间充质干细胞外泌体对海马星形胶质细胞活化的抑制作用研究

目的探讨间充质干细胞外泌体 (MSC-Exo)对海马星形胶质细胞活化的抑制作用。方法实验通过超速离心法提取脐带MSC-Exo,并使用PKH-26染料标记;MSC-Exo预处理原代海马星形胶质细胞后使用脂多糖 (LPS)诱导细胞活化,并分为对照组、LPS组和LPS+MSC-Exo组,进而行免疫细胞化学检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、C3的表达、免疫印迹实验检测C3、GFAP的蛋白表达,以及酶联免疫吸附测定炎症因子白介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α的水平,分别检测各组细胞的抗原表达、表型变化和炎症反应。统计采用单因素方差分析 (ANOVA)及最小显著性差异法 (LSD)检验。结果实验提取的MSC-Exo符合外泌体的一般生物学特性,且能迁移到星形胶质细胞胞体和突起。海马星形胶质细胞经LPS诱导后,其标记性抗原GFAP (1.47±0.15比0.95±0.17,P < 0.01)、A1型标记物C3 (1.32±0.23比0.87±0.16,P < 0.05)、IL-1β[(282.90±5.13)pg/ mL比 (252.53±5.51)pg/mL,P < 0.05]、TNF-α[(128.26±1.89) pg/ mL比(111.86±2.84)pg/mL,P < 0.01]和IL-6[(180.95±3.16) pg/ mL比(163.95±3.71)pg/mL,P < 0.05]的表达较正常组明显升高;MSC-Exo预处理后,GFAP(0.97±0.16 比1.47±0.15,P < 0.01)、C3 (0.83±0.12比1.32±0.23,P < 0.01)、IL-1β[(262.20±2.64)pg/mL比(282.90±5.13) pg/mL,P < 0.05]和TNF-α[(120.79±0.42)pg/mL比(128.26±1.89)pg/mL,P < 0.05]的表达较LPS组明显降低,IL-6[(187.25±0.64)pg/mL比(180.95±3.16)pg/mL,P > 0.05]的表达未见明显变化。结论 MSC-Exo对海马星形胶质细胞活化具有明显的抑制作用。     

辛伐他汀对大鼠蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的治疗效果研究

目的:观察辛伐他汀对大鼠蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的治疗效果并探讨其可能机制。方法:将48只健康Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、辛伐他汀组,每组各16只。模型组以及辛伐他汀组给予枕大池注入自体动脉血法以建立大鼠蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的动物模型,辛伐他汀组于第1次注血后开始给予辛伐他汀皮下注射,其余两组给予等体积生理盐水皮下注射。比较各组大鼠情况、组织学检查结果、蛛网膜下腔出血量评分、神经功能缺损评分、血管内径、血管舒张度、血管痉挛程度、eNOS以及TNF-α蛋白表达水平。结果:实验过程中,正常对照组无大鼠死亡,模型组大鼠死亡率为33.33%,辛伐他汀死亡率为6.67%,较模型组显著降低(P0.05)。治疗后,与正常对照组相比,模型组及辛伐他汀组大鼠蛛网膜下腔出血量评分及TNF-α阳性表达率较高(P0.05),神经功能缺损评分、血管内径、D/T及eNOS阳性表达率较低(P0.05);与模型组相比,辛伐他汀组蛛网膜下腔出血量评分及TNF-α阳性表达率较低(P0.05),神经功能缺损评分、血管内径、D/T及eNOS阳性表达率较高(P0.05)。结论:辛伐他汀可有效改善蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛,这可能与其上调eNOS蛋白表达并下调TNF-α蛋白表达有关。     

长链非编码RNA HOXA11-AS在胶质瘤中的表达及其临床意义的研究

目的:探讨长链非编码RNA HOXA11-AS在胶质瘤组织中的表达以及与胶质瘤患者临床预后的相关性。方法:首先,应用RT-PCR法检测人胶质瘤组织以及正常脑组织中HOXA11-AS的表达情况;其次,分析HOXA11-AS的表达水平与胶质瘤患者临床病理学特征之间的关系;最后,探讨HOXA11-AS的表达水平与胶质瘤患者预后之间的相关性。结果:RT-PCR显示,较之于正常脑组织(1.00±0.17),HOXA11-AS在胶质瘤组织(3.89±0.34)中的表达水平显著升高(P0.001),且随着肿瘤学分级的增高,HOXA11-AS的表达水平也随着升高(Grade Ⅰ-Ⅱ, 2.96±0.21 vs. Grade Ⅲ-Ⅳ, 4.83±0.50, p=0.003)。x~2检验提示HOXA11-AS表达水平与胶质瘤患者的肿瘤学分级、KPS评分以及患者的复发情况具有显著相关性,而与患者的年龄、性别、肿瘤大小等无相关性。Kaplan-Meier分析患者生存率,结果显示,HOXA11-AS低表达组患者的生存率明显高于HOXA11-AS高表达组患者,差异具有统计学意义(P0.001)。最后,我们的研究结果发现,HOXA11-AS的高表达水平、肿瘤学分级的增高、KPS评分80分均为影响胶质瘤患者预后的独立危险因素(P0.05)。结论:HOXA11-AS与胶质瘤患者预后密切相关,且为预测患者预后的独立因素。     

tBHQ和SFN在创伤性脑损伤小鼠中的疗效比较性分析

目的:探讨叔丁基对苯二酚(t BHQ)和莱菔硫烷(SFN)在患有创伤性脑损伤大鼠的疗效差异性。方法:80只健康成年的雄性SD大鼠分为假手术组、常规损伤组、t BHQ治疗组和SFN治疗组,使用电子颅脑损伤仪(e CCI)制备TBI模型。其中t BHQ治疗组在伤前24 h大鼠腹腔注射三次t BHQ(50 mg/kg),每8 h一次;SFN治疗组在伤后15 min给予腹腔注射SFN(5 mg/kg)。给药24 h后,采用m NSS方法评价各组大鼠神经功能缺损状况,利用干湿称量法计算脑含水量,Western blot和ELISA方法分别测定大鼠脑组织的NOX2和Nrf2的表达水平。结果:损伤发生后第24 h,t BHQ治疗组和SFN治疗组在m NSS评分((4.5±0.71)vs(9.2±0.79),(6.0±0.82)vs(9.2±0.79))、脑水肿(79.4%vs 85.6%,80.3%vs 85.6%)、NOX2和Nrf2(0.93 ng/m L vs 0.81 ng/m L,0.87 ng/m L vs 0.81 ng/m L)表达上与常规损伤组差异明显,而t BHQ治疗组和SFN治疗组间在m NSS评分((4.5±0.71)vs(6.0±0.82))、NOX2和Nrf2(0.93 ng/m L vs 0.87 ng/m L)表达上差异显著。结论:在大鼠TBI模型中,t BHQ和SFN均可以有效的降低机体自身的氧化应激作用,并改善神经功能,但t BHQ的疗效要好于SFN。