treg细胞、CD150+Treg细胞、CTLA-4+Treg细胞、LAG-3+Treg细胞的比例。结果：缓解组外周血总Treg细胞、CTLA-4+Treg细胞和LAG-3+Treg细胞的比例分别为4.052±0.231%、1.616±0.099%和0.328±0.021%，无效组的比例分别为5.532±0.395%、3.277±0.224%和0.857±0.108%，差异均具有显著的统计学意义（t=3.239，P=0.009；t=6.776，P＜0.001；t=4.807，P＜0.001）；缓解组外周血PD-1+Treg细胞和CD150+Treg细胞的比例分别为0.195±0.016%和1.530±0.113%，无效组的比例分别为0.203±0.018%和1.787±0.157%，差异均不具有统计学意义（t=0.318，P=0.757；t=1.329，P=0.214）。结论：PD-1/PD-L1抑制剂治疗无效的肺鳞癌患者外周血总Treg细胞、CTLA-4+Treg细胞和LAG-3+Treg细胞的比例均显著升高。     

m6A甲基化修饰在前列腺癌发生发展中的调控机制

N6-腺苷甲基化(N6-adenosine methylation)是腺苷N6位点的甲基化形式，常出现在真核生物的mRNA中，是最常见的RNA内部修饰的方式之一。研究表明，m6A通过调节基因的表达来影响细胞的生物过程；同时m6A的调控因子也在各种癌症的发生、发展中发挥着关键作用。前列腺癌(prostate cancer, PCa)是一种常见的男性恶性肿瘤，超过60岁的男性的患病风险逐年攀升，并且随着人口老龄化的问题，可以预计PCa的患病数目会继续升高。近年来，关于m6A在肿瘤发生发展中的作用逐渐受到广泛关注，但是m6A甲基化修饰在PCa中的研究仍然有限，因此，进一步探讨二者之间的关系显得尤为重要。本文综述了近年来关于m6A甲基化修饰在PCa中的作用、机制及应用的研究进展，尤其详细综述了METTL3,FTO,YTHDF2三种经典的m6A相关调控蛋白质在PCa中的作用机制；并阐述了m6A在晚期PCa(例如：去势抵抗性前列腺癌，骨转移性前列腺癌)中的潜在应用。从甲基化修饰角度为PCa的早期诊断、治疗和预后挖掘一套有效治疗策略，为实现个体化治疗提供更多理论参考。     

超级抗原在肿瘤免疫治疗中的应用

超级抗原（Superantigen，SAg）作为一种优秀的免疫激活剂，通过诱导T细胞的活化来增强机体抗肿瘤免疫反应，可能是未来肿瘤免疫治疗的新希望。“超级抗原”一词在1989年被首次提出，用来描述细菌毒素对免疫系统的高效刺激特性。金黄色葡萄球菌能产生约20种不同类型的金黄色葡萄球菌肠毒素（Staphylococcal enterotoxins，SEs)，这类蛋白质抗原是典型的细菌超级抗原，是一种能够在极低浓度下即可有效刺激细胞毒性T淋巴细胞活性和促进细胞因子产生的诱导剂。超级抗原通过与抗原呈递细胞（APCs）上的主要组织相容性复合体II（MHC-II）的外沟和T细胞受体（Tcr）的特异性Vβ区交叉结合，直接激活T淋巴细胞，使含有TCR Vβ结构域的T细胞进行超表达，使免疫细胞释放大量的抗肿瘤细胞因子和其他效应分子。基于免疫细胞具有识别自我和非我的特点，超级抗原利用人体自身免疫系统杀死肿瘤细胞，因此在肿瘤免疫治疗领域具有巨大应用潜力。对超级抗原的生物活性特征、临床抗肿瘤效果、药物开发策略等多方面进行简要综述，并对其未来应用前景加以展望。对超级抗原的作用机理及临床应用的深入研究，将有助于肿瘤免疫治疗的发展，从而使通过T淋巴细胞干预治疗恶性肿瘤成为可能。