ERK1/2通路参与15-羟二十碳四烯酸收缩缺氧大鼠肺动脉的过程

缺氧诱导的15-羟二十碳四烯酸（15-hydroxyeicosatetraenoic acid,15-HETE）是引起肺动脉收缩的重要介导因子。15-HETE引起肺动脉收缩的信号转导途径尚不清楚。本研究旨在确定细胞外信号调节激酶1／2（extracellular signal-regulated kinase-1／2,ERK1／2）信号转导通路是否参与15-HETE收缩缺氧火鼠肺动脉的过程。采用组织浴槽肺动脉环张力检测、蛋白质免疫印迹Western blot）和免疫细胞化学方法。制备缺氧大鼠动物模型,成年雄性Wistar大鼠在低氧环境下（吸入氧分数为0．12）正常喂养9d。显微分离直径1-1．5mm肺动脉,剪成长为3mm的动脉环,进行血管张力检测。用ERK1／2上游激酶（MEK）抑制剂PD98059抑制ERK1／2活性。结果显示,PD98059可明显抑制15-HETE对缺氧大鼠肺动脉环的收缩作用。在去除内皮的肺动脉环,PD98059仍叮明显降低15-HETE的缩血管作用。Western blot和免疫细胞化学结果都显示,15-HETE能促进ERK1／2磷酸化。由此表明ERK1／2信号转导通路参与15-HETE收缩缺氧大鼠肺动脉的过程。     

乳腺癌中Survivin和VEGF的表达

目的:研究抗凋亡蛋白Survivin,血管内皮生长因子VEGF在乳腺癌中的表达情况,探讨二者的表达与乳腺癌侵袭的关系以及二者之间的联系。从而为临床诊断和治疗乳腺癌提供参考价值。方法:应用免疫组织化学方法检测Survivin和VEGF在41例乳腺癌标本中和10例正常乳腺组织对照组中的表达情况。结果:与对照组相比,乳腺癌中Survivin的阳性表达(68.29%)与VEGF的表达(63.41%)明显升高,且他们的表达与肿瘤的淋巴结转移和c-erBb-2有相关性。而与患者的年龄、临床分期、ER、PR和肿瘤大小无明显相关性。Survivin表达与VEGF表达呈明显正相关(P<0.01)。结论:Survivin(生存素)与VEGF(血管内皮生长因子)的表达在乳腺癌的发生、发展中起重要作用。Survivin的高表达促进了VEGF的促内皮细胞功能。     

缺氧预处理神经干细胞移植对大鼠急性脊髓损伤后神经胶质细胞凋亡及脊髓空洞形成的影响

目的:研究缺氧预处理神经干细胞(NSCs)移植对大鼠急性脊髓损伤(ASCI)后神经胶质细胞凋亡及脊髓空洞形成的影响.方法:将30只SD大鼠分为假手术对照组;脊髓损伤组;去铁敏组;普通NSCs组;缺氧预处理NSCs组.制成脊髓损伤模型,移植后观察脊髓神经胶质细胞凋亡情况及脊髓空洞形成情况.结果:经去铁敏缺氧预处理培养的NSCs与常规培养的NSCs无明显形态学变化.移植术后7d,缺氧预处理NSCs移植能显著减少脊髓损伤周围区神经胶质细胞的凋亡数量,减少脊髓空洞形成.结论:缺氧预处理NSCs移植能明显抑制大鼠急性脊髓损伤后神经胶质细胞凋亡,减少脊髓空洞的形成.     

