外源性雌、孕激素对裸鼠人子宫内膜异位症病灶中MMP-2、TIMP-2及VEGF蛋白表达的影响

目的:探讨雌、孕激素对异位内膜及MMP-2、TIMP-2、VEGF蛋白表达的影响.方法:将育龄妇女正常分泌晚期子宫内膜注入裸鼠盆腹腔,建立EMs裸鼠模型,随机分为四组,分别予雌激素(E)、孕激素(P)、雌激素+孕激素(E+P)及对照(C)组生理盐水肌肉注射.术后18天处死裸鼠,取异位组织,采用免疫组化方法(PV6001/6002法)检测各组异位内膜MMP-2、TIMP-2、VEGF蛋白表达水平,与种植前子宫内膜比较.结果:异位内膜较正常内膜MMP-2、VEGF蛋白表达增强,TIMP-2蛋白表达减弱(P均<0.01);E组、P组、E+P组MMP-2/TIMP-2比值及VEGF蛋白表达均高于C组(P均<0.01).E+P组同E组相比MMP-2/TIMP-2比值及VEGF蛋白表达无差别(P均>0.05).结论:异位内膜的侵袭性和血管新生能力增强,且对激素的反应不同于正常内膜.     

SiRNA-VEGF对子宫内膜癌ishikawa细胞增殖及凋亡的影响

目的:研究针对VEGF的RNAi技术对人子宫内膜癌细胞系ishikawa细胞中VEGF的抑制作用及对细胞生长、增殖的影响。方法:设计并合成针对VEGF序列特异性siRNA及阴性对照siRNA,转染ishikawa细胞,分别于转染后12h、24h、48h、72h、7d后提取细胞RNA,应用实时荧光定量PCR检测其对VEGF mRNA表达水平的影响,MTT法检测细胞增殖的情况,于转染后48h收集细胞软琼脂培养检测细胞克隆形成能力。结果:转染针对siRNA-VEGF的ishikawa细胞,于转染后12h、24h、48h、72h VEGF mRNA表达水平明显下降、细胞增殖受到明显的抑制,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),于转染后7天这种抑制作用消失(P>0.05)。转染后48h实验组细胞克隆形成率低于对照组(P<0.05)。结论:针对VEGF的RNAi技术可有效抑制子宫内膜癌细胞系ishikawa细胞中VEGF基因的表达,抑制细胞生长增殖及细胞集落形成能力,提示VEGF基因在子宫内膜癌的发生、发展中可能具有重要作用,为进一步利用RNAi技术抑制肿瘤生长、血管形成及局部侵袭和远处转移提供研究基础。