Nucleostemin与MDM2在肺腺癌组织中的表达及意义

核干细胞因子(Nucleostemin,NS)是细胞增殖的调节因子,在肺腺癌组织中的表达及与鼠双微染色体2(murine double minute 2,MDM2)表达的相关性不清楚.通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测22对肺腺癌和癌旁正常组织NS mRNA的表达;应用免疫组织化学SP法检测45例肺腺癌和22例癌旁正常组织NS与MDM2蛋白的表达,分析其相关性及意义.研究发现,肺腺癌组织中NS mRNA的相对表达强度明显高于癌旁正常组织(P0.01).NS和MDM2蛋白在肺腺癌组织中的阳性表达率分别为73.3%(33/45)、57.8%(26/45),而癌旁正常组织中无阳性表达(P0.01).二者的阳性表达均与组织学分级相关(P0.05),并且表达呈正相关(P0.05),而与患者性别、年龄、肿瘤大小、TNM分期及淋巴结转移无关(P0.05).结果表明NS基因的高表达对肺腺癌细胞的恶性增殖发挥了重要作用,可能是通过p53通路对细胞周期影响所实现的.     

基质金属蛋白酶-2、-9及其组织抑制剂-1在大鼠肺组织中的增龄变化

目的研究基质金属蛋白酶（MMPs）-2、-9及组织型基质金属蛋白酶抑制剂（TIMPs）-1在大鼠肺组织中的增龄性变化规律。方法不同月龄（1月龄、3月龄、12月龄、18月龄、24月龄）雄性清洁级（SD）大鼠47只分为5组,按月龄取实验大鼠的右下叶肺组织,用流式细胞术检测MMP-2、MMP-9及TIMP-1的表达水平,进行定量分析。结果 MMP-2、MMP-9和TIMP-1均随着月龄的增长呈先降后升波谷型曲线变化;3月龄、12月龄和18月龄MMP-2、MMP-9和TIMP-1均较1月龄明显下降,且以12月龄为最低值;24月龄MMP-2、MMP-9和TIMP-1均较1月龄上升。MMP-2/TIMP-1比值和MMP-9/TIMP-1比值均随着月龄的增长呈先升后降波峰型曲线变化;12月龄和18月龄均较1月龄明显升高,且以18月龄为最高点;3月龄的MMP-2/TIMP-1较1月龄有所上升,3月龄的MMP-9/TIMP-1与1月龄持平;24月龄的MMP-2/TIMP-1和MMP-9/TIMP-1较1月龄也有不同程度上升。结论大鼠肺组织中MMPs及其抑制剂TIMPs随月龄的增长,呈特征性变化规律。     

不同潮气量机械通气对大鼠肺组织HMGB1表达的影响

目的观察不同潮气量机械通气大鼠肺组织高迁移率族蛋白1（HMGB1） mRNA及其蛋白的表达水平,探讨HMGB1在呼吸机相关性肺损伤（VILI）发病中的作用。方法24只雄性Wister大鼠随机分为对照组、小潮气量组和大潮气量组,分别采用原位分子杂交技术和免疫组织化学染色法检测肺组织HMGB1 mRNA及其蛋白的表达水平。结果与对照组和小潮气量组比较,大潮气量组大鼠肺组织HMGB1 mRNA及其蛋白表达水平明显升高（均P〈0.01）,小潮气量组与对照组各项指标比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论大潮气量机械通气可诱导肺组织HMGB1 mRNA及其蛋白高表达;HMGB1分泌增多导致肺组织炎症反应扩大,可能是呼吸机相关性肺损伤（VILI）发生的重要因素之一。     

