PEI-Et输送特异性shRNA对大鼠肝细胞AGT基因表达的影响

目的:研究交联小分子量聚乙烯亚胺衍生物PEI-Et对大鼠肝细胞(BRL-3A)的细胞毒性、转染效率和携带高血压相关基因血管紧张素原(AGT)短发卡RNA(shRNA)沉默AGT表达的能力。方法:MTT法检测PEI-Et/shRNA复合物对BRL-3A细胞的毒性,流式细胞术检测PEI-Et/shRNA复合物对BRL-3A细胞的转染效率,RT-PCR和Western blot检测PEI-Et/shRNA对AGT的基因沉默效果。结果:在相同质量比(w/w)时PEI-Et/shRNA的细胞毒性小于PEI 25kDa/shRNA(P0.01),PEI-Et/shRNA在w/w为30时达到最高转染效率,高于PEI 25 kDa(P0.01),PEI-Et/shRNA能高效沉默BRL-3A细胞中AGT基因的表达。结论:PEI-Et在BRL-3A细胞中是一种低细胞毒性、高转染效率的非病毒基因载体(与商业化的PEI 25kDa比较),能携带AGT shRNA高效沉默BRL-3A细胞中AGT基因的表达,通过用PEI-Et/AGT shRNA来抑制AGT的表达将为高血压的基因治疗提供一种新的思路。     

磷脂酰肌醇3- 激酶对心脏的调节

磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinosito1 3-kinase,PI3K)是体内很多生理过程中起关键作用的信号分子,PI3K介导的信号转导通路调节细胞的增生、分化、凋亡等活动。以往研究较多的是PI3K与肿瘤发生发展的关系,最近很多研究发现PI3K介导的信号转导通路对心脏具有重要的调节功能。本文就近年来关于PI3K的结构和功能以及PI3K对心脏的调节的研究作一综述。     

磷脂酰肌醇3-激酶对心脏的调节

磷脂酰肌醇3-激酶（phosphatklylinositol 3-kinase,P13K）是体内很多生理过程中起关键作用的信号分子,P13K介导的信号转导通路调节细胞的增生、分化、凋亡等活动。以往研究较多的是P13K与肿瘤发生发展的关系,最近很多研究发现P13K介导的信号转导通路对心脏具有重要的调节功能。本文就近年来关于P13K的结构和功能以及P13K对心脏的调节的研究作一综述。     

交联聚乙烯亚胺衍生物的构建及其转染COS-7 细胞的研究

目的:优化构建交联聚乙烯亚胺(Polyethylenemine,PEI)衍生物PEI-Bu,研究其对非洲绿猴肾成纤维细胞系(COS-7)的转染活性和细胞毒性。方法:以PEI 800Da为骨架,1,4-丁二醇二氯甲酸酯为连接剂制备聚合物PEI-Bu,琼脂糖凝胶电泳考察其复合质粒DNA的能力,MTT法检测PEI-Bu对COS-7的毒性,以荧光素酶质粒作为报告基因,测定PEI-Bu/DNA复合物在COS-7细胞的转染活性。结果:凝胶电泳表明PEI-Bu/DNA在质量比大于1时即具有复合DNA的能力,PEI-Bu的细胞毒性随浓度增大而增大,在同一浓度下PEI-Bu的细胞毒性小于PEI 25kDa,(P<0.05),PEI-Bu/DNA在质量比为5时达到最高转染活性,高于PEI 25kDa(P<0.01),并与Lipofectamine2000相当(P>0.05)。结论:PEI-Bu在COS-7细胞中是一种低细胞毒性、高转染活性的非病毒基因载体(与商业化的PEI 25kDa比较),其在基因治疗领域中具有潜在的应用前景。     

血清尿酸、白介素6、P-tau181与阿尔茨海默病患者认知功能、日常生活能力和预后的关系分析

摘要 目的：探讨血清尿酸（UA）、白细胞介素-6（IL-6）、磷酸化Tau181（P-tau181）与阿尔茨海默病（AD）患者认知功能、日常生活能力和预后的关系。方法：选择2018年5月至2021年1月上海交通大学医学院附属第九人民医院与上海交通大学医学院附属第九人民医院黄浦分院收治的98例AD患者（AD组）和71例门诊体检的健康志愿者（对照组）,检测血清UA、IL-6、P-tau181水平,使用简易智力状态检查量表（MMSE）、蒙特利尔认知评估量表（MoCA）评估患者认知功能,Barthel指数（BI）评估患者日常生活能力。所有患者出院后随访1年,统计随访期间不良预后发生情况。Pearson相关性分析UA、IL-6、P-tau181与MMSE、MoCA、BI的相关性,多因素Logistic回归分析AD患者预后不良的危险因素。结果：AD组血清UA水平和MMSE、MoCA评分、BI低于对照组（P＜0.05）,IL-6、P-tau181水平高于对照组（P＜0.05）。AD患者血清UA水平与MMSE、MoCA评分、BI呈正相关（P＜0.05）,IL-6、P-tau181水平与MMSE、MoCA评分、BI呈负相关（P＜0.05）。多因素Logistic回归分析结果显示：长期卧床、AD痴呆阶段、高水平IL-6、高水平P-tau181是AD患者预后不良的危险因素（P＜0.05）,高水平UA是保护因素（P＜0.05）。结论：AD患者血清UA水平降低,IL-6、P-tau181水平升高,且与认知功能障碍、日常生活能力降低以及预后不良有关,检测血清UA、IL-6、P-tau181可辅助评估AD病情和预后。