磷酸肌酸对新生鼠缺氧缺血性脑损伤线粒体功能的影响

目的:探讨外源性磷酸肌酸(PCr)在缺氧缺血性脑损伤中对线粒体功能的影响。方法:将96只七日龄Wistar新生鼠随机分为四组,分别为A假手术组、B生理盐水对照组、C磷酸肌酸小剂量干预组、D磷酸肌酸大剂量干预组,每组24只。除假手术组外其余三组动物制成HIBD模型,并在术前1h分别给予生理盐水、小剂量磷酸肌酸、大剂量磷酸肌酸腹腔注射,24h后取脑,观察脑组织线粒体内三磷酸腺苷(ATP)、还原型谷胱甘肽(GSH)以及丙二醛(MDA)的含量变化。结果:外源性磷酸肌酸干预后脑组织中线粒体内ATP、GSH、MDA含量与盐水对照组相比具有差异性(P<0.05)。结论:外源性磷酸肌酸可以改善线粒体能量代谢,减轻脂质过氧化,保护脑组织。     

翻白草对大鼠和家兔高血脂模型的降血脂作用

目的探讨翻白草对高血脂大鼠和家兔的降血脂作用。方法采用Wistar大鼠60只（其中50只为高脂饲料诱导成高血脂动物模型,10只为空白对照组）,家兔36只（其中30只为高脂饲料诱导成高血脂动物模型,6只为空白对照组）。随机分为6组（翻白草大、中、小3个剂量组,模型组,脂必妥对照组,空白对照组）。连续给药6周,分别于给药后第4周、第6周采血,检测血清中胆固醇（TC）、甘油三脂（TG）及低密度脂蛋白（LDL）浓度。结果翻白草各给药组与模型组比较,给药后第4周,翻白草可降低高血脂大鼠和家兔血清中TC、TG、LDL的含量（P〈0.05）;给药后第6周,可显著降低高血脂大鼠和家兔血清中TC、TG、LDL的含量（P〈0.01）。结论翻白草具有很好的降血脂作用。     

C-反应蛋白对脂肪细胞脂联素表达的影响

通过体外培养脂肪细胞,研究C-反应蛋白（CRP）对大鼠脂肪细胞脂联素蛋白分泌及mRNA基因表达的影响。取大鼠附睾脂肪垫培养脂肪细胞。用0、10、50ug／mL的CRP刺激脂肪细胞6h,提取细胞RNA,用实时荧光定量RT-PCR技术检测脂联素mRNA表达的变化;收集细胞培养液,运用Western blot技术检测脂联素蛋白分泌的变化。结果显示0、10、50ug／mL的CRP对大鼠脂肪细胞脂联素mRNA表达的影响无差异（P〉0．05）。50、10ug／mL的CRP均可减少大鼠脂肪细胞培养液中脂联素蛋白的分泌量（P〈0．05）。CRP可呈剂量依赖性的降低脂肪细胞脂联素蛋白分泌的水平。而各组CRP未能影响脂肪细胞脂联素mRNA的表达。CRP对脂肪细胞脂联素基因表达和蛋白分泌的研究可以揭示转录后的控制决定了CRP对脂联素的影响。     

PTEN及COX-2在乳腺癌的表达、意义及相关性

目的:研究PTEN及COX-2在乳腺癌的表达、与临床病理特征的关系及二者表达的相关性.方法:采用免疫组化技术(S-P法)检测48例乳腺癌和12例乳腺纤维腺瘤中PTEN、COX-2的表达情况.结果:PTEN在乳腺癌中的高表达率52.08%(25/48)明显低于乳腺纤维腺瘤91.67%(11/12)(p<0.05);PTEN的表达水平与腋淋巴结转移呈负相关,与ER水平呈正相关.与乳腺纤维腺瘤组织16.67%(2/12)相比,COX-2在乳腺癌组织中的表达明显增强68.75%(33/48)(P<0.05),COX-2与肿瘤大小、临床分期、淋巴结转移及ER、PR水平有关.结论:PTEN和COX-2的异常表达与乳腺癌发生、发展密切相关;PTEN和COX-2在乳腺癌中的表达呈负相关,两者共同参与了乳腺癌发生和发展.     