氧化应激对腺病毒E1A蛋白活化NF-κB转录活性的影响及其机制研究

目的:探讨腺病毒E1A蛋白对细胞内抗氧化物质谷胱甘肽(GSH)水平的影响及氧化应激对腺病毒E1A蛋白介导的核因子-κB(NF-κB)转录活化的影响。方法:构建稳定表达E1A蛋白的大鼠肺泡上皮细胞(E1A组)及对照质粒转染细胞(对照组),每组5×105个细胞,试验重复3次。采用H2O2刺激细胞,检测细胞内GSH水平。脂多糖(LPS)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)进行刺激,丁胱亚磺酰亚胺(BSO)进行干预,Western blot法检测NF-κB和AP-1蛋白的表达。结果:E1A+细胞内GSH基础水平与E1A-比较无显著差异,但在H2O2作用后没有诱导出GSH含量的上升,表现为下降而低平的趋势,去除氧化剂后,仍低于正常水平。E1A-细胞在氧化剂的作用后呈明显的上升趋势,去除氧化剂后仍高于基础水平。细胞内NF-κB蛋白表达(积分吸光度值):刺激前E1A+细胞分别为79.3±4.6和80.3±3.8,在LPS和TNF-α刺激后分别为81.8±3.9～89.9±1.6和94.1±1.9～99.8±1.6,均明显高于对照组(刺激前分别为68.3±3.8和69.4±4.3,刺激后分别为70.1±2.8～80.8±3.6和73.4±4.9～83.2±6.7)。给予BSO预处理后再用LPS和TNF-α刺激,E1A-细胞NF-κB蛋白表达的积分吸光度值(1.22±0.16和1.75±0.13)与LPS或TNF-α单独作用组(1.25±0.18和1.69±0.19)无明显差别;E1A+细胞NF-κB蛋白表达的积分吸光度值(1.75±0.10和2.26±0.21)明显高于LPS或TNF-α单独作用组(1.35±0.12和1.80±0.14)。结论:腺病毒潜伏感染持续表达E1A蛋白可以影响细胞GSH,降低细胞对氧化应激的耐受性,并可能通过此机制造成NF-κB异常转录活化,而GSH的降低又进一步放大了E1A介导的NF-κB转录活化作用。     

人肺孢子菌肺炎治愈1例

1 资料与方法 1.1 临床资料 患者,男性,36岁,因间断发热伴活动后气短1月余就诊。患者1个月前“感冒”后出现胸闷、活动后喘憋,休息后缓解。伴间断发热。当地医院给予先锋必和阿齐霉素静滴20余天,效果不佳。10余天前咳嗽、咳痰加重,痰色白,量少,不黏,易咳出,无咳血。伴双肋部胸痛,与咳嗽有关。仍间断发热,体温最高39．7℃,伴膝关节、后背部游走性疼痛。既往史：1998年肾活检确诊为慢性肾小球肾炎,膜性增生性肾小球肾炎,IgA肾病（Ⅳ～Ⅴ级）,慢性肾功能不全（代偿期）。     

慢性吸烟大鼠气道平滑肌大电导的钙激活钾通道和Kv1.5表达的变化

复制大鼠的慢性吸烟模型,采用气道反应性的测定、HE染色、免疫组织化学染色、原位杂交和免疫印迹实验等方法,观察吸烟对大鼠支气管平滑肌大电导的钙激活的钾通道(BKca)和电压依赖性延迟整流钾通道Kv1．5蛋白和mRNA表达的影响,以阐明吸烟引起的气道高反应性发病机制中钾通道表达变化的作用。结果显示：(1)慢性吸烟可降低大鼠大气道和小气道BKca和Kv1．5蛋白和mRNA表达;(2)大气道BKca的降低程度大于Kv1．5,小气道BKca和Kv1．5的降低程度无明显差异：(3)吸烟对全肺组织BKca和Kv1．5的蛋白表达无明显影响。上述结果提示,慢性吸烟可下调大鼠气道平滑肌钾通道BKca和Kv1．5的表达水平,是导致气道高反应的机制之一。     

阿斯匹林对大鼠在低O2高CO2下肺动脉高压的作用

目的：研究阿斯匹林(ASA)对慢性低O2高CO2性肺动脉高压的抑制作用。方法：将SD大鼠分为正常对照组,慢性低O2高CO2组,慢性低O2高CO2 阿斯匹林组。用光镜、放射免疫等方法,观察各组大鼠肺动脉平均压(mPAP)、颈动脉平均压(mCAP)、肺细小动脉显微结构、血浆和肺匀浆TXB2及6-keto-PGF1α含量的变化。结果：①低O2高CO2组mPAP比正常组显著增高,ASA组的mPAP比低O2高CO2组显著降低,3组间mCAP比较差异无显著性。②光镜下低O2高CO2组与正常组相比,肺细小动脉管壁面积／管总面积(WA／TA)和肺细小动脉中膜厚度(PAMT)均显著增高。ASA组WA／TA和PAMT显著降低。③低O2高CO2组血浆和肺匀浆TXB2、6-keto-PGF1α浓度以及TXB2／6-keto-PGF1α比正常组显著增高,而ASA组与低O2高CO2组相比显著降低。结论：ASA有抑制慢性低O2高CO2性肺动脉高压和肺血管重构的作用。     

哮喘豚鼠肺内ADM表达变化及对离体气管条张力的作用

目的：通过观察肾上腺髓质素（ADM）mRNA在豚鼠哮喘模型肺内的表达及对哮喘豚鼠离体气管条张力的影响,研究ADM在支气管哮喘（简称哮喘）发病机制中的作用。方法：用原位杂交方法检测ADM mRNA在豚鼠哮喘模型肺内的表达,用组胺诱导豚鼠离体气管条收缩后,观察不同浓度的ADM对其收缩作用影响。结果：原位杂交结果显示正常及哮喘豚鼠肺内均有ADM mRNA的表达,但哮喘组较正常组明显增多（P＜0．05）,ADM可抑制组胺诱导的哮喘豚鼠离体气管条的收缩,并呈量效关系,当浓度达10^-8mol/L时抑经达到最大,而且即使加大ADM的浓度,抑制率未继续明显增加,并对致敏气管螺旋条的舒张作用明显大于正常气管螺旋条。结论：哮喘时,肺内ADM mRNA的表达明显增多,ADM可抑制组胺诱导的豚鼠离体气管条的收缩,浓度为10^-8mol/L时抑制率达到最大。提示ADM在哮喘发病过程中起重要作用。     

知母宁对慢性低O2高CO2大鼠肺动脉高压的影响及其机制研究

目的：研究知母宁对慢性低氧高二氧化碳性肺动脉高压的抑制作用及其作用机制。方法：将SD大鼠分为正常对照组,4周低O2高CO2组,4周低O2高CO2^ 知母宁组（知母宁组）。用透射电镜、图像分析、免疫组化、组织原位杂交技术等方法,观察各组大鼠肺动脉平均压（mPAP)、颈动脉平均压（mCAP)、肺细小动脉显微和超微结构、血CO浓度、血红素氧合酶－1（HO－1）及其基因表达的变化。结果：①低O2高CO2组mPAP比正常组显著增高,知母宁组mPAP比低O2高CO2组显著降低;3组间mCAP比较差异无显著性。②全血CO浓度低O2高CO2组比正常组显著增高,知母宁组比低O2高CO2组增高。③光镜下低O2高CO2组与正常组相比,肺细小动脉管壁面积／管总面积、肺细小动脉中膜平滑肌细胞核密度、肺细小动脉中膜厚度均显著升高,知母宁组与低O2高CO2组相比以上指标显著降低。④电镜下知母宁组肺细小动脉中膜平滑肌细胞增生、面积增大、染色质增多、外膜胶原纤维增生均较低O2高CO2组明显减轻。⑤免疫组化、原位杂交发现低O2高CO2组大鼠肺细小动脉HO－1及mRNA与正常组比较均明显增加,知母宁组大鼠肺细小动脉HO－1及mRNA表达均较低O2高CO2组为高。结论：知母宁有抑制慢性低氧高二氧化碳性肺动脉高压和肺血管结构重建的作用,上调HO－1及其基因表达、使CO合成增多可能为其重要作用机制。     

小鼠哮喘模型通气功能检测实验器材的改进

通气功能检测可直接反映支气管痉挛等所造成的气道阻力等的改变 ,是判定支气管哮喘动物模型的可靠指标 ,目前国外小鼠支气管哮喘模型多采用此项检测 ,但国内尚未见报道。它的部分实验器材在国内很难仿制 ,哈佛动物呼吸器造价昂贵 ,我们对其器材进行改进 ,并作以简要报道。Ｆｉｇ.1ＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌａｐｐｌｉａｎｃｅｓＡ :ｂｅｆｏｒｅｉｍｐｒｏｖｉｎｇ ;Ｂ :ａｆｔｅｒｉｍｐｒｏｖｉｎｇＦｉｇ .2Ｄｉａｇｒａｍｍａｔｉｃｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎｏｆｒｏｄｅｎｔｖｅｎｔｉｌａｔｏｒ1　材料与方法(1)实验器材　①实验…