V EGF 一D 及V EGFR 一3 在乳腺癌淋巴道转移中的作用

目的：探讨VEGF-D（血管内皮生长因子-D）及其受体VEGFR-3（血管内皮生长因子受体-3）在乳腺癌淋巴道转移中的作用和意义。方法：采用免疫组化二步法检测90例乳腺癌组织中VEGF—D／VEGFR-3的表达。结果：（1）VECF—D阳性率在淋巴结转移组为82％（41／50）显著高于未转移组37．5％（15／40）,（P〈0．01）。VEGFR-3阳性率在淋巴结转移组为84％（42／50）显著高于未转移组42．5％（17／40）,（P〈0．05）,且VEGF—D与VEGFR-3表达显著相关,（P〈0．05）。（2）VEGF—D表达与年龄、肿瘤大小、病理分型、临床分级、ER、PR无关,与CerbB-2表达显著相关,（P〈0．05）。结论：VEGF—D／VEGFIR-3的表达与乳腺癌淋巴道转移有关,VEGF—D可能促进了乳腺癌淋巴管的生成。     

过表达Grx1抑制HEK293T细胞中H2O2诱导的p38MAPK信号通路

谷氧还蛋白1（glutaredoxin1,Grx1）是细胞内一种重要的巯基 二硫键氧化还原酶,在细胞内氧化还原状态的调控及抵抗氧化应激损伤过程中发挥重要作用.为进一步探讨Grx1的抗氧化机制,本实验将重组质粒pcDNA3.1(+)-hGrx1瞬时转染HEK293T细胞,经RT-PCR和Western印迹验证,细胞转染后实现了Grx1的过表达;以不同浓度H₂O₂为损伤因素,建立细胞氧化应激模型,检测过表达Grx1后细胞存活率,丙二醛（MDA）含量,超氧化物歧化酶（SOD）活力和乳酸脱氢酶（LDH）漏出率的变化,观察过表达Grx1后细胞的抗氧化能力;用终浓度100 μmol/LH₂O₂作用于细胞,利用Western 印迹检测120 min内HEK293T细胞中p38MAPK磷酸化水平.实验结果表明,HEK293T细胞过表达Grx1后,缓解了细胞的氧化应激损伤;转染空载体组细胞p38MAPK磷酸化水平在H₂O₂刺激后5 min开始升高,15 min达到最高值,并可维持至120 min左右;而过表达Grx1组细胞p38MAPK磷酸化水平在H₂O₂刺激后各时间段没有明显改变,提示Grx1通过抑制H₂O₂诱导的p38MAPK信号通路激活发挥其抗氧化作用.     

急性心肌梗死后发生医院获得性贫血的影响因素及预后

目的:研究急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)后发生医院获得性贫血(hospital acquired anemia,HAA)的影响因素及预后情况。方法:以1131例入院时血红蛋白质量浓度正常的AMI患者为回顾性研究对象,医院获得性贫血(HAA)定义为:AMI患者入院时无贫血,而在住院期间最低血红蛋白质量浓度达到贫血的诊断标准。根据最低血红蛋白值将HAA划分为轻度HAA组(110 g/LHb正常值下限)、中度HAA组(90 g/L≤Hb≤110 g/L)、重度HAA组(Hb90 g/L),并将其与无HAA组进行对比,采用卡方检验比较各组间的预后差异及相关因素。所有患者在出院后1、2、3年进行随访,四组患者的远期病死率、心衰再住院率采用用卡方检验及Kaplan-Meier法。结果:在符合入选标准的HAA患者中,轻度HAA 440例(77.6%),中度HAA 105例(18.5%),重度HAA 22例(3.8%)。AMI患者发生HAA的相关因素包括年龄、女性、心力衰竭、PCI治疗、Cr、超敏C反应蛋白、左室射血分数(EF)、β-受体阻滞剂、低分子肝素、螺内酯(p0.001)。随着HAA程度的加重,病死率明显升高,而其与心衰的发生无明显相关性。结论:年龄、女性、心力衰竭、PCI治疗、Cr、超敏C反应蛋白、左室射血分数(EF)、β-受体阻滞剂、低分子肝素、螺内酯可能是AMI后发生HAA的影响因素,随着HAA程度的加重,患者病死率明显升高,但HAA的发生与严重程度与出院后心衰的发生无明显相关